肉桂醛對(duì)肺癌細(xì)胞A549具有體外抑制作用

宋曉兵

漯河市第三人民醫(yī)院病理科，河南 漯河 462300

肉桂醛對(duì)肺癌細(xì)胞A549具有體外抑制作用

宋曉兵

漯河市第三人民醫(yī)院病理科，河南 漯河 462300

目的探討肉桂醛對(duì)肺癌細(xì)胞株A549的生長抑制作用。

肉桂醛；A-549 細(xì)胞；抗腫瘤

肉桂作為重要的藥用和食用植物，長期以來一直為臨床廣泛應(yīng)用。而其對(duì)腫瘤的獨(dú)特抑制效果使其在腫瘤治療方面“身價(jià)倍增”［1-2］。肉桂醛的臨床治療效果主要體現(xiàn)為：清熱解毒、抗菌抗病毒。同時(shí)其用于臨床治療反映出的低毒副作用也使其應(yīng)用和推廣更是呼之欲出。

1 材料與方法

1.1 材料

從中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院細(xì)胞中心買回人肺癌細(xì)胞系A(chǔ)-549細(xì)胞株。從美國Gibco公司買回RPMI 1640 培養(yǎng)基。胎牛血清購自杭州四季青生物工程材料有限公司 ，北京同仁堂藥店買回肉桂，四甲基偶氮唑（MTT）（購自Sigma公司），其余試劑均為國產(chǎn)。

1.2 實(shí)驗(yàn)儀器

HF 212 UV 二氧化碳培養(yǎng)箱（上海力申科學(xué)儀器有限公司） ，550 型微孔板酶標(biāo)儀（美國BIO-RAD公司） ，Nikon Eclipse TS100 型倒置熒光顯微鏡（日本Nikon） ，超凈工作臺(tái)（北京東聯(lián)哈爾儀器制造有限公司）。

1.2 方法

采用MTT 法檢測肉桂醛對(duì)肺癌細(xì)胞株A549增殖抑制作用取對(duì)數(shù)生長期的細(xì)胞，用TE消化液消化計(jì)數(shù)。吸取細(xì)胞懸液200 μl分別接種于96 孔板，37 ℃、5% CO2培養(yǎng)箱培養(yǎng)16 小時(shí)。在表現(xiàn)出細(xì)胞貼壁以后，在事先準(zhǔn)備好的96孔的細(xì)胞培養(yǎng)板里加進(jìn)去分為不同濃度表現(xiàn)的肉桂醛。每種濃度的液體重復(fù)加入8個(gè)孔內(nèi)。與此同時(shí)設(shè)立空白對(duì)照組和細(xì)胞對(duì)照組兩個(gè)對(duì)照組用于對(duì)照試驗(yàn)。置于37 ℃、5% CO2培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)，連續(xù)觀察3 d，記錄細(xì)胞形態(tài)變化。培養(yǎng)結(jié)束前4 h，吸棄培養(yǎng)板中液體，PBS沖洗3 次，每孔加入MTT20 μl，于37℃、5% CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)4 h，去上清后每孔加 DMSO 200 μl，用微量振蕩器振蕩5 min，酶標(biāo)儀比色測吸光度值。實(shí)驗(yàn)重復(fù)3 次。

1.3 統(tǒng)計(jì)處理

對(duì)此數(shù)據(jù)采用17.0軟件系統(tǒng)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)和分析，采用χ2檢驗(yàn)，結(jié)果具有明顯差異，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。

2 結(jié)果

2.1 肉桂醛對(duì)A-549 細(xì)胞增殖抑制的形態(tài)學(xué)變化光鏡下觀察。在使用藥物之前的表現(xiàn)為：A-549 細(xì)胞的形態(tài)表現(xiàn)出規(guī)則的形體狀態(tài)，排布規(guī)則而整齊，胞漿清晰。使用肉桂醛作用48 小時(shí)以后的主要變現(xiàn)為：細(xì)胞形態(tài)開始變化，空泡、腫脹、脫落等。

2.2 肉桂醛對(duì)A-549 細(xì)胞增殖抑制作用肉桂醛能抑制人肺癌細(xì)胞系A(chǔ)-549細(xì)胞增殖，且呈劑量依賴性，IC50值為0.36 mg/ml。

3 討論

肉桂醛的抗腫瘤效果之顯著性目前已經(jīng)得到了大量研究結(jié)果的證實(shí)。同時(shí)其對(duì)人體的較低毒副作用也成為其臨床應(yīng)用的一大優(yōu)勢(shì)。根據(jù)相關(guān)臨床報(bào)道顯示，在體外肉桂醛可以誘導(dǎo)肝癌SMMC-7721細(xì)胞凋亡而發(fā)揮抗腫瘤作用，可以對(duì)人皮膚黑色素瘤、人白血病細(xì)胞、人宮頸癌細(xì)胞、人結(jié)腸癌等細(xì)胞的增殖均有良好的抑制作用。本研究在光鏡下及用MTT 法觀測肉桂醛對(duì)A-549 細(xì)胞生長抑制作用。在光鏡下觀察后發(fā)現(xiàn)，經(jīng)過用藥以后細(xì)胞出現(xiàn)的明顯的形態(tài)改變，細(xì)胞開始出現(xiàn)空泡、腫脹、脫落等現(xiàn)象。本研究主要是針對(duì)肉桂醛在體外抗腫瘤細(xì)胞作用的研究，但由于肉桂醛進(jìn)入機(jī)體后可能與血漿蛋白或組織蛋白結(jié)合，或經(jīng)肝臟酶代謝等一系列復(fù)雜的藥代動(dòng)力學(xué)過程，并發(fā)揮其生物學(xué)作用，因此，肉桂醛在動(dòng)物體內(nèi)抗癌的作用還需要進(jìn)一步研究。

［1］Brackman G，Defoirdt T，Miyamoto C，et al． Cinnamaldehyde and cinnamaldehyde derivatives reduce virulence in Vibrio spp． by decreasing the DNA-binding activity of the quorum sensing response regulator LuxR［J］． BMC Microbiol． 2008，8：149．

［2］Juneja VK， Friedman M． Carvacrol and cinnamaldehyde facilitate thermal destruction of Escherichia coli O157：H7 in raw ground beef［J］． J Food Prot． 2008，71（8）： 1604-11．

Cinnamaldehyde to lung cancer cell line A549 has obvious antitumor activity in vitro

SONG Xiaobing The third people’s hospital of luohe， Hebei 462300， China

ObjectiveTo explore the inhibition of cinnamaldehyde to the growth of lung cancer cell lines A549.MethodsUsing thiazole blue colorimetry to detect the inhibition of cinnamaldehyde on the growth of human lung cancer cell line A - 549 cell lines in vitro, calculate the half inhibitory concentration.ResultsCinnamaldehyde inhibits the proliferation of human lung cancer cell line A - 549 cells, which is dose dependent，IC50 alue concentration is 0.36 mg/ml.ConclusionIn vitro, cinnamaldehyde has an obvious antitumor activity to lung cancer cell line A549.

Cinnamaldehyde；A549 cell；Antitumor

R734.2

B

1674-9316（2014）06-0030-03

10.3969/J.ISSN.1674-9316.2014.06.017

方法采用噻唑藍(lán)比色法檢測肉桂醛對(duì)體外培養(yǎng)的人肺癌細(xì)胞系A(chǔ)-549 細(xì)胞株的生長抑制作用，計(jì)算半數(shù)抑制濃度。

結(jié)果肉桂醛能抑制人肺癌細(xì)胞系A(chǔ)-549 細(xì)胞增殖，且呈劑量依賴性，IC50值為0.36 mg/ml。

結(jié)論在體外，肉桂醛對(duì)肺癌細(xì)胞株A549具有明顯抗腫瘤活性。