苗藥六月雪化學(xué)成分及藥理作用研究進展

魯利民 陸錦銳 韓忠耀

(1中國中醫(yī)科學(xué)院西苑醫(yī)院藥劑科，北京 100091；2貴州省黔南民族醫(yī)學(xué)高等專科學(xué)校藥學(xué)系，都勻 558000)

六月雪，首載于 《本草拾遺》，又名白馬骨，滿天星 （《陽春縣志》），苗族藥記載名為苗語名Reib ghueub mes-“銳 過 買 ” 或 “唣 本 ” (湘 西)，Det vilaheib-“豆野給” 或 “加厄陔” (貴州黔東南)。 六月雪來源于茜草科植物小灌木白馬骨Serissa foetida Comm.的全草或根，主要含有揮發(fā)油類，甾體類、萜類以及糖類等化學(xué)成分；其性涼、味苦、微辛，歸肺、脾、肝、胃經(jīng)[1]。具有疏風(fēng)利濕、清熱解毒的功效，臨床上主要用于時行感冒，咳嗽咽痛，牙齦腫痛，目赤腫痛，濕熱黃疸，暑濕瀉痢，淋濁帶下，風(fēng)濕關(guān)節(jié)痛，歷節(jié)風(fēng)痛，跌打損傷以及癰疽腫毒，瘰疬惡瘡等癥。亦還可用于治療毒蛇咬傷。六月雪主要分布在我國西南、兩廣一帶。而貴州一帶的苗族民間醫(yī)生習(xí)用六月雪治療風(fēng)濕痹痛以及一些疑難雜癥。因其藥理作用廣泛，治療效果顯著，采集方便，而被黔南一帶的苗族民間地區(qū)廣泛應(yīng)用。

1 化學(xué)成分

1.1 揮發(fā)油類成分 倪士峰等[2]針對六月雪在不同季節(jié)所含的化學(xué)成分進行了比較深入的研究：采用水蒸氣蒸餾提取法，乙醚萃取揮發(fā)油，用GC/MS法對樣品進行分析發(fā)現(xiàn)，深秋季節(jié)與夏季六月雪中分別鑒定出43、72個揮發(fā)油組分。其中含量在3%以上的組分有甲基亞麻酸酯，石竹烯，2-甲氧-4-乙烯基苯酚，3-己烯-1-醇，乙苯，庫貝醇，1b，5，5，6a-tetramethyl-octahydro-1-oxa-cyclopropa[a]inden-6-one， δ-9(10)-四氫廣木香內(nèi)酯-1-酮，大根香葉酮D以及5-丙酰基-2-氯-苯乙酸甲酯等10種揮發(fā)油成分。六月雪不同季節(jié)揮發(fā)油類化學(xué)成分的差異，揭示了該植物在生理活躍期時能夠產(chǎn)生較多的二次代謝產(chǎn)物，反映了該植物在藥用價值上的微妙差異，建議把采收季節(jié)作為該植物的質(zhì)控點。

1.2 萜類化合物與甾體類成分 王少芳等[3]將六月雪全草粉碎得到的粗粉，用工業(yè)酒精回流提取后濃縮，然后用有機溶劑進行梯度萃取，采用柱層析技術(shù)、薄層層析技術(shù)等，最終從六月雪中得到了三個單體化合物，分別是齊墩果酸、齊墩果酸的乙酰化物和β-谷甾醇。韋萬興等[4]從六月雪中分離得到豆甾醇。馮順卿等[5]對瑤藥白馬骨開展化學(xué)研究，得到了烏索酸，即熊果酸，為五環(huán)三萜類化合物。危莉等[6]將六月雪的全草粗粉用甲醇提取，提取物作為供試品溶液，以車葉草苷為對照品，用薄層層析技術(shù)，以氯仿：乙酸乙酯：異丙醇 （1∶2∶2）展開，發(fā)現(xiàn)與對照品相應(yīng)位置上顯示有相同的斑點，證明生藥六月雪中含車葉草苷。張強等[8]從白馬骨葉中得到胡蘿卜苷，即谷甾醇-3-0-葡萄糖苷。

隨著六月雪物質(zhì)基礎(chǔ)研究的深入，針對六月雪中的具代表性、指標(biāo)性化學(xué)成分的含量研究逐漸得到開展。程齊來等[7]采用RP-HPLC方法，對生藥六月雪中齊墩果酸的含量進行了檢測，為該藥質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的制訂與藥物的開發(fā)應(yīng)用奠定了基礎(chǔ)。

1.3 木脂素成分 韋萬興等[4]從六月雪中分離得到5-乙?；?6-羥基-2-異丙烯苯并呋喃與5-乙酰基-6-羥基-2-丙酮苯并呋喃，二者為首次從該植物中分離得到，屬于新木脂素類化合物。張強等[8]從白馬骨葉中得到（+）-松脂素、 （+）-麥迪奧脂素，二者均為從該屬植物中首次分離得到的木脂素類化合物。

1.4 醌類成分 馮順卿等[5]對瑤藥白馬骨開展化學(xué)研究中，通過95%乙醇浸泡，有機溶劑萃取，經(jīng)過柱層析技術(shù)，光譜鑒別技術(shù)等手段，得到了1，4-二羥基-6甲基蒽醌與1，3，5，7-四甲氧基蒽醌，這兩者均為醌類化合物。

1.5 金屬元素 朱修援等[9]采用火焰原子吸收光譜法對六月雪中莖部的Ca、Zn、Mg、Fe、Cu的含量進行了研究，回收率較好，為生藥六月雪中金屬元素的檢測提供了技術(shù)支撐。

1.6其他成分 六月雪也含有其他化學(xué)成分，如鄰苯二甲酸二乙酯[4]、多糖[10]等。

2 藥理作用

2.1 抗菌、解熱作用 劉敏等[11]采用平板測定法研究發(fā)現(xiàn)，六月雪的水提液對金黃色葡萄球菌、大腸桿菌、枯草桿菌以及痢疾桿菌和綠膿桿菌有抑制作用，且對大腸桿菌和枯草桿菌的抑制作用較為顯著，效果好于異戊酸鈉。王愛紅等[12]采用阿司匹林為陽性對照組研究發(fā)現(xiàn)，六月雪的水提液可以使由干酵母所導(dǎo)致發(fā)熱的大鼠以及由大腸桿菌內(nèi)毒素引起發(fā)熱的家兔體溫下降，且與陽性對照組無顯著差異，說明六月雪的水提液具有很明顯的解熱作用。Lien-Chai CHENG等[13]通過抗病毒活性離體實驗證明六月雪提取物具有一定的抗病毒生物活性，值得深入研究。

2.2 對免疫功能的作用 朱秋萍等[14]研究發(fā)現(xiàn)，六月雪水提取物可以顯著提高小鼠的食欲，從而有效增加小鼠體重，促進其生長發(fā)育。此外還發(fā)現(xiàn)六月雪的水提取物可以明顯增加小鼠胸腺重量，提高胸腺指數(shù)，且此作用呈現(xiàn)劑量依賴性。韋金育等[15]對六月雪的根部用甲醇提取后濃縮得到六月雪浸膏。而后采用體外抗腫瘤藥物篩選法 (MTT)法測定發(fā)現(xiàn)六月雪提取原液及其稀釋液有很強的抗腫瘤活性，對腫瘤細(xì)胞的殺傷率最高可達85.30%。以上結(jié)果說明六月雪水提取物具有增強機體免疫力，抗腫瘤等作用。但其作用機理有待進一步研究。

2.3 抗乙肝病毒作用與保肝作用 針對復(fù)方六月雪及六月雪提取物抗乙肝病毒與保肝作用，開展了比較系統(tǒng)與深入的研究。張士軍等[16]闡述了其對HepG2.2.15細(xì)胞HBsAg和HBeAg的抑制作用；張士軍等[16]通過MTT法，研究了其對HepG2.2.15細(xì)胞HBV DNA的抑制作用；張士軍等[18]采用血清藥理學(xué)法進行實驗，通過ELISA法測定，研究了其對HepG2.2.15細(xì)胞HBsAg和HBeAg的抑制作用；楊霞芳等[19]通過體外實驗研究，闡述了其對H BsAg和H BeAg的抑制作用；楊霞芳等[20]采用實時熒光定量PCR法考察了復(fù)方六月雪的抗HBV作用；針對復(fù)方六月雪對鴨乙型肝炎病毒的抑制作用[21-22]，通過藥理實驗及生物活性實驗等方法，研究者也進行了相對深入的考察與研究。同時，研究表明，復(fù)方六月雪對急性化學(xué)性肝損傷[23]、六月雪提取物對小鼠實驗性肝損傷[24]均具有顯著的保護作用，說明復(fù)方六月雪或六月雪提取物具有較好的保肝作用。

2.4 抗關(guān)節(jié)炎作用 宋振玉等[25]通過大鼠蛋白性及甲醛性關(guān)節(jié)炎動物模型，在對多種民方、經(jīng)方等中醫(yī)臨床上常用的或民間常用的單方進行抗關(guān)節(jié)炎活性篩選研究考察中發(fā)現(xiàn)，六月雪對大鼠甲醛性關(guān)節(jié)炎具有一定的抑制作用，揭示了六月雪能夠抗關(guān)節(jié)炎，具有抗關(guān)節(jié)炎的生物活性。

2.5 耐缺氧作用 宓靜英等[26]通過常壓耐缺氧實驗動物模型與異丙腎上腺素增加心肌耗氧量實驗動物模型，考察了六月雪提取物耐缺氧的作用，結(jié)果證明六月雪提取物具有比較顯著的耐缺氧作用。

2.6 對腎臟作用 孫響波等[27]在對六月雪治療腎臟疾病探源中指出，六月雪通過降低蛋白尿、血尿素氮及肌酐水平，對于腎臟疾病的治療具有獨特的優(yōu)勢。

2.7 祛黃褐斑作用 在對白附子、金銀花、白及、六月雪4味中藥乙醇提取物祛黃褐斑作用的考察研究中，發(fā)現(xiàn)六月雪乙醇提取物具有一定強度的祛黃褐斑作用，且六月雪乙醇提取物只在特定的質(zhì)量濃度時才有祛黃褐斑作用[28]。

2.8 對胃黏膜損傷的保護作用 通過無水乙醇法、阿司匹林法、水浸應(yīng)激法及利血平法實驗小鼠胃黏膜損傷動物模型，測定給藥后胃黏膜損傷面積，結(jié)果證明六月雪對胃黏膜損傷具有保護作用[29]。在對無水乙醇胃飼誘發(fā)急性胃黏膜損傷的動物模型考察研究中發(fā)現(xiàn)，六月雪提取物對實驗性胃黏膜損傷具有顯著的修復(fù)作用[30]。

2.9 抑制酪氨酸酶作用 用多巴色素法測定對酪氨酸酶的抑制作用，傅國強等[31]發(fā)現(xiàn)六月雪能夠抑制酪氨酸酶作用，治療針對因酪氨酸酶活性異常所致的色素增加性皮膚病具有較好的應(yīng)用前景。

2.10 毒性 夏勇等[32]對六月雪進行系統(tǒng)的毒理學(xué)研究：六月雪大、小鼠急性經(jīng)口毒性LD50，雌雄兩性均大于5g/kg B.W.，最高可達10g/kg B.W.，按急性毒性分級屬實際無毒類。又對其進行三項誘變實驗，結(jié)果顯示陰性；進而對其進行Ames試驗以及小鼠骨髓細(xì)胞微核試驗和小鼠精子畸形試驗，結(jié)果均顯示為陰性，且陽性組均顯示陽性結(jié)果。試驗結(jié)果說明六月雪無毒，無致突變作用，對人體無害。

3 結(jié)語

六月雪是極具地方特色的苗藥，在民間具有廣泛的應(yīng)用。六月雪資源豐富，具有較高的藥用價值，對民族醫(yī)學(xué)、民族藥學(xué)具有突出的貢獻。苗藥六月雪豐富的化學(xué)成分是其具多種生物活性的物質(zhì)基礎(chǔ)。本文通過對苗藥六月雪化學(xué)成分及藥理作用的收集整理，旨在為后期的研究開發(fā)奠定基礎(chǔ)，挖掘其潛在功能，從而達到對苗藥六月雪的開發(fā)應(yīng)用及對苗藥發(fā)揚光大的目的。

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