努比亞山羊產(chǎn)氣莢膜梭菌病的診治

釧有科，肖 嘯，濮永華，龔興建

（1.保山市動物疫病預(yù)防控制中心，云南 保山678000；2.云南農(nóng)業(yè)大學(xué)動物科學(xué)技術(shù)學(xué)院，云南 昆明650201）

努比亞山羊原產(chǎn)于非洲北部的埃及、蘇丹，屬肉乳兼用型品種，具有雙羔率高、體型大、生長快、適應(yīng)性強等特點，20世紀(jì)80年代中后期廣西、四川、湖北從英國和澳大利亞引進(jìn)飼養(yǎng)，其與本地山羊雜交優(yōu)勢明顯。保山市飼養(yǎng)的努比亞山羊系近年從省內(nèi)路南石林引進(jìn)，用于雜交改良保山本地云嶺黑山羊。2013年5月，保山市某種羊場飼養(yǎng)的努比亞山羊相繼發(fā)病死亡，該場飼養(yǎng)努比亞山羊202只，半個月時間相繼發(fā)病48只、死亡37只，發(fā)病率23.76%，死亡率18.32%。保山市動物疫病預(yù)防控制中心應(yīng)該種羊場業(yè)主的聘請，并在云南農(nóng)業(yè)大學(xué)獸醫(yī)院專家的指導(dǎo)幫助下，經(jīng)臨床檢查、病理剖檢和實驗室檢驗，最終診斷為產(chǎn)氣莢膜梭菌病。產(chǎn)氣莢膜梭菌系革蘭陽性厭氧梭狀芽孢桿菌，廣泛存在于人畜糞便、土壤、水和塵埃中。同時也是腸道中常見菌之一，屬典型的條件致病菌。對家畜能引起腸毒血癥、壞死性腸炎、痢疾等病癥。確診后隨即對未發(fā)病的羊只采取預(yù)防措施，對發(fā)病羊只采取治療措施，使病情得到有效控制，報告如下。

1 發(fā)病情況

該羊群過去實行放牧與圈養(yǎng)結(jié)合，即白天放牧、早晚補飼，近1年半時間全部實行圈養(yǎng)，飼喂干草、青草和精料，開始情況一直很好。從2013年5月28日開始相繼發(fā)病死亡，截至6月17日，該場飼養(yǎng)的202只努比亞種羊共發(fā)病48只、死亡37只，發(fā)病率23.76%，死亡率18.32%，業(yè)主用自學(xué)防病知識醫(yī)治無效，向保山市動物疫病預(yù)防控制中心求助。

2 臨床癥狀

體溫均在38.5℃～40℃，采食量減少，病羊離群，獨處趴臥，不愿走動，伴有腹瀉、腹部膨脹，耳尖、蹄部、鼻唇部發(fā)紺，最后食欲廢絕，精神沉郁，伴有疼痛叫聲，消瘦，后肢無力，行走搖晃，最后倒地不起。部分病羊還表現(xiàn)神經(jīng)癥狀：亂沖亂撞、轉(zhuǎn)圈、倒地四肢劃動、全身肌肉顫抖、抽搐、怪叫、呻吟，最后呼吸困難而死。也有不具任何先兆癥狀者突然死亡。

3 病理剖檢

先后剖檢即將死亡的病羊3只，可視黏膜發(fā)紺或充血、有點狀出血，肌肉顏色基本正常，但關(guān)節(jié)周邊肌肉發(fā)白，四肢關(guān)節(jié)關(guān)節(jié)囊有少量積液，關(guān)節(jié)緣結(jié)構(gòu)疏松。心包輕度積液，心肌變白，冠狀溝脂肪浸潤。腎臟輕度水腫。肺臟充血、出血、邊緣壞死。胃腸脹氣，真胃有出血性炎癥，胃底黏膜及幽門周圍黏膜有大小不等的出血斑塊，表面壞死，腸黏膜充血、出血，十二指腸內(nèi)容物呈小豆粥色，黏膜有明顯的充血、出血病變。

4 實驗室檢驗

4.1 病料采集 無菌采集空腸、回腸內(nèi)容物、腸黏膜以及肝脾等作為被檢材料。

4.2 細(xì)菌學(xué)檢驗 取空腸內(nèi)容物、肝、脾制成觸片，革蘭染色鏡檢均發(fā)現(xiàn)大量革蘭陽性桿菌，單個或成對排列，菌端鈍圓，有莢膜，部分菌有芽孢。

4.3 病原分離培養(yǎng) 將腸內(nèi)容物加入適量生理鹽水，混勻，2 000 r/min離心10min，取上清液接種于鮮血瓊脂平板上，置37℃溫箱厭氧培養(yǎng)24 h，在鮮血瓊脂平板上長出小圓形，中央隆起灰白色不透明的菌落，菌落周圍有溶血環(huán)。挑取單個菌落染色鏡檢，見單個或成對兩端鈍圓的革蘭陽性桿菌。

4.4 生化試驗 取分離菌進(jìn)行生化試驗，結(jié)果該分離菌在牛乳培養(yǎng)基中培養(yǎng)10 h后，能分解牛乳中的糖，產(chǎn)酸，凝固酪蛋白。液化明膠不產(chǎn)生吲哚，還原硝酸鹽，產(chǎn)生硫化氫，分解葡萄糖、乳糖、麥芽糖、淀粉，產(chǎn)酸產(chǎn)氣。

4.5 毒素檢測 取回腸內(nèi)容物用生理鹽水稀釋2倍，充分混勻后，3 000 r/min離心15min，取上清液，用過濾器過濾后靜脈注射一組小鼠（4只），每只0.5mL，注射后觀察，小鼠于16min死亡1只，其余呼吸加快，并于38 min、1.5 h、3 h各死亡1只。將上述待檢驗液0.3 mL給3只小鼠皮內(nèi)注射，48 h后觀察，注射部位可見壞死變化。

4.6 中和試驗 取滅菌試管4支，分別加入含毒素濾液、生理鹽水和抗毒素（第1管B型抗毒素+濾液、第2管C型抗毒素+濾液、第3管D型抗毒素+濾液、第4管生理鹽水+濾液）。將12只小鼠分為4組，每組3只，各組依次注射上述管中的混合液，劑量為0.5mL/只，72 h觀察結(jié)果為第3只試管混合液注射的3只小鼠存活，其余死亡，證明腸毒素為D型產(chǎn)氣莢膜梭菌毒素。

5 診斷結(jié)果

種羊發(fā)病死亡的5月底及6月上中旬，氣溫驟變，炎熱，陰雨連綿，導(dǎo)致羊群抵抗力下降，再加精料補充過多，粗料補充不足，胃腸道蠕動減弱，精料在胃腸道內(nèi)大量發(fā)酵，致使原存在于腸道中的產(chǎn)氣莢膜梭菌大量繁殖，產(chǎn)生外毒素進(jìn)入血液引起全身毒血癥導(dǎo)致發(fā)病、死亡。通過細(xì)菌學(xué)檢驗、病原分離培養(yǎng)、生化試驗、毒素檢測、中和試驗可判斷出該腸道內(nèi)容物中帶有D型產(chǎn)氣莢膜梭菌。綜合臨床癥狀、病理變化和實驗室檢驗結(jié)果，最后確診該病為D型產(chǎn)氣莢膜梭菌引起的羊產(chǎn)氣莢膜梭菌中毒病。

6 防治措施

6.1 預(yù)防 隔離發(fā)病羊只，對病死羊只進(jìn)行無害化處理。清理糞便，對羊舍及飼養(yǎng)用具用3%～5%大堿溶液進(jìn)行全面消毒。驅(qū)趕羊群，加強運動，增強腸蠕動，減少精料飼喂量，增加投喂青嫩牧草。適量增加粗纖維飼料飼喂量。對未發(fā)病的羊只緊急接種羊梭菌病三聯(lián)四防苗，每只肌肉注射1mL。6.2 治療 氟苯尼考0.2mL/kg體重，頭孢0.25 g/只（小羊0.125 g/只），肌肉注射，連用5 d；對重癥羊只使用輸液配合治療。處方1：5%葡萄糖氯化鈉60 mL、肌酐1支、輔酶A 1支、三磷酸腺苷二鈉1支。處方2：5%葡萄糖氯化鈉60mL、科特狀3mL。處方3：5%葡萄糖氯化鈉60mL、維生素C 2支、維生素B62支、維生素B121支。每天1次，連續(xù)使用3 d為1個療程。另外，加中藥灌服療效更佳，中藥：倉術(shù)9 g、大黃9 g、貫仲4 g、龍膽草4 g、玉片3 g、甘草9 g、雄黃1 g（另外包起來），以上為1只羊的用量，大群應(yīng)用時可以按羊只數(shù)量配藥，將前面6種藥先加水煎煮，后加入雄黃分只灌服，灌服后加服少量植物油。

7 小結(jié)與討論

7.1 通過采取以上預(yù)防和治療措施，該場羊病得到了很好的控制，未再復(fù)發(fā)，說明診斷準(zhǔn)確，預(yù)防治療措施有效。

7.2 該種羊場本次發(fā)病的主要原因是近日氣溫驟變，炎熱、陰雨連綿，導(dǎo)致羊群抵抗力下降。該羊場實行圈養(yǎng)，羊只運動量小，精料補充過多，粗纖維飼料飼喂少，導(dǎo)致腸蠕動減弱，原本廣泛存在的產(chǎn)氣莢膜梭菌，在腸道內(nèi)積聚并大量繁殖產(chǎn)生毒素進(jìn)入血液，引起全身毒血癥，導(dǎo)致死亡。

7.3 根據(jù)本病發(fā)生原因，應(yīng)加強圈養(yǎng)羊的飼養(yǎng)管理，對圈養(yǎng)羊要做到草料精、青、粗合理搭配，保證提供相對全面的營養(yǎng)物質(zhì)，供給清潔的飲水，每天要給羊只有足夠時間的運動，增強腸蠕動，以增加抵抗力。

7.4 種羊場應(yīng)加強衛(wèi)生防疫工作。對羊圈、運動場地、養(yǎng)羊用具，保持清潔，用兩種以上消毒藥品定期交替消毒，羊的糞尿要及時清除，并進(jìn)行堆積發(fā)酵處理。定期驅(qū)蟲，每年3月份、10月份對羊只進(jìn)行2～3次體內(nèi)外寄生蟲的驅(qū)蟲。建立免疫程序，對危害羊群的主要疫病實行計劃免疫，預(yù)防本病發(fā)生，可采取每隔半年接種1次羊梭菌病三聯(lián)四防苗。

[1] 蔡寶祥.家畜傳染病學(xué)[M].4版.北京：中國農(nóng)業(yè)出版社，2006：257.

[2]中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院哈爾濱獸醫(yī)研究所.獸醫(yī)微生物學(xué)[M].2版.北京：中國農(nóng)業(yè)出版社，2013：162.