三七皂甙類成分分析方法研究進展

劉偉芬 李祿輝

(河南省醫(yī)藥學(xué)校專業(yè)科，開封475004)

三七皂甙類成分分析方法研究進展

劉偉芬 李祿輝

(河南省醫(yī)藥學(xué)校專業(yè)科，開封475004)

綜述了近年來三七及其制劑中化學(xué)成分分析測定的研究進展。介紹現(xiàn)代儀器分析方法在其中的應(yīng)用，包括光譜法、色譜法等，為三七及其制劑的質(zhì)量標準制定及質(zhì)量控制提供有益的借鑒。

三七皂甙；分析方法；HPLC-UV；HPLC-ELSD近紅外光譜；HPLC-HNMR

三七又稱田七、山漆、金不換、三七參、人參三七等。三七Panax notoginseng(Burk)F.H.Chen是我國名貴的中藥材，具有化瘀止血、活血定痛的功效，被譽為血證良藥、傷科要藥。三七含有皂甙、三七素、多糖、氨基酸、揮發(fā)油、脂肪酸、植物甾醇、黃酮苷等。由于三七是人參的近緣植物，許多化學(xué)工作者常借鑒于人參的研究，特別是對皂甙類成分作了比較系統(tǒng)深入的研究?，F(xiàn)代藥理研究也表明，皂甙具有多種藥理活性，為三七的主要有效成分之一［1］。

早期，皂甙類成分的分析僅限于其中總皂甙的分析，且分析方法限于重量法和比色法。隨著更多精密儀器的出現(xiàn)，三七及其制劑的檢測方法也有了很大的發(fā)展，使精確測定其中的單體皂甙成為可能，也為三七及其制劑提供了質(zhì)控指標。

1 總皂甙分析方法

1.1 重量測定法［1］提取三七皂甙后直接稱重的方法稱為重量法。利用重量法測定三七總皂甙方法簡單、快速，但由于提出的所謂總皂甙往往混有不少雜質(zhì)(糖類、有機酸及無機鹽等)，因此測定結(jié)果往往偏高，誤差較大。

1.2 大孔吸附樹脂-比色法 周家明［2］等報道了三七顆粒飲片中總皂甙的含量測定。用大孔吸附樹脂富集純化總皂甙，后用比色法測定。劉愛萍［3］等報道了三七片中總皂甙含量測定。顯色劑為5%香蘭素醋酸溶液極高氯酸，樣品用乙醚和水除去其中的脂溶性和水溶性成分，減少比色干擾，水飽和的正丁醇回流提取。

1.3 溴加成法 梁小燕等［4］采用溴加成法、分光光度比色法測定三七葉苷的含量，并對其進行比較后認為分光光度比色法測定三七葉苷的含量較佳。

2 單體皂甙的分析方法研究進展

2.1 近紅外光譜和聯(lián)用HPLC快速無損分析 近紅外光譜(NIRS)是近幾年來進入制藥行業(yè)的高效綠色分析新技術(shù)?？梢灾苯訉腆w進行掃描分析，具有快速、無損，不使用有機溶劑，樣品制備簡單等優(yōu)點。楊南林［5］等報道了中藥材三七中皂甙類成分的近紅外光譜無損分析新方法，該方法快速無損，結(jié)果可靠。

2.2 HPLC分析法及HPLC與光譜在線聯(lián)用分析法

2.2.1 HPLC-UV定量分析方法 中國藥典2010年版用HPLC-UV進行三七中皂甙含量測定［6］。錢鑫、徐飛［7］等用FHPLC法測定云南白藥膠囊中三七皂苷R1和人參皂苷Rg1的含量，準確可靠，重復(fù)性好。

2.2.2 HPLC-ELSD測定三七中的皂甙類成分 蒸發(fā)光散射檢測器的信號響應(yīng)不依賴于樣品的光學(xué)性質(zhì)，適用于揮發(fā)性低于流動相的組分，可用于不吸收紫外光的組分，因而應(yīng)用范圍比較廣泛。在三七及其制劑的含量測定中，用蒸發(fā)光散射檢測器的較多。

朱潔，溫敏［8］等比較HPLC-UV用HPLC-UV及HPLC-ELSD測定三七膠囊中人參皂甙Rg1和Rb1。證實了HPLC-ELSD法用于人參皂苷Rg1、Rb1的測定較HPLC-UV有其明顯優(yōu)勢。

2.2.3 高效液相色譜-電噴霧電解離質(zhì)譜聯(lián)用 LIU Jinhuai［9］等報道了中藥化學(xué)成分的HPLC／ESI-MS分析。三七成分獲得了良好的分離與檢測。通過與對照品的保留時間、正負離子質(zhì)譜比較，鑒定了14個成分，根據(jù)正負離子質(zhì)譜數(shù)據(jù)和文獻，分析推斷了41個成分。其中，一些皂甙成分為首次在三七中發(fā)現(xiàn)，有助于進一步對三七活性成分研究及質(zhì)量控制。

Li Li［10］等報道了液相色譜-電噴霧電解離質(zhì)譜法對三七中皂甙類成分分析檢測，檢出8種主要成分。通過分子離子峰［M-H］-和［M+AcO］-確定了分子量，即使在沒有對照品的情況下，LC-ESI-MS也能用來鑒別分析三七中已知及未知的成分。

2.4 核磁共振法-質(zhì)譜聯(lián)用定性、定量分析三七中皂甙類成分 袁衛(wèi)梅、司立鮮［11］報道了不同規(guī)格三七的HNMR指紋圖譜比較。但HNMR圖譜只是給出了藥材中含有某個成分，但不能給出各個成分的量。

董阿玲［12］等報道了從三七中分離微量成分三七皂甙R2的方法。通過核磁共振和質(zhì)譜聯(lián)用確定了三七中的三七皂甙R2含量為0.0045%。此方法簡便易行，大大降低了成本，為大量制備微量成分三七皂苷R2提供了一條簡便可行的途徑。

2.5 薄層掃描法測定三七中皂甙類成分 TLCS用于中藥定性較好。定量分析誤差大，影響因素多，檢測過程耗費大量時間，故薄層掃描法已不能作為全定量分析，僅能作為大部分中藥品種的半定量分析方法。

3 展望

薄層掃描法作為中藥的鑒別方法，還將占有一席之地。由于其重現(xiàn)性差、操作誤差大，只能用于半定量分析；高效液相色譜儀的普及，特別是分析技術(shù)的日益提高，實現(xiàn)了色譜、光譜及色譜、質(zhì)譜的在線聯(lián)用，使分離、分析能同步完成，將是三七中各種成分的主要分析手段。

［1］鄭廣植，楊崇仁.三七生物學(xué)及其應(yīng)用［M］.北京：科學(xué)出版社，1994：1-3，27-28.

［2］周家明，崔秀明.三七顆粒飲片中總皂甙的含量測定［J］.人參研究，2003，(3)：38-39.

［3］劉愛萍，楊瓊.三七片中總皂甙含量測定［J］.時珍國醫(yī)國藥，1999，10(6)：414.

［4］梁小燕，陳海珊，陳秀珍，等.三七葉甙含量測定方法比較［J］.廣西植物，1996，16(7)：287.

［5］楊南林，程翼宇，吳永江，等.中藥材三七中皂甙類成分的近紅外光譜快速無損分析新方法［J］.化學(xué)學(xué)報，2003，61(3)：393-398.

［6］國家藥典委員會編.中華人民共和國藥典2010年版.［S］.一部.北京：化學(xué)工業(yè)出版社，2010：11.

［7］錢鑫，徐飛.HPLC法測定云南白藥膠囊中三七皂苷R1和人參皂苷Rg1的含量［J］.西北藥學(xué)，2013，28(3)：263-265.

［8］朱潔，溫敏，張洪彬.HPLC-ELSD測定三七膠囊中人參皂甙Rg1和Rb1［J］.中成藥，2004，26(1)：33-35.

［9］LIU Jinhuai，WANG Xuan，CAI Shaoqing，et al.Analysis of Constituents in the Chinese Drug Notoginseng by Liquid Chromatography-Electrospray Mass Spectrometry［J］.Journal of Chinese Pharmaceutical Science，2004，13(4)：225-237.

［10］Li Li，Rong Tsao，Jianpeng Dou，et al.Detection of saponins in extract of Panax notoginseng by liquid chromatography-electrospray ionization-mass specteometry［J］.Analytica Chimica Acta，2005，536：21-28.

［11］袁衛(wèi)梅，司立鮮.不同規(guī)格三七的1HNMR指紋圖比較［J］.中國實驗方劑學(xué)雜志，2003，9(4)：63.

［12］董阿玲，鄭俊華，果德安，等.從三七中分離微量成分三七皂苷R2的方法［J］.中國中藥雜志，2002，27(10)：793-794.

10.3969／j.issn.1672-2779.2014.03.104

1672-2779(2014)-03-0162-02

蘇 玲 本文校對：蒲曉輝

2013-10-30)