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    中藥方劑對鴨疫里氏桿菌疫苗的免疫佐劑作用

    2010-02-11 07:55:19肖琛聞鮑國連季權(quán)安
    中國畜牧獸醫(yī)文摘 2010年3期
    關(guān)鍵詞:合方鴨疫活苗

    肖琛聞 鮑國連 韋 強 劉 燕 季權(quán)安

    鴨疫里氏桿菌病又稱鴨傳染性漿膜炎,是由鴨疫里氏桿菌(RA)引起的鴨、鵝、火雞等多種禽類的一種急性或慢性傳染病。1~8周齡鴨敏感,惡劣環(huán)境條件可以促發(fā)感染。發(fā)病率為5%~90%,病死率高達80%,慢性耐過鴨主要表現(xiàn)神經(jīng)性癥狀,導(dǎo)致殘鴨和僵鴨。RA疫苗分滅活苗、弱毒活苗和亞單位菌苗等。高福等在研制RA福爾馬林滅活苗的基礎(chǔ)上,制得了礦物油佐劑滅活苗,最低保護率為75%,但注射部位有微弱的不吸收硬結(jié)。蘇小運等研制的鋁膠滅活苗一免后7~10d保護率為50%,20d后保護率為75%,保護率出現(xiàn)較慢。弱毒苗的缺點是容易造成細菌在被免動物體內(nèi)返毒,危害更大;亞單位菌苗雖然能夠提供較好的保護力,但其存在潛在的不確定性,因而暫時仍不能推廣?,F(xiàn)在還沒有理想的鴨疫里氏桿菌疫苗。

    很多研究報道中藥復(fù)方也可作為佐劑,有增強疫苗免疫的效果,例如當(dāng)歸補血湯、四君子湯、玉屏風(fēng)散、小柴胡湯等。本研究試圖將玉屏風(fēng)散、四君子湯以及兩者之合方玉風(fēng)君子湯用于鴨疫里氏桿菌滅活濕苗中,觀察其免疫佐劑效果,為新型鴨疫里氏桿菌疫苗的開發(fā)提供新的思路。

    (1)玉屏風(fēng)散的水煎劑(YPF)

    取黃芪90g、白術(shù)60g、防風(fēng)30g,加水540ml(按每克生藥加水3ml),冷水浸泡30 min。煮沸后90℃慢煎40

    min,趁熱過濾,濾液自然滴盡,二煎加水360 ml(按每克生藥加水2 ml),煮沸后,90℃慢煎40 min,趁熱過濾,濾液自然滴盡,合并濾液,95℃水浴濃縮至150ml,濃度為1.2g/ml。

    (2)四君子湯的水煎劑(SJZ)

    取黨參40g、白術(shù)18g、茯苓18g、甘草12g,混合加水264ml,煮沸后90℃慢煎40min,趁熱過濾,濾液自然滴盡,二煎加水176 ml,煮沸后,90℃慢煎40 min,趁熱過濾,濾液自然滴盡,合并濾液,95℃水浴濃縮至100ml,濃度為0.88g/ml。

    (3)玉風(fēng)君子湯(YFJZ)

    黃芪90g、白術(shù)60g、茯苓30g、防風(fēng)30g、黨參30g、甘草10g,混合加水750ml,煮沸后90℃慢煎40 min,趁熱過濾,濾液自然滴盡,二煎加水500ml,煮沸后,90℃慢煎40min,趁熱過濾,濾液自然滴盡,合并濾液,95℃水浴濃縮至250ml,濃度為1 g/ml。

    試驗結(jié)果表明在免疫后3周,合方組能夠顯著提高鴨對于鴨疫里氏桿菌的抗體水平。玉屏風(fēng)散能夠提高鴨對于RA抗體的產(chǎn)生水平,但無統(tǒng)計學(xué)差異,四君子湯似乎對細菌苗的免疫并無佐劑作用。

    有文獻報道玉屏風(fēng)散或四君子湯能夠提高動物特異性或特異性免疫反應(yīng),本研究所得結(jié)果與文獻報道并不符。分析原因可能有以下幾點:①本研究中所使用的為細菌性疫苗,玉屏風(fēng)散或四君子湯的佐劑效果不佳或許與此有關(guān),兩方對于病毒性疫苗的免疫效果更佳;②服用劑量不一樣可能是造成佐劑效果不明顯的原因之一。

    本研究中只有合方對鴨RA抗體產(chǎn)生起顯著性作用,研究發(fā)現(xiàn),合方對于鴨疫里氏桿菌疫苗的免疫主要在體液免疫方面發(fā)揮佐劑作用,在細胞免疫作用并不十分明顯,然而在流式細胞研究中我們發(fā)現(xiàn)了一個有趣的現(xiàn)象:即所有試驗組(除四君子湯組外)CD4+、CD8+細胞百分比同對照組相比有所下降但試驗組CD4+/CD8+比值卻高于對照組,無統(tǒng)計學(xué)差異。CD4+/CD8+的比值增高,說明受免動物的細胞免疫有增強趨勢。但為什么絕對百分比有所下降,分析原因可能與本研究中受免動物在5日齡時就給藥有關(guān),雛鴨在生長初期免疫系統(tǒng)并沒有完全發(fā)育,在這時給雛鴨服用具有免疫調(diào)節(jié)功能的中藥或許反而對雛鴨的免疫系統(tǒng)發(fā)育造成一種負(fù)影響。免疫系統(tǒng)的生長在其后階段對于中藥具有某種依賴性,因此如何選擇一個給藥最佳時間成為今后研究的又一課題。

    體重試驗表明,所有試驗組方劑對于鴨的生長無副作用。因此,可以對本研究中的合方玉風(fēng)君子湯在鴨疫里氏桿菌疫苗上的佐劑運用方面作進一步研究。

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