眼內(nèi)炎199例患者病原學(xué)檢測(cè)及藥敏分析

張鳳梅

感染性眼內(nèi)炎多發(fā)于外傷或術(shù)后,是由細(xì)菌感染眼內(nèi)組織引起的炎性反應(yīng)。其在臨床上發(fā)生率不高[1]，然而一旦發(fā)生將對(duì)眼組織產(chǎn)生損害，并對(duì)視功能產(chǎn)生嚴(yán)重危害，嚴(yán)重者將導(dǎo)致眼球摘除。因此，臨床眼科醫(yī)師及時(shí)掌握眼內(nèi)炎患者致病菌的菌屬分布[2]及藥敏情況，是及時(shí)、合理使用抗生素，挽救眼內(nèi)炎患者眼球及視功能的關(guān)鍵。本研究對(duì)感染性眼內(nèi)炎患者進(jìn)行細(xì)體培養(yǎng)及耐藥性分析，以提高對(duì)眼內(nèi)炎病原體的認(rèn)知水平，為臨床診斷和治療提供可靠依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2010年1月—2012年12月在邢臺(tái)眼科醫(yī)院住院治療的確診為感染性眼內(nèi)炎的患者199例，其中男133例，女66例；年齡1～80歲，平均(35.4±19.7)歲。感染性眼內(nèi)炎診斷依據(jù)：眼外傷后眼痛加重，跳痛，脹痛，視功能急劇下降甚至視力喪失；眼瞼水腫，結(jié)膜充血水腫，角膜水腫，前房見房水混濁大量纖維素樣滲出及前房積膿，玻璃體呈灰白色顆粒狀混濁或瞳孔區(qū)呈灰白色或黃白色反光，玻璃體積膿，眼底模糊不清甚至眼底紅光反射不能窺見；B 超檢查示：彌漫分布的弱回聲光點(diǎn)，靠近視網(wǎng)膜的后玻璃體混濁，嚴(yán)重者回聲光點(diǎn)可充滿玻璃體腔。將所有符合診斷依據(jù)的患者納入本次研究。

1.2 標(biāo)本采集 由本院眼科醫(yī)師在無菌條件下，通過手術(shù)方法采集前房水或玻璃體液，置于無菌試管內(nèi)，立即送至檢驗(yàn)科微生物室進(jìn)行涂片檢查及細(xì)菌培養(yǎng)。涂片先用95%乙醇固定，干燥后用吉姆薩染液進(jìn)行染色20 min，水洗，干燥，顯微鏡下直接鏡檢，如見到真菌菌絲，直接報(bào)告有真菌生長(zhǎng)。未檢出真菌者行細(xì)菌培養(yǎng)，24～48 h后觀察有無細(xì)菌生長(zhǎng)，如有細(xì)菌生長(zhǎng)， 進(jìn)一步進(jìn)行菌種鑒定及藥敏試驗(yàn)。送檢的199份細(xì)菌培養(yǎng)標(biāo)本中前房水標(biāo)本79份，玻璃體液標(biāo)本120份。

1.3 病原學(xué)檢測(cè)及藥敏試驗(yàn) 送檢標(biāo)本首先接種于法國(guó)生物梅里埃公司生產(chǎn)的雙相血培養(yǎng)瓶進(jìn)行增菌培養(yǎng)，增菌后轉(zhuǎn)于血平皿培養(yǎng)，培養(yǎng)陽性標(biāo)本根據(jù)菌落特征及革蘭染色結(jié)果進(jìn)行初步鑒定，然后按照儀器要求配制相應(yīng)濃度的菌懸液，接種于法國(guó)生物梅里埃公司相應(yīng)的ATB鑒定卡進(jìn)行菌種鑒定。藥敏試驗(yàn)：參照《全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》用K-B紙片法進(jìn)行藥敏試驗(yàn)。結(jié)果判定嚴(yán)格按照美國(guó)臨床實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化委員會(huì)(CLSI)標(biāo)準(zhǔn)。質(zhì)控菌株金黃色葡萄球菌ATCC25923，大腸埃希菌ATCC25922，銅綠假單胞菌ATCC27853。M-H瓊脂及藥敏片購自杭州天和微生物試劑廠；血培養(yǎng)皿購自山東百博生物技術(shù)有限公司，紙片藥物含量和藥敏試驗(yàn)判定標(biāo)準(zhǔn)見表1。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS 11.5軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行錄入，并進(jìn)行統(tǒng)計(jì)描述。

表1 不同抗菌藥敏試驗(yàn)的判定標(biāo)準(zhǔn)

注：-表示無

2 結(jié)果

2.1 一般資料 199份標(biāo)本中細(xì)菌培養(yǎng)陽性標(biāo)本88份(占44.2%)，陽性標(biāo)本中前房水標(biāo)本30份(占34.1%),玻璃體液標(biāo)本58份(占65.9%)。致病因素中,由眼外傷引起感染者占首位(74.9%，149/199),主要為穿孔傷(57.0%，85/149)。眼部術(shù)后感染占第二位(14.1%,28/199)，主要為青光眼術(shù)后感染(42.9%，12/28)。感染性眼內(nèi)炎致病因素見表2。

2.2 病原學(xué)檢測(cè) 88份細(xì)菌培養(yǎng)陽性標(biāo)本中，革蘭陽性球菌63株，占71.6%；革蘭陰性桿菌11株，占12.5%；革蘭陽性桿菌10株，占11.4%；革蘭陰性球菌1株，占1.1%；真菌3株，占3.4%。革蘭陽性球菌中葡萄球菌屬比例最高，占陽性標(biāo)本的61.9%，其中又以表皮葡萄球菌占首位，其次為鏈球菌屬(見表3)。

表2 感染性眼內(nèi)炎致病因素

表3 細(xì)菌培養(yǎng)陽性株菌屬分布情況

2.3 藥敏試驗(yàn) 對(duì)培養(yǎng)陽性的88株細(xì)菌進(jìn)行藥敏試驗(yàn)，革蘭陽性球菌對(duì)利福平的敏感率最高(87.1%，54/63),其次為左氧氟沙星(71.4%，45/63)和妥布霉素(58.7%，37/63)。耐藥性最高的為阿奇霉素和青霉素,分別為9.5%(6/63)和20.6%(13/63)。革蘭陰性桿菌對(duì)左氧氟沙星、氧氟沙星、環(huán)丙沙星、洛美沙星、依諾沙星的敏感率均為90.9%(10/11)，其次為慶大霉素、頭孢哌酮，敏感率均為81.8%(9/11)，妥布霉素的敏感率為72.7%(8/11)。耐藥性最強(qiáng)的為青霉素，耐藥率為81.8%(9/11，見表4)。

表4 細(xì)菌培養(yǎng)陽性標(biāo)本藥敏試驗(yàn)結(jié)果

注：-為未做此藥敏試驗(yàn)

3 討論

感染性眼內(nèi)炎是一種由微生物感染眼內(nèi)組織引起的嚴(yán)重致盲性眼病，其治療困難，預(yù)后較差，常導(dǎo)致視力損害，甚至視力喪失[3]。病因可分為外源性和內(nèi)源性[4]，以外源性多見[5]。本研究結(jié)果顯示，由眼外傷引起感染性眼內(nèi)炎者占首位(74.9%)，略高于孫士營(yíng)等[3]報(bào)道的71.1%，其中穿通傷85例(42.7%)，這可能與外傷后破壞了眼球壁的完整性，病原體易于經(jīng)傷口進(jìn)入內(nèi)眼而引起炎性反應(yīng)有關(guān)；術(shù)后感染是感染性眼內(nèi)炎的另一大致病因素(14.1%)；由感染性角膜炎引起的占5.0%，低于陳蕊等[6]報(bào)道的21.6%。

本研究發(fā)現(xiàn)，199份標(biāo)本中細(xì)菌培養(yǎng)陽性標(biāo)本88份(占44.2%)，略高于陳蕊等[6]報(bào)道的41.4%，但低于國(guó)外相關(guān)報(bào)道[7]。其原因可能與以下幾方面有關(guān)：(1)標(biāo)本取材量較少，不足以進(jìn)行培養(yǎng)；(2)采集標(biāo)本后未及時(shí)送檢，影響了細(xì)菌的活性；(3)發(fā)病后未及時(shí)來本院就診，就診前經(jīng)過不同時(shí)間的不規(guī)則藥物治療，抑制了細(xì)菌的生長(zhǎng)。

有文獻(xiàn)報(bào)道，革蘭陽性細(xì)菌是化膿性眼內(nèi)炎的主要致病菌[8]，本研究結(jié)果與之一致。本研究發(fā)現(xiàn)，革蘭陽性球菌63株(占71.6%)，革蘭陰性桿菌11株(12.5%)，革蘭陽性桿菌10株(11.4%)，革蘭陽性球菌中，又以表皮葡萄球菌占首位。表皮葡萄球菌為結(jié)膜囊或皮膚的正常菌群或弱毒性條件致病菌，目前已成為細(xì)菌性眼內(nèi)炎的首要致病菌。因此，眼科醫(yī)師應(yīng)重視內(nèi)眼手術(shù)前眼瞼皮膚與結(jié)膜囊的無菌處理措施及眼外傷后的預(yù)防性抗菌藥物治療[1]。

有報(bào)道顯示，革蘭陽性球菌對(duì)萬古霉素的敏感性較以前有所下降[1，6]。從本院3年細(xì)菌藥敏試驗(yàn)結(jié)果統(tǒng)計(jì)中，未發(fā)現(xiàn)革蘭陽性球菌對(duì)萬古霉素耐藥的情況，這與Benz等[7]報(bào)道的革蘭陽性菌對(duì)萬古霉素的敏感率最高，為100%相一致。本研究中，革蘭陽性菌對(duì)利福平的敏感率為87.1%，其次為左氧氟沙星71.4%，妥布霉素58.7%。革蘭陰性桿菌對(duì)左氧氟沙星、氧氟沙星、洛美沙星、環(huán)丙沙星、依諾沙星的敏感率均為90.9%。由此可見，革蘭陽性菌對(duì)萬古霉素最為敏感，革蘭陰性菌對(duì)氟喹諾酮類藥物最為敏感。據(jù)統(tǒng)計(jì)結(jié)果顯示，沒有一種抗生素對(duì)所有細(xì)菌敏感，因此在未明確病原體及藥物敏感性之前應(yīng)考慮聯(lián)合用藥[9]。

真菌性眼內(nèi)炎是一種少見的感染性眼內(nèi)眼，其潛伏期長(zhǎng)，進(jìn)展緩慢，多在傷后2周左右開始發(fā)病，易誤診及延誤治療[10]。本研究中，真菌性眼內(nèi)炎雖然比例不高，只占3.4%，但其預(yù)后較差，應(yīng)引起高度重視?？傊腥拘匝蹆?nèi)眼的病因是多方面的，明確病因進(jìn)行治療至關(guān)重要。病原學(xué)檢測(cè)是感染性眼內(nèi)炎臨床診斷與治療的必要手段，對(duì)眼科臨床醫(yī)師用藥具有重要的指導(dǎo)意義。

1 任喆,王智群,李然,等.臨床細(xì)菌性眼內(nèi)炎的病原學(xué)分析[J].中華眼科雜志,2007,43(12):1106-1109.

2 孫旭光,王智群,羅時(shí)運(yùn),等.對(duì)疑為眼內(nèi)炎患者房水玻璃體細(xì)菌培養(yǎng)結(jié)果的臨床分析[J].中華眼底病雜志,2002,18(2):104-105.

3 孫士營(yíng),孫曉艷,陳豪，等.感染性眼內(nèi)炎患者病原學(xué)檢測(cè)結(jié)果分析[J].中華醫(yī)學(xué)雜志,2012,92(1):32-35.

4 中華醫(yī)學(xué)會(huì).臨床診療指南：眼科學(xué)分冊(cè)[M].北京：北京人民衛(wèi)生出版社，2006：148.

5 王端禮.醫(yī)學(xué)真菌學(xué)-實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)指南[M].北京：北京人民衛(wèi)生出版社，2005：364-365.

6 陳蕊,謝立信,孫士營(yíng),等.感染性眼內(nèi)炎282例臨床分析[J].中華眼底病雜志,2008,24(6):402-405.

7 Benz MS,Scott IU,Flynn HW Jr,et al.Endophthalmitis isolates and antibiotic sensitivities:A 6-year review of culture-proven cases[J].Am J Ophthalmol,2004,137(1):38-42.

8 趙長(zhǎng)霖,魏琳,經(jīng)媛,等.化膿性眼內(nèi)炎病原菌菌譜的變遷[J].中華醫(yī)院感染學(xué)雜志,2010,20(1):122-124.

9 李靜,羅益文,盧彥.真菌性眼內(nèi)炎44例的致病菌分析[J].國(guó)際眼科雜志,2008,8(11):2324-2325.

10 葉應(yīng)嫵，王毓三，申子瑜.全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程[M].南京：東南大學(xué)出版社，2006：896