吳志勇 劉道強(qiáng) 王曉虹
(南昌市動(dòng)物園管理處,江西 南昌 330025)
綠狒狒繁殖行為觀(guān)察及激素水平檢測(cè)
吳志勇 劉道強(qiáng) 王曉虹
(南昌市動(dòng)物園管理處,江西 南昌 330025)
利用人用診斷試紙對(duì)2只綠狒兩個(gè)月經(jīng)周期內(nèi)尿中的促黃體生成素(LH)的變化情況進(jìn)行測(cè)定。測(cè)算出綠狒的卵泡形成、排卵和黃體生成的時(shí)間,結(jié)合對(duì)綠狒繁殖行為的觀(guān)察,掌握了其發(fā)情周期及排卵規(guī)律,為提高配種受胎率提供了科學(xué)依據(jù)。
綠狒;促黃體生成素;排卵期;繁殖
綠狒屬靈長(zhǎng)目獼猴科,產(chǎn)于非洲,棲息于草原和山地,日行性。數(shù)十只成群在地面活動(dòng),在樹(shù)上或巖石上過(guò)夜。善游泳,視力好。主食植物及水果類(lèi),也捕食小動(dòng)物。繁殖期不固定,孕期180多天,多為1胎1仔,4歲性成熟,一般8歲左右開(kāi)始繁殖。
綠狒與人類(lèi)同屬靈長(zhǎng)類(lèi)動(dòng)物,因此與人類(lèi)具有許多極為相似的生理學(xué)特性,尤其是雌性個(gè)體的月經(jīng)周期和人類(lèi)非常相似,因此可用人用診斷試紙法測(cè)排卵,在不影響綠狒身體健康的前提下,對(duì)綠狒體內(nèi)生殖激素進(jìn)行采樣分析,以掌握綠狒月經(jīng)周期及排卵規(guī)律,更準(zhǔn)確的推算排卵發(fā)情日期,從而提高綠狒受胎率。
1.1 測(cè)試對(duì)象
南昌市動(dòng)物園飼養(yǎng)的兩只已性成熟的身體狀況良好、生理周期正常的雌性綠狒。
1.2 飼養(yǎng)狀況
兩只綠狒飼養(yǎng)在一個(gè)占地面積60 m2的籠舍里,籠舍格局是外設(shè)一個(gè)40m2左右的運(yùn)動(dòng)場(chǎng),場(chǎng)內(nèi)有假樹(shù)供其攀爬以增加活動(dòng)量,室內(nèi)有兩個(gè)10m2左右的內(nèi)舍,為其成功的交配繁殖提供了良好的條件。每天飼料以(玉米、麥麩)窩頭、饅頭為主,輔以蔬菜、水果、餅干等,繁殖及分娩期增加高蛋白類(lèi)飼料(雞蛋、煮熟的黃豆等)。
1.2 尿樣收集與檢測(cè)
2007年年初開(kāi)始對(duì)綠狒進(jìn)行觀(guān)察,并記錄下發(fā)情具體日期以及發(fā)情期間的行為,從7月開(kāi)始每日采集晨尿。在發(fā)情高峰期,也就是性皮腫開(kāi)始之日起,每天上午8∶00~9∶00在清掃綠狒籠舍的時(shí)候,收集少量晨尿,由于使用的試紙吸水性較好,所以不需要接尿,只需在地面上的相對(duì)干凈的尿跡中蘸取即可。
1.3 性激素水平測(cè)試方法
采用人用促黃體激素診斷試紙。
①將試紙條標(biāo)“MAX”一端浸入尿液,尿液液面請(qǐng)勿超過(guò)“MAX”標(biāo)志線(xiàn),約3s取出試紙條平放,5~10min內(nèi)讀取結(jié)果,10min后顯示的結(jié)果無(wú)效。
②測(cè)定日期:根據(jù)平均月經(jīng)周期的天數(shù)(A)和上次月經(jīng)日期(P),確定第一次測(cè)定日期D,即D=P+(A-17),連續(xù)測(cè)5d。
③結(jié)果判定:陽(yáng)性-在檢測(cè)區(qū)及對(duì)照區(qū)各出現(xiàn)一條紅色線(xiàn),且檢測(cè)區(qū)與對(duì)照區(qū)顏色相當(dāng)或更深,表示LH峰值出現(xiàn),其后14~28h內(nèi)排卵。陰性-僅在對(duì)照區(qū)出現(xiàn)一條紅色線(xiàn)或檢測(cè)區(qū)顏色淺于對(duì)照區(qū),表示非LH峰。
1.4 繁殖行為觀(guān)察
每天早上觀(guān)察綠狒會(huì)陰部以及性皮膚顏色,以確定性皮膚是否紅腫,是否出現(xiàn)異常行為及叫聲,月經(jīng)是否出現(xiàn)。以月經(jīng)出現(xiàn)的第一天為月經(jīng)周期第一天,觀(guān)察并做出記錄。
2.1 理論依據(jù)
靈長(zhǎng)類(lèi)動(dòng)物腺垂體分泌的促黃體生成素LH可直接參與卵巢功能的調(diào)節(jié)。生理周期是從月經(jīng)的第
一天算起,大約在生理周期的中點(diǎn),一個(gè)成熟的卵從卵巢移至輸卵管,這種經(jīng)歷稱(chēng)為排卵。排卵是一個(gè)有規(guī)律的、相當(dāng)復(fù)雜的生理生殖過(guò)程,是形態(tài)、生理與生物化學(xué)特性綜合變化的結(jié)果。在排卵前隨著卵泡的發(fā)育成熟卵巢會(huì)分泌大量的雌激素,這個(gè)雌激素在反饋給垂體一個(gè)信號(hào),使垂體分泌大量的促黃體生成素(LH),血中的LH也會(huì)隨之升高,由于LH會(huì)在尿中排出,因此監(jiān)測(cè)出的尿液中LH也會(huì)有增高的跡象,而LH在月經(jīng)周期的特征性分泌可以作為臨近排卵的時(shí)限參考點(diǎn),觀(guān)察LH峰值能準(zhǔn)確測(cè)定排卵時(shí)間。如果在接近排卵的時(shí)間,雌性的生殖道有精子存在,就可能會(huì)受孕。因此,本次測(cè)定LH主要是確定綠狒的發(fā)情規(guī)律及排卵時(shí)間,為適時(shí)合籠或獲取成熟卵母細(xì)胞提供理論依據(jù)。
2.2 觀(guān)察記錄
由觀(guān)察可知,2只綠狒在每月20日左右月經(jīng)來(lái)潮,月經(jīng)周期約為30~31d,此時(shí)雌狒的陰部有明顯的血跡,這樣持續(xù)2~3d,月經(jīng)結(jié)束后4~5d,陰部性皮開(kāi)始發(fā)紅,標(biāo)志著發(fā)情期的開(kāi)始,之后性皮逐漸腫脹,紅而發(fā)亮,十分醒目。3~4d后性皮高度腫脹進(jìn)入發(fā)情高潮期,此期持續(xù)10d左右。發(fā)情后,雌狒性皮迅速萎縮,在2~3d內(nèi)恢復(fù)到紅而干皺的正常狀態(tài)。
表1 綠狒發(fā)情狀態(tài)觀(guān)察記錄表
表2 綠狒狒發(fā)情交配周期表d
表1、表2記錄了綠狒狒一年以來(lái)的發(fā)情行為,由于每月情況相對(duì)變化不大,所以記錄7到10月三個(gè)月的觀(guān)察結(jié)果。
2.3 晨尿生殖激素峰值的變化規(guī)律
根據(jù)試紙使用說(shuō)明并結(jié)合實(shí)際情況,A=31,P= 20,D=20+(31-17)=34,即每月的3日至7日使用試紙測(cè)試。由于我們所用的排卵試紙監(jiān)測(cè)的是尿液中的LH含量,當(dāng)尿液中的LH達(dá)到一定濃度的時(shí)候會(huì)使特殊標(biāo)記的排卵試紙呈陽(yáng)性。LH高峰,典型地持續(xù)26~48h,一般在試紙出現(xiàn)陽(yáng)性后的在14~28h排卵。實(shí)驗(yàn)表明,綠狒的LH峰值出現(xiàn)在第17~19d,即排卵期為第17~19d。
3.1 理論表明排卵一般發(fā)生在血液LH開(kāi)始上升后21~44h,多數(shù)在LH開(kāi)始升高后32~36h[2,10],LH峰值后9~28h,而尿中LH峰出現(xiàn)時(shí)間比血液中LH峰晚4~6h,所以在尿中LH峰值出現(xiàn)12~14h后發(fā)生排卵。按此規(guī)律,兩雌狒排卵一般在月經(jīng)周期第17~19d,主要集中在第18d。
3.2 由于用試紙測(cè)定還是會(huì)存在一些偏差及不準(zhǔn)確性,采集的尿樣質(zhì)量不是很好,時(shí)間上也存在一定的誤差,所以也只能推測(cè)出綠狒排卵期大致的范圍,如果能使用試劑盒并結(jié)合孕酮(P)和雌二醇(E2)的含量會(huì)使結(jié)果更加準(zhǔn)確,也能更好的提高籠養(yǎng)綠狒的繁殖率。
3.3 由于測(cè)試時(shí)間正好在7、8月份,天氣非常炎熱,對(duì)綠狒身體狀態(tài)影響較大,并且綠狒原產(chǎn)于熱帶,南昌屬于亞熱帶,雖然經(jīng)過(guò)多年的飼養(yǎng),已漸漸適應(yīng)了本地的氣候,但是對(duì)其生理狀態(tài)還是會(huì)造成一定的影響。但是由于綠狒屬于舊大陸猴,與獼猴最
接近,現(xiàn)在已知的資料中對(duì)獼猴的研究很多,獼猴為單子宮,有月經(jīng)現(xiàn)象,月經(jīng)周期平均為28d(變化范圍為21~35d),月經(jīng)期多為2~3d(變化范圍1~5d)。本園綠狒的月經(jīng)周期測(cè)得為31d,月經(jīng)基本為2~3d,與獼猴的偏差不大。針對(duì)我園的綠狒的實(shí)際情況,為提高繁殖效率,可在月經(jīng)周期第17 d開(kāi)始合籠。
3.4 從試驗(yàn)中可以表明,用試紙做測(cè)試得到結(jié)果比較快,試驗(yàn)過(guò)程較簡(jiǎn)便,并且也能很好的測(cè)到排卵期的時(shí)間,雖然試驗(yàn)存在誤差,但利用試紙測(cè)定的方法推算排卵期還是具有一定的科學(xué)依據(jù)及實(shí)踐價(jià)值的。
1004-2342(2014)02-0048-02
S865.3+1
B
2013-12-25)