潰瘍性結(jié)腸炎的微生態(tài)學(xué)改變及雙歧桿菌的治療作用研究

邱春雷，嚴(yán) 紅，吳雄健，劉洪榮

潰瘍性結(jié)腸炎(ulcerative colitis，UC)是一種以結(jié)腸黏膜彌漫性炎性損害為主要病理特征的消化系統(tǒng)疾病，是一種多因素、病因不清的慢性非特異性炎癥性腸道疾病[1]?；颊叱３霈F(xiàn)腹痛、腹瀉、血便等臨床癥狀，個別患者有時出現(xiàn)貧血或急劇疼痛，發(fā)病年齡為20～50歲。國內(nèi)外流行病學(xué)調(diào)查結(jié)果顯示，UC發(fā)病率和死亡率均呈明顯上升趨勢，嚴(yán)重威脅人們的生命健康，已被WHO列為現(xiàn)代難治病之一。至今為止，UC的病因和發(fā)病機(jī)制尚未明確，盡管對其治療做了很多研究，但仍未取得滿意療效和突破性進(jìn)展[2]。大量研究證實，菌群與UC關(guān)系密切，腸道菌群失調(diào)被認(rèn)為是UC發(fā)生的重要原因之一[3]；實驗研究和臨床研究均證明腸道益生菌可改善UC患者菌群失調(diào)和自身免疫功能，從而緩解或消除腸道炎癥[4-5]。本研究通過檢測活動期UC(active ulcerative colitis，AUC)和緩解期UC(remissive ulcerative colitis，RUC)患者糞便菌群，觀察其微生態(tài)學(xué)改變及雙歧桿菌對UC的治療作用，探討UC發(fā)病機(jī)制。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇2011年5月—2013年3月在井岡山大學(xué)附屬醫(yī)院門診就診或住院的AUC患者64例(AUC組)和RUC患者71例(RUC組)，病程3個月～20年；另選取同期在本院體檢健康者30例(對照組)，半年內(nèi)均未服用過抗生素。AUC組中男33例、女31例，年齡21～57歲；RUC組中男38例、女33例，年齡20～59歲；對照組中男15例、女15例，年齡21～55歲。UC的診斷符合2007年中華醫(yī)學(xué)會消化病學(xué)分會炎癥性腸病協(xié)作組頒布的“對我國炎癥性腸病診斷治療規(guī)范的共識意見”中的診斷標(biāo)準(zhǔn)。患者或其監(jiān)護(hù)人、對照者均簽署知情同意書。

1.2 方法

1.2.1 引物設(shè)計與合成 根據(jù)雙歧桿菌、乳酸桿菌、大腸埃希菌、擬桿菌、普雷沃氏菌、球形梭菌、柔嫩梭菌、腸球菌、柱狀真桿菌和普拉梭菌16SrDNA基因序列[6]，利用引物設(shè)計軟件Primer Premier 5.0設(shè)計PCR引物。引物序列均由上海生工生物工程技術(shù)服務(wù)有限公司合成，各引物序列見表1。

表1 腸道菌群16SrDNA基因特異性引物序列

Table1 Species-specific primers sequence of 16SrDNA gene of bacterial group

腸道菌群上游引物(5′-3′)下游引物(5′-3′)退火溫度(℃)長度(bp)雙歧桿菌CTCCTGGAAACGGGTGGTGCTGCCTCCCGTAGGAGT55168乳酸桿菌AGCAGTAGGGAATCTTCCACACCGCTACACATGGAG50267大腸埃希菌CATGCCGCGTGTATGAAGAACGGGTAACGTCAATGAGCAAA5276擬桿菌GGTTCTGAGAGGAGGTCCCGCTGCCTCCCGTAGGAGT5558普雷沃氏菌CAGCAGCCGCGGTAATAGGCATCCATCGTTTACCGT50245球形梭菌ACTCCTACGGGAGGCAGCGCTTCTTAGTCAGGTACCGTCAT55206柔嫩梭菌GTTGACAAAACGGAGGAAGGGACGGGCGGTGTGTACAA53213腸球菌CCCTTATTGTTAGTTGCCATCATACTCGTTGTACTTCCCATTGT51132柱狀真桿菌ACTCCTACGGGAGGCAGCCATTGCTCGTTCAGGGTTC5384普拉梭菌CAGCAGCCGCGGTAAACTACCTCTGCACTACTCAAGAAA52116通用引物ACTCCTACGGGAGGCAGCAGTATTACCGCGGCTGCTGGC56174

1.2.2 腸道菌群培養(yǎng) 稱取所有受試者新鮮糞便，按1∶10比例加入磷酸鹽緩沖液(PBS)進(jìn)行稀釋，震蕩后充分混勻，需氧菌稀釋度為107～108，厭氧菌稀釋度為108～109。采用不同的選擇性培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)，每個平板均勻涂布50 μl稀釋液，每種菌群涂布3個平板。雙歧桿菌采用BBL瓊脂，乳酸桿菌采用Lbs瓊脂，大腸埃希菌和普雷沃氏菌采用伊紅美藍(lán)瓊脂，擬桿菌采用膽汁-七葉甙(BBE)瓊脂，球形梭菌、柔嫩梭菌和普拉梭菌采用哥倫比亞瓊脂，腸球菌采用疊氮鈉-結(jié)晶紫七葉苷瓊脂，柱狀真桿菌采用ES瓊脂。需氧菌培養(yǎng)18～24 h，厭氧菌培養(yǎng)48～72 h，計算同一稀釋度下平均菌落數(shù)，以lg n/g表示。

1.2.3 糞便細(xì)菌DNA提取 參照《分子克隆操作指南》和文獻(xiàn)[7]介紹的方法加以改良：收集所有受試者糞便標(biāo)本，取1 g糞便加0.01 M的PBS 9 ml，充分顛倒混勻后以1 000 r/min低速離心5 min，離心半徑為10 cm，取上清液，上述過程重復(fù)3次，收集上清液以14 000 r/min高速離心10 min后取沉淀，離心半徑為10 cm，反復(fù)用PBS洗滌3次，水洗1次，沉淀即為糞便總細(xì)菌。按細(xì)菌基因組DNA快速提取試劑盒的操作說明提取總細(xì)菌DNA并檢測其濃度，-20 ℃冰箱保存?zhèn)溆?。?biāo)準(zhǔn)菌株37 ℃搖床200 r/min培養(yǎng)過夜，離心半徑為10 cm，次日收集菌體并按細(xì)菌基因組DNA快速提取試劑盒的操作說明提取細(xì)菌DNA。

1.2.4 常規(guī)PCR與熒光定量PCR 采用長雙歧桿菌CICC6068、嗜酸乳桿菌CICC6088、大腸埃希菌ACCC11864、糞腸球菌ACCC10699、擬桿菌CICC10402、普雷沃氏菌ATCC25845、柔嫩梭菌ATCC29065、普拉梭菌ATCC27766、柱狀真桿菌ATCC27803、球形梭菌ATCC29236標(biāo)準(zhǔn)菌株進(jìn)行常規(guī)PCR擴(kuò)增。50 μl反應(yīng)體系為：10×PCR buffer 5 μl，dNTP 2 μl，Taq DNA聚合酶1 μl，模板5 μl，上、下游引物各1 μl，石蠟20 μl，補(bǔ)充滅菌超純水至50 μl。擴(kuò)增參數(shù)：94 ℃預(yù)變性4 min，94 ℃變性30 s、退火(溫度見表1)30 s、72 ℃延伸30 s(共30個循環(huán))，最后72 ℃延伸10 min。PCR擴(kuò)增產(chǎn)物于1%瓊脂糖凝膠中進(jìn)行電泳。

將上述標(biāo)準(zhǔn)菌株擴(kuò)增產(chǎn)物回收、純化，作為制作熒光定量PCR標(biāo)準(zhǔn)曲線的標(biāo)準(zhǔn)品。標(biāo)準(zhǔn)品和待測樣品DNA進(jìn)行16SrDNA熒光定量PCR反應(yīng)。25 μl反應(yīng)體系為：2×SYBR?Premix Ex Taq(Tli RNaseH Plus) 12.5 μl，上、下游引物各0.5 μl，50×ROX Reference DyeⅡ 1 μl，DNA模板2 μl，補(bǔ)充滅菌超純水至25 μl。反應(yīng)條件為：95 ℃預(yù)變性30 s，95 ℃變性5 s、退火(溫度見表1)34 s、72 ℃延伸30 s(共40個循環(huán))72 ℃延伸10 min，95 ℃變性15 s、退火(溫度見表1)1 min、72 ℃延伸30 s，循環(huán)1次得到溶解曲線。

1.2.5 治療方法及療效判斷標(biāo)準(zhǔn) 將AUC組患者按隨機(jī)數(shù)字表法分為AUC1組32例和AUC2組32例，RUC組患者按隨機(jī)數(shù)字表法分為RUC1組36例和RUC2組35例，AUC1組和RUC1組患者口服諾氟沙星膠囊(氟哌酸膠囊)，3粒/次，2次/d；AUC2組和RUC2組口服雙歧桿菌活菌膠囊(麗珠腸樂膠囊)，2粒/次，3次/d。4個亞組治療療程均為1個月，同時口服柳氮磺胺吡啶片，1.0 g/次，4次/d。療效判斷標(biāo)準(zhǔn)：(1)臨床療效：①顯效：排便恢復(fù)正常，無腹痛現(xiàn)象；②有效：糞便顏色正常，腹痛減輕、偶爾腹瀉；③無效：癥狀無變化。(2)組織學(xué)療效：①顯效：腸鏡下可見黏膜輕度充血、潰瘍較前縮小或基本消失，病理切片可見黏膜細(xì)胞和腺體基本正常，炎性細(xì)胞明顯減少；②有效：腸鏡下可見黏膜部分充血、水腫減輕，部分腸黏膜組織接近正常，病變范圍較前縮小，病理切片可見黏膜細(xì)胞部分修復(fù)，有少量炎性細(xì)胞；③無效：腸鏡及病理切片觀察與治療前相比無變化。

1.2.6 分泌型免疫球蛋白A(sIgA)含量檢測 稱取所有受試者新鮮糞便，按1∶2加入0.01 M的PBS，震蕩后充分混勻，12 000 r/min低溫離心30 min，離心半徑為10 cm，取上清液，按照sIgA放射免疫分析試劑盒說明書，采用放射免疫分析法測定sIgA含量，操作步驟如下：取100 μl上清液，依次加入100 μl125I-sIgA和100 μl sIgA抗體，充分混勻，37 ℃水浴60 min，加入二抗混勻，37 ℃水浴30 min，4 ℃放置10 min，3 000 r/min離心15 min，離心半徑為10 cm，棄上清液，取沉淀在液體閃爍計數(shù)儀上計數(shù)，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣本中sIgA含量。

1.2.7 線粒體膜蛋白(Apo-2.7)含量檢測 用活檢鉗取UC患者結(jié)腸潰瘍邊緣新鮮組織及對照者正常結(jié)腸組織0.5～1.0 g，剪成1.0 mm×1.0 mm×1.0 mm小碎塊，于200目網(wǎng)篩研磨，然后用PBS沖洗，濾液以1 500 r/min離心5 min，離心半徑為10 cm，PBS沖洗2次，1 000 r/min離心5 min，離心半徑為10 cm，棄上清液；調(diào)整細(xì)胞數(shù)至109/ml，加入20 μl Apo-2.7-PE，室溫避光反應(yīng)30 min。采用流式細(xì)胞儀收集10 000個細(xì)胞，測定光散射數(shù)并計算樣本中Apo-2.7含量。

2 結(jié)果

2.1 腸道菌群菌落數(shù) 腸道菌群16SrDNA基因特異性引物分析：每對引物均只能擴(kuò)增出一條片段，未出現(xiàn)非特異性條帶，片段長度與預(yù)期一致(見圖1)，可以用于后續(xù)熒光定量PCR反應(yīng)。3組受試者普雷沃氏菌、柱狀真桿菌菌落數(shù)比較，差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)；雙歧桿菌、乳酸桿菌、大腸埃希菌、擬桿菌、球形梭菌、柔嫩梭菌、腸球菌、普拉梭菌及總細(xì)菌菌落數(shù)比較，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。與對照組相比，AUC組和RUC組雙歧桿菌、乳酸桿菌、擬桿菌、球形梭菌、柔嫩梭菌、普拉梭菌及總細(xì)菌菌落數(shù)減少(P<0.05)，大腸埃希菌、腸球菌菌落數(shù)增加(P<0.05)；與RUC組相比，AUC組雙歧桿菌、乳酸桿菌菌落數(shù)減少(P<0.05)，大腸埃希菌菌落數(shù)增加(P<0.05,見表2)。

2.2 臨床療效和組織學(xué)療效 4個亞組患者在治療過程中均未出現(xiàn)明顯不良反應(yīng)。AUC2組臨床療效和組織學(xué)療效均優(yōu)于AUC1組(u值分別為96.000和128.000，P<0.05)；RUC2組臨床療效和組織學(xué)療效均優(yōu)于RUC1組(u值分別為72.000和144.000，P<0.05，見表3)。

注：1為腸球菌，2為雙歧桿菌，3為大腸埃希菌，4為柔嫩梭菌，5為通用引物，6為柱狀真桿菌，7為普拉梭菌，8為球形梭菌，9為擬桿菌，10為乳酸桿菌，11為普雷沃氏菌

圖1 腸道菌群16SrDNA基因特異性引物PCR擴(kuò)增結(jié)果

Figure1 PCR result of species-specific primers of 16SrDNA gene of bacterial group

2.3 4個亞組治療后腸道菌群菌落數(shù)比較 治療后，AUC2組雙歧桿菌、乳酸桿菌菌落數(shù)較AUC1組增加，大腸埃希菌菌落數(shù)較AUC1組減少(P<0.05)；RUC2組雙歧桿菌、乳酸桿菌菌落數(shù)較RUC1組增加，大腸埃希菌菌落數(shù)較RUC1組減少(P<0.05)；AUC2組與AUC1組、RUC2組與RUC1組其他腸道菌群及總細(xì)菌菌落數(shù)比較，差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05，見表4～5)。

表3 4個亞組患者臨床療效和組織學(xué)療效比較(例)

Table3 Comparison of clinical efficacy and histological efficacy in the four subgroups

組別例數(shù)臨床療效顯效 有效 無效組織學(xué)療效顯效 有效 無效AUC1組326141251314AUC2組321316310184RUC1組361861214715RUC2組352211211204

2.4 sIgA含量與Apo-2.7含量 對照組與AUC1組、RUC1組sIgA、Apo-2.7含量比較，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)；AUC2組sIgA含量高于AUC1組，Apo-2.7含量低于AUC1組，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)；RUC2組sIgA含量高于RUC1組，Apo-2.7含量低于RUC1組，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)；AUC2組和RUC2組sIgA、Apo-2.7含量與對照組比較，差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05，見表6)。

表2 3組受試者腸道菌群菌落數(shù)比較

注：與對照組比較，*P<0.05；與RUC組比較，△P<0.05

表4 AUC1組和AUC2組治療后腸道菌群菌落數(shù)比較

表5 RUC1組和RUC2組治療后腸道菌群菌落數(shù)比較

Table6 Comparison of sIgA and Apo-2.7 levels in control group and the four subgroups

組別例數(shù)sIgA(μg/g)Apo-27(%)對照組30138088±11101243±033AUC1組32103107±8842?1147±222?AUC2組32135175±8852△258±064△RUC1組36116860±10145?708±113?RUC2組35139873±11080▲305±035▲F值10558252840P值00000153

注：與對照組比較，*P<0.05；與AUC1組比較，△P<0.05；與RUC1組比較，▲P<0.05；sIgA=分泌型免疫球蛋白A，Apo-2.7=線粒體膜蛋白

3 討論

UC是一種病因和發(fā)病機(jī)制不明的復(fù)雜慢性炎癥性腸病，主要病變表現(xiàn)為結(jié)腸黏膜炎癥或潰瘍，一般自遠(yuǎn)端結(jié)腸逆行至近端結(jié)腸，嚴(yán)重時可遍及整個結(jié)腸或累及直腸[8]。UC在發(fā)達(dá)國家相當(dāng)常見，而在我國該病極少見，但近20年來UC在我國呈不斷上升趨勢，盡管對UC病因進(jìn)行了大量研究，但至今仍未取得突破性進(jìn)展。一般認(rèn)為，UC與感染、機(jī)體免疫、黏膜免疫、腸道微生物、細(xì)胞因子、氧自由基、神經(jīng)內(nèi)分泌和遺傳等有關(guān)，機(jī)體菌群失調(diào)是UC的重要病因之一。微生態(tài)學(xué)研究顯示，在正常生理狀態(tài)下，定居于腸道的細(xì)菌種類達(dá)500多種，約為1 012 CFU/g，且主要集中于結(jié)腸和末端小腸；雙歧桿菌屬、類桿菌屬、乳酸菌屬等專性厭氧菌是腸道菌群的生理性優(yōu)勢菌，約占腸道總菌量的99%，其余1%主要是腸桿菌、腸球菌屬等兼性厭氧性條件致病菌和變形桿菌、假單胞菌等過路病原菌[9]。正常情況下，絕大多數(shù)腸道菌群對人體是有益的，能相互依存、相互制約，使得腸道微生態(tài)保持平衡狀態(tài)。但這些潛在的致病菌一旦被外界因素激發(fā)，平衡被打破，引起腸道微生態(tài)失調(diào)即可造成炎癥，外界因素包括抗生素、細(xì)胞毒性藥物、激素、免疫抑制劑等化學(xué)因素以及射線、手術(shù)、創(chuàng)傷等物理因素。眾多臨床研究表明，UC患者發(fā)病和復(fù)發(fā)與腸道菌群改變密切相關(guān)，腸道細(xì)菌及其產(chǎn)物等可作為抗原誘導(dǎo)某些具有遺傳易患性的個體腸道黏膜免疫功能失衡，使腸道免疫系統(tǒng)對腸道抗原耐受性減退甚至消失，進(jìn)而引發(fā)腸道炎癥[10]。本研究結(jié)果顯示，與健康對照者相比，無論是AUC患者還是RUC患者，其腸道雙歧桿菌、乳酸桿菌、擬桿菌、球形梭菌、柔嫩梭菌、普拉梭菌及總細(xì)菌菌落數(shù)均有不同程度減少，大腸埃希菌和腸球菌菌落數(shù)增加；與RUC患者相比，AUC患者雙歧桿菌和乳酸桿菌菌落數(shù)減少，而大腸埃希菌菌落數(shù)增加。

近年研究表明，使用益生菌調(diào)理腸道微生態(tài)能夠預(yù)防和控制UC[11-12]。目前臨床上常用的益生菌制劑主要有：雙歧桿菌活菌制劑(麗珠腸樂、回春生)，雙歧桿菌三聯(lián)活菌制劑(培菲康、金雙歧、貝飛達(dá))，枯草桿菌和糞球菌二聯(lián)活菌制劑(美常安)，蠟樣芽孢桿菌活菌制劑(促菌生)，地衣芽孢桿菌活菌制劑(整腸生)等。雙歧桿菌是革蘭陽性無芽孢厭氧桿菌，具有抗感染、抗腫瘤、抗衰老、免疫賦活、促消化等作用，對維持人體健康至關(guān)重要，臨床研究也觀察到雙歧桿菌制劑防治腸道感染具有理想效果。本研究在柳氮磺胺吡啶治療的基礎(chǔ)上采用雙歧桿菌活菌制劑麗珠腸樂對UC患者進(jìn)行治療，并與氟哌酸進(jìn)行對照，結(jié)果顯示，治療后AUC2組、RUC2組雙歧桿菌、乳酸桿菌菌落數(shù)分別較AUC1組、RUC1組增加，大腸埃希菌菌落數(shù)分別較AUC1組、RUC1組減少；AUC2組、RUC2組臨床療效和組織學(xué)療效分別優(yōu)于AUC1組、RUC1組，且4個亞組患者在治療過程中均未出現(xiàn)明顯不良反應(yīng)。雖然目前雙歧桿菌治療UC的作用機(jī)制尚未完全闡明，但一般認(rèn)為雙歧桿菌可調(diào)節(jié)腸道菌群平衡，發(fā)揮多種生物拮抗功能，如通過營養(yǎng)爭奪、產(chǎn)生酸性代謝產(chǎn)物、降低腸道局部pH值等而產(chǎn)生對腸道功能有重要作用的營養(yǎng)物質(zhì)和廣譜抗菌物質(zhì)，如親脂分子、細(xì)菌素、過氧化氫等，抑制或殺滅腸道大腸埃希菌、沙門氏菌、鏈球菌等致病菌。此外，雙歧桿菌還可通過磷壁酸黏附作用而緊密結(jié)合在腸上皮細(xì)胞表面，形成一層菌膜屏障，阻止腸道內(nèi)源性及外源性潛在致病菌易位、入侵和定植；促進(jìn)抗炎細(xì)胞因子和抑制促炎細(xì)胞因子的分泌；增強(qiáng)先天性免疫細(xì)胞的吞噬功能。目前，關(guān)于益生菌灌腸療法治療UC的臨床研究報道極少，還有待于進(jìn)一步研究以闡明益生菌防治UC的機(jī)制。

正常機(jī)體血清中IgA含量僅次于IgG，按其免疫功能可分為血清型和分泌型，sIgA由黏膜相關(guān)淋巴結(jié)產(chǎn)生[13]，是機(jī)體黏膜免疫系統(tǒng)的最重要因子，主要分布于鼻、咽、氣管、胃腸道和泌尿生殖道分泌液中，能抵抗微生物在黏膜上皮附著，減緩病毒繁殖，是防止病原體入侵機(jī)體的第一道防線[14]。外來抗原進(jìn)入呼吸道或胃腸道，局部免疫系統(tǒng)受到刺激后，其無需中樞免疫系統(tǒng)參與就可以自行進(jìn)行免疫應(yīng)答，產(chǎn)生sIgA，sIgA含量變化直接反映機(jī)體黏膜局部免疫狀態(tài)。腸黏膜功能活躍，但十分容易受損，缺血、缺氧、氧化應(yīng)激、酸中毒、腸道菌群失調(diào)以及炎性細(xì)胞因子刺激等均可損害腸黏膜免疫功能，腸道生化內(nèi)環(huán)境改變可導(dǎo)致sIgA分泌減少，而sIgA作為腸黏膜免疫的重要組成部分和效應(yīng)分子，其合成和分泌減少勢必會削弱腸道免疫功能。王旭霞等[15]研究表明，sIgA含量變化與UC的發(fā)生密切相關(guān)；本研究結(jié)果亦顯示，UC患者sIgA含量與健康對照者存在明顯差異，提示UC患者腸道黏膜免疫功能存在不同程度地降低，雙歧桿菌治療有助于改善腸道黏膜免疫功能。國內(nèi)外研究表明，腸道損傷、雙歧桿菌顯著減少可能導(dǎo)致sIgA合成和分泌減少，而補(bǔ)充雙歧桿菌可降低血漿內(nèi)毒素和IL-6水平，維持機(jī)體促炎、抗炎反應(yīng)平衡，進(jìn)而促進(jìn)IL-4介導(dǎo)的sIgA的合成與分泌[16]。

細(xì)胞凋亡是一種受基因調(diào)控的自主性細(xì)胞程序性死亡過程，細(xì)胞發(fā)生凋亡時，常伴有凋亡調(diào)控基因表達(dá)的級聯(lián)反應(yīng)變化。Fas、FasL、Bcl-2、Bax、Apo、caspase等均參與了細(xì)胞凋亡過程。越來越多的研究表明，UC患者存在腸黏膜上皮細(xì)胞過度凋亡、黏膜固有層淋巴細(xì)胞抵抗凋亡以及中性粒細(xì)胞(PMN)凋亡遲滯，是造成UC患者腸道炎癥發(fā)生和持續(xù)的重要原因[17]。Apo-2.7是一個大小為38 kDa的膜蛋白，是細(xì)胞凋亡的特異標(biāo)志物。為了維持結(jié)腸黏膜屏障的動態(tài)平衡，正常機(jī)體結(jié)腸上皮黏膜細(xì)胞可表達(dá)低水平Apo-2.7用于調(diào)控衰老細(xì)胞凋亡，臨床常用Apo-2.7判斷黏膜病變損傷程度及病情活動度[18]。本研究結(jié)果顯示，UC患者Apo-2.7含量與健康對照者存在明顯差異，提示結(jié)腸黏膜上皮細(xì)胞凋亡增加可引起腸黏膜損傷，繼而發(fā)生潰瘍，雙歧桿菌治療有助于抑制結(jié)腸黏膜上皮細(xì)胞的凋亡。

總之，UC患者腸道共生菌數(shù)量減少，條件致病菌增加，雙歧桿菌活菌制劑治療UC療效顯著，UC發(fā)病可能與機(jī)體菌群失調(diào)、腸道免疫功能破壞及結(jié)腸黏膜上皮細(xì)胞過度凋亡有關(guān)。但本研究樣本量較小，限于當(dāng)前的研究水平，本研究所得結(jié)論仍存在較大局限性，雙歧桿菌治療UC的臨床療效和UC的發(fā)病機(jī)制還有待進(jìn)行更多的臨床研究觀察和分析。

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