免疫組化技術(shù)在病理診斷中的應(yīng)用思考

管沛璇

（天津醫(yī)科大學(xué)臨床醫(yī)學(xué)院醫(yī)學(xué)系，天津 300270）

免疫組化技術(shù)在病理診斷中的應(yīng)用思考

管沛璇

（天津醫(yī)科大學(xué)臨床醫(yī)學(xué)院醫(yī)學(xué)系，天津 300270）

目前在臨床上，免疫組化已經(jīng)在腫瘤病理診斷中得到了廣泛應(yīng)用，涉及領(lǐng)域包括腫瘤組織起源的鑒別、未分化惡性腫瘤性質(zhì)的判定、各種形態(tài)系統(tǒng)腫瘤鑒別、確定腫瘤原發(fā)部位等。近幾年關(guān)于免疫組化的研究不斷深入，本文從提高病理診斷準(zhǔn)確性、激素受體及生長因子的檢測對預(yù)后和治療的意義、癌基因的臨床應(yīng)用、對微小轉(zhuǎn)移病灶及時準(zhǔn)確的發(fā)現(xiàn)等方面對免疫組化在病理診斷中的應(yīng)用情況進(jìn)行了闡述。

免疫組化技術(shù)；腫瘤；病理診斷；臨床價值

在20世紀(jì)70年代，免疫組化技術(shù)在病理診斷中開始被應(yīng)用，隨著技術(shù)的不斷成熟，已經(jīng)達(dá)到了抗原修復(fù)技術(shù)、自動免疫染色系統(tǒng)以及敏感的檢測系統(tǒng)的建立等。目前在臨床腫瘤病理診斷中，免疫組化技術(shù)應(yīng)用越來越廣泛，臨床價值愈發(fā)顯著[1]。本文出于對免疫組化技術(shù)在病理診斷中的應(yīng)用價值進(jìn)行評價分析的目的，從提高病理診斷準(zhǔn)確性、激素受體及生長因子的檢測對預(yù)后和治療的意義、癌基因的臨床應(yīng)用、對微小轉(zhuǎn)移病灶及時準(zhǔn)確的發(fā)現(xiàn)等方面展開了綜述，詳見下文。

1 提高病理診斷準(zhǔn)確性

以臨床醫(yī)師角度分析，病理診斷效果顯著，結(jié)果準(zhǔn)確，癌癥就是癌癥、結(jié)核就是結(jié)核，不會出現(xiàn)錯誤。曾有文獻(xiàn)報道[2]，石蠟切片100%正確，術(shù)中快速診斷的準(zhǔn)確率應(yīng)達(dá)到98%，然而臨床實踐中發(fā)現(xiàn)，想要達(dá)到診斷100%準(zhǔn)確是不可能的，首先由于技術(shù)水平還未達(dá)到要求，另外，現(xiàn)階段的認(rèn)識水平也十分有限，鑒別診斷手段無法做出準(zhǔn)確診斷。在廣泛應(yīng)用免疫組化技術(shù)前，大概10%的腫瘤診斷均十分困難，而在免疫組化技術(shù)發(fā)展起來以后，雖然由于檢驗員的經(jīng)驗及抗體數(shù)量、種類的不同可影響檢查效果，但患者的臨床診斷率已提高至50%～80%，因此可以斷定會有半數(shù)以上疑難病例經(jīng)免疫組化技術(shù)得到了確診，這可以為腫瘤患者的臨床治療提供有力指導(dǎo)。

2 檢測生長因子、激素受體對治療及預(yù)后的積極意義

人體內(nèi)諸多生長因子與激素受體在調(diào)節(jié)正常組織各種功能中具有重要地位，并且會在很大程度上直接影響著腫瘤生物學(xué)行為，而在腫瘤各種生長因子及激素受體檢查中，利用免疫組化技術(shù)予以定量、定位分析，在臨床腫瘤診治工作中的應(yīng)用較為廣泛，并且在乳腺癌與激素受體關(guān)系評價中得到了明確的結(jié)論：刺激素受體陽性乳腺癌患者預(yù)后較陰性更加理想，顯著延長無瘤生存期?，F(xiàn)階段在臨床上，癌細(xì)胞核內(nèi)激素受體可用于預(yù)測乳腺癌對于激素的反應(yīng)性。

3 癌基因應(yīng)用

癌基因在腫瘤生物學(xué)內(nèi)的應(yīng)用價值的相關(guān)研究并不少見，諸多研究揭示，瘤細(xì)胞通常有癌基因突變、擴(kuò)增、活性異常、移位等表現(xiàn)，也可通過MRNA瘤的蛋白水平異常增加來表現(xiàn)，采取免疫組化技術(shù)定量并定位測量該類蛋白，可用于評價其臨床價值。雖然瘤基因有較多種類，然而現(xiàn)階段已經(jīng)有腫瘤臨床意義的則很少，多為C-MYC、e-erbB、RAS以及P53等。

已有研究證實[3]，C-myc為在核內(nèi)DNA產(chǎn)生作用的一個腫瘤基因，可有效刺激DNA合成，如果C-myc表達(dá)明顯增加可有效促進(jìn)腫瘤生長及其進(jìn)展，促使腫瘤侵襲性大幅提高。通過對小細(xì)胞肺癌及宮頸癌等患者展開進(jìn)一步深入研究發(fā)現(xiàn)，對于那些C-myc表達(dá)明顯增加的患者，其生存期均有明顯的縮短。

4 對微小轉(zhuǎn)移病灶及時準(zhǔn)確的發(fā)現(xiàn)

對于傳統(tǒng)的病理診斷手段而言，在組織中找到單個的轉(zhuǎn)移性腫瘤或者是幾個腫瘤會十分的困難，甚至是不可能，而經(jīng)免疫組化技術(shù)則可以幫助微小轉(zhuǎn)移病灶的發(fā)現(xiàn)。譬如說對骨髓的免疫組化檢查中可發(fā)現(xiàn)，常規(guī)方法認(rèn)為是無骨髓受累的乳腺癌患者中會有21%的患者存在骨髓轉(zhuǎn)移灶。除此外，病理中采取活檢技術(shù)進(jìn)行檢測時，因采集的組織相對較少，又會存在擠壓等諸多認(rèn)為改變，進(jìn)而增加了診斷的難度，準(zhǔn)確性大大降低，而在采取免疫組化染色時，則能夠?qū)Π┘?xì)胞的存在進(jìn)行顯示，使微小癌變組織、轉(zhuǎn)移組織甚至是不易察覺的病變均得到準(zhǔn)確的診斷。

5 對腫瘤細(xì)胞增生程度的評價

有研究[4]發(fā)現(xiàn)，腫瘤細(xì)胞增生活躍程度可直接影響到患者的治療效果及預(yù)后情況。在對腫瘤生長狀況活躍與否進(jìn)行判斷時，傳統(tǒng)判斷方法是通過病理組織學(xué)觀察細(xì)胞核分裂像多少，然而，因計數(shù)準(zhǔn)確度很難保證，又加之影響因素復(fù)雜，從而導(dǎo)致臨床應(yīng)用受限。而免疫組化技術(shù)可以定量與定位檢測腫瘤細(xì)胞增生抗原，且其操作相對簡單而結(jié)果可靠，可以借助于ki-67、增殖細(xì)胞抗原單克隆抗體對其予以科學(xué)準(zhǔn)確鑒別。

6 對治療分期的影響

Bauer KR[5]等人的研究發(fā)現(xiàn)，腫瘤屬于浸潤發(fā)生還是原位、有無淋巴管侵襲等和腫瘤分期關(guān)聯(lián)密切，而在對這些問題進(jìn)行判斷時，采用常規(guī)病理組織學(xué)檢查方法通常的難度較大，準(zhǔn)確度較低，在采取免疫組化技術(shù)后，則能夠快速準(zhǔn)確的獲取檢測結(jié)果。譬如說經(jīng)層粘連蛋白以及Ⅳ型膠原蛋白的單克隆抗體能夠?qū)啄さ闹饕煞诌M(jìn)行清晰的顯示，若是對上皮性癌突變基底膜進(jìn)行確定后邊可證實非原位癌，是浸潤癌，預(yù)后意義也會因此而不同。

7 對腫瘤治療的指導(dǎo)意義

采取免疫組化技術(shù)對腫瘤進(jìn)行診斷和鑒別的臨床意義顯著，已經(jīng)得到了廣泛的證實，近期有文獻(xiàn)報道，免疫組化技術(shù)在腫瘤的治療同樣也存在良好的應(yīng)用前景。諸多腫瘤對化療均不敏感，出現(xiàn)該現(xiàn)象的主要原因為腫瘤細(xì)胞內(nèi)多藥耐藥基因編碼的酶活性增加引起的，譬如說二氫葉酸還原酶以及p-糖蛋白增加，經(jīng)免疫組化方法能夠?qū)?xì)胞內(nèi)的這些酶、糖蛋白等進(jìn)行檢查，進(jìn)而對腫瘤的耐藥性進(jìn)行了解，經(jīng)這些免疫組化的方法得到定位定量檢測后，對腫瘤治療方案進(jìn)行選擇，從而達(dá)到理想的治療效果。

8 免疫組化技術(shù)中抗體的選擇

在免疫組化技術(shù)應(yīng)用在病理診斷中時，抗體的選擇是關(guān)鍵，為了將腫瘤組織來源區(qū)分開，可以講抗體分成以下幾類：①上皮類抗體，以細(xì)胞角蛋白、角蛋白、上皮細(xì)胞膜抗原、癌胚抗原為主；②軟組織類抗體，主要包括肌源性標(biāo)記結(jié)蛋白、間葉細(xì)胞標(biāo)記波形蛋白、平滑肌肌動蛋白、肌球蛋白等；③淋巴細(xì)胞抗體：包括有B細(xì)胞標(biāo)記CD20、白細(xì)胞共同抗原、全T細(xì)胞標(biāo)記CD3以及Ig輕鏈；④神經(jīng)內(nèi)分泌細(xì)胞抗體，以神經(jīng)原特異性烯醇化酶、突觸素、嗜鉻顆粒蛋白A為主；⑤黑色素細(xì)胞抗體，包括有人體黑色素小體45和S-100蛋白；⑥中樞神經(jīng)類抗體，以神經(jīng)原標(biāo)記神經(jīng)微絲、膠質(zhì)細(xì)胞標(biāo)記膠原纖維酸性蛋白為主。一閃抗體只有在科學(xué)合理利用的前提下才能夠為臨床診斷提供可靠的參考依據(jù)。一般情況下，可以選擇適當(dāng)抗體一次性對腫瘤類型進(jìn)行確診，若是不可以，則可選擇以上幾大類抗體中有代表性的進(jìn)行初步診斷，在腫瘤大類明確后展開有針對性的第2次標(biāo)記抗體進(jìn)行確診，進(jìn)而使診斷率得到顯著提高。

9 小 結(jié)

免疫組化技術(shù)在臨床診斷中具有操作簡單、實用、快速以及經(jīng)濟(jì)等優(yōu)勢，為臨床病理診斷中一種常用的先進(jìn)技術(shù)，近幾年隨著醫(yī)學(xué)技術(shù)的不斷發(fā)展，使得免疫組化技術(shù)也得到了完善，應(yīng)用不斷廣泛，效果顯著，近期有研究顯示，其在指導(dǎo)臨床治療中同樣具有顯著的臨床價值，值得關(guān)注，并展開深入研究，以期對免疫組化技術(shù)的優(yōu)勢進(jìn)行全面挖掘，為臨床腫瘤疾病的診斷和治療提供更加可靠的參考依據(jù)。

[1] 張衛(wèi)琴.免疫組化技術(shù)在病理診斷中的應(yīng)用[J].安徽醫(yī)藥,2012, 17(11): 112-114.

[2] 程樂,戴艷紅,徐新運(yùn).內(nèi)淋巴囊腫瘤臨床、影像、病理和免疫組化分析[J].醫(yī)學(xué)影像學(xué)雜志,2012,26(6):117-119.

[3] 李紅英.免疫組化三陰乳腺癌患者的臨床病理特征及預(yù)后分析[J].基層醫(yī)學(xué)論壇,2011,17(29):2231-2232.

[4] 趙劍萍,高冬明.骨髓活檢組織石蠟連片在免疫組化中的應(yīng)用[J].中國實用醫(yī)藥,2012,19(8):1032-1034.

[5] Bauer KR,Brown M,Cress RD,et al.Descriptive analysis of estro-genreceptor (ER)negative,progesterone receptor (PR)negative,and HER2-negative invasive breast cancer,the socalled triple-neg-ative phenotype:a population based study from the California cancerRegistry[J].Cancer,2007,109(9):1721-1728.

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