芫花枝條木脂素化學(xué)成分研究

徐光，李天景，阮征，姜永濤*

(1.山東綠葉制藥有限公司，山東 煙臺(tái) 264003；2.煙臺(tái)大學(xué) 藥學(xué)院，山東 煙臺(tái) 264005)

研究開(kāi)發(fā)

*

姜永濤，副教授，研究方向：天然藥物化學(xué)；E-mail：yongtao@luye.cn

芫花枝條木脂素化學(xué)成分研究

徐光1，李天景2，阮征1，姜永濤1*

(1.山東綠葉制藥有限公司，山東 煙臺(tái) 264003；2.煙臺(tái)大學(xué) 藥學(xué)院，山東 煙臺(tái) 264005)

目的研究芫花枝條中木脂素類(lèi)化學(xué)成分。方法采用硅膠、凝膠、反相硅膠、制備薄層色譜等方法對(duì)芫花枝條中的木脂素類(lèi)成分進(jìn)行分離純化，通過(guò)譜學(xué)分析技術(shù)進(jìn)行化合物結(jié)構(gòu)鑒定。結(jié)果分離鑒定了8個(gè)木脂素類(lèi)化合物，分別鑒定為：芝麻脂素(1)、紫丁香樹(shù)脂酚(2)、落葉松脂醇(3)、左旋松脂醇(4)、蕘花酚(5)、salicifoliol(6)、vladinol D(7)、異落葉松脂醇(8)。結(jié)論化合物8為首次從芫花枝條中分離得到，化合物1、5、6、7為首次從瑞香科植物中分離得到。

芫花枝條；木脂素

芫花DaphnegenkwaSieb.et Zucc.為瑞香科植物，主產(chǎn)于安徽、浙江、江蘇、山東等地。《中國(guó)藥典》記載芫花以干燥花蕾入藥，味苦、辛，性溫；有毒。具有瀉水逐飲的功能，外用殺蟲(chóng)療瘡[1]。芫花的根皮、枝條也可作為藥用，在民間偏方中應(yīng)用廣泛。芫花的枝條簡(jiǎn)稱(chēng)“芫花條”，味辛，性溫，有毒，可以療疥癬，治惡瘡風(fēng)濕痹及毒風(fēng)、菌毒，和其他中藥配伍可以用來(lái)治療凍瘡、手足癬以及風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎[2]?！败净l”與綠豆為主組成的中成藥消絡(luò)痛膠囊在臨床上用來(lái)治療某些因風(fēng)濕而引起的關(guān)節(jié)炎[3]。國(guó)內(nèi)外對(duì)芫花的化學(xué)成分研究主要集中在芫花的花蕾、根、葉3個(gè)部位，從中分離得到的化合物主要為咖啡酸酯、香豆素、黃酮、萜類(lèi)等化合物[4]，對(duì)于芫花枝條中木脂素類(lèi)的化學(xué)成分研究較少。本文對(duì)芫花枝條中的木脂素類(lèi)化合物進(jìn)行了研究，鑒定了8個(gè)化合物，其中異落葉松脂醇為首次從芫花枝條中分離得到，芝麻脂素、蕘花酚、salicifoliol、vladinol D為首次從瑞香科植物中分離得到。

1 儀器與材料

Boetius顯微熔點(diǎn)測(cè)定儀(溫度未校正)；Bruck 400核磁共振儀，TMS為內(nèi)標(biāo)；ZAB Spec型質(zhì)譜儀；薄層色譜板、柱色譜用硅膠(煙臺(tái)市化工研究所)。三氯甲烷、甲醇、環(huán)己烷、乙酸乙酯、丙酮均為分析純。

芫花枝條由魯泰環(huán)中制藥有限公司提供，經(jīng)煙臺(tái)大學(xué)生藥室趙燕燕博士鑒定為瑞香科瑞香屬芫花DaphnegenkwaSieb.et Zucc.的枝條。

2 提取與分離

芫花干燥枝條15 kg，粉碎，用95%乙醇100 L加熱回流提取3次，每次1 h，乙醇提取液減壓濃縮得浸膏800 g，取浸膏500 g，用90%乙醇加熱超聲溶解，用硅藻土1 000 g拌樣，干燥，用石油醚5 000 mL萃取除去小極性部分后，依次用三氯甲烷、丙酮各5 000 mL萃取，濃縮萃取液得三氯甲烷萃取物50 g、丙酮萃取物250 g。取40 g三氯甲烷萃取物，100～200目硅膠120 g拌樣，經(jīng)硅膠柱色譜，環(huán)己烷-乙酸乙酯-乙醇(15∶1∶0～1∶1∶1)梯度洗脫得到9個(gè)組分。環(huán)己烷-乙酸乙酯(15∶1)洗脫液濃縮后放置過(guò)夜析出白色針狀結(jié)晶，為化合物1(40 mg)。洗脫組分7經(jīng)三氯甲烷-甲醇(9∶1)制備薄層色譜，得化合物2(60 mg)。洗脫組分8經(jīng)三氯甲烷-甲醇(10∶1)進(jìn)一步硅膠柱色譜，收集含主要成分的洗脫液，濃縮，再經(jīng)反相硅膠柱色譜，甲醇-水(55∶45)洗脫，濃縮得化合物3(200 mg)和4(400 mg)。洗脫組分8以三氯甲烷-甲醇(9∶1)進(jìn)一步經(jīng)硅膠柱色譜，洗脫濃縮物經(jīng)反相硅膠柱色譜，65%甲醇水溶液洗脫，得化合物5(20 mg)和6(30 mg)。洗脫組分9經(jīng)凝膠柱色譜純化后，再經(jīng)反相硅膠柱色譜制備純化，得化合物7(25 mg)。取50 g丙酮萃取物，100～200目硅膠150 g拌樣，環(huán)己烷-丙酮梯度洗脫，分得7個(gè)組分，其中組分2經(jīng)三氯甲烷-甲醇(7∶1)制備薄層色譜，然后經(jīng)反相硅膠柱色譜純化，得化合物8(13 mg)。

3 結(jié)構(gòu)鑒定

化合物1：針狀結(jié)晶(環(huán)己烷-乙酸乙酯)，mp 125～126 ℃。1H-NMR(400 MHz，CDCl3)δ：6.85(1H，s，H-2)，6.79(1H，dd，J=1.24 Hz，J=8.0 Hz，H-6)，6.90(1H，d，J=8.0 Hz，H-5)，5.95(2H，s，H-10)，4.64(1H，d，J=4.04 Hz，H-7)，4.13(1H，m，H-9)，3.75(1H，dd，J=3.32 Hz，J=9.08 Hz，H-9)，2.99(1H，q，J=4.24 Hz，J=1.92 Hz，H-8)；13C-NMR(100 MHz，CDCl3)δ：147.9(C-4)，147.1(C-3)，135.0(C-1)，119.3(C-6)，108.2(C-5)，106.5(C-2)，101.1(C-10)，85.8(C-7)，71.7(C-9)，54.3(C-8)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道基本一致[5]，故鑒定化合物1為芝麻脂素，為首次從瑞香料植物中分離得到。

化合物2：淡黃色棱狀結(jié)晶(三氯甲烷-甲醇)。mp 169～170 ℃。三氯化鐵-鐵氰化鉀反應(yīng)陽(yáng)性。ESI-MS m/z：419[M+H]+。1H-NMR(400 MHz，DMSO-d6)δ：8.27(1H，br s，-OH)，6.60(2H，s，H-2，H-6)，4.61(1H，d，J=3.84 Hz，H-7)，4.16(1H，m，H-9)，3.77(1H，d，J=3.36 Hz，H-9)，3.05(1H，d，J=2 Hz，H-8)，3.75(6H，s，2×-OCH3)；13C-NMR(100 MHz，DMSO-d6)δ：147.1(C-4)，134.8(C-3)，131.4(C-1)，103.6(C-2，6)，85.3(C-7)，71.1(C-9)，53.7(C-8)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道基本一致[6]，故鑒定化合物2為紫丁香樹(shù)脂酚。

化合物3：白色粉末(甲醇-水)，mp 120～121 ℃，三氯化鐵反應(yīng)呈陽(yáng)性，3%硫酸乙醇顯色，顯棕色。1H-NMR(400 MHz，DMSO-d6)δ：8.8(1H，br s，4′-OH)，8.7(1H，br s，3-OH)，6.82(1H，d，J=1.48 Hz，6′-H)，6.74(1H，d，J=1.48 Hz，2-H)，6.71(1H，dd，J=1.48 Hz，J=8.04 Hz，2′-H)，6.68(1H，d，J=8.12 Hz，3′-H)，6.69(1H，d，J=8.04 Hz，5-H)，6.56(1H，dd，J=1.48 Hz，J=8.04Hz，6-H)，4.68(1H，br s，9′-OH)，4.65(1H，d，J=6.24 Hz，H-7′)，3.88(1H，dd，J=7.8，7.6 Hz，H-9′)，3.74(6H，s，2×-OCH3)，3.68(1H，m，H-9)，3.57(1H，dd，J=7.96 Hz，J=6.8 Hz，H-9′)，3.48(1H，m，H-9)，2.84(1H，dd，J=4.6 Hz，J=13.4 Hz，H-7)，2.58(1H，m，H-8)，2.44(1H，dd，J=12.8 Hz，J=13.4 Hz，H-7)，2.20(1H，m，H-8′)；13C-NMR(DMSO-d6，100 MHz)δ：147.4(C-3′)，147.3(C-3)，145.5(C-4′)，144.5(C-4)，134.7(C-1′)，131.7(C-1)，120.6(C-6)，118.1(C-6′)，115.4(C-5′)，115.0(C-5)，112.7(C-2)，109.9(C-2′)，81.7(C-7′)，71.8(C-9)，58.6(C-9′)，55.5(2×-OCH3)，52.4(C-8′)，41.9(C-8′)，32.1(C-7)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道基本一致[7]，故確定化合物3為落葉松脂醇。

化合物4：白色油狀物，三氯化鐵-鐵氰化鉀反應(yīng)陽(yáng)性。1H-NMR(400 MHz，DMSO-d6)δ：6.89(1H，d，J=1.24 Hz，H-2)，6.79(1H，dd，J=1.24 Hz，J=8.04 Hz，H-6)，6.90(1H，d，J=8.04 Hz，H-5)，4.60(1H，d，J=3.88 Hz，H-7)，4.12(1H，dd，J=8.6，6.8 Hz，H-9)，3.72(1H，dd，J=8.8，3.2 Hz，H-9)，3.03(1H，m，H-8)，3.76(3H，s，-OCH3)；13C-NMR(DMSO-d6，100 MHz)δ：147.5(C-3)，145.9(C-4)，132.2(C-1)，118.6(C-6)，115.1(C-5)，110.3(C-2)，85.1(C-7)，70.9(C-9)，55.5(-OCH3)，53.6(C-8)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道一致[8]，故鑒定化合物4為左旋松脂醇。

化合物5：白色粉末(甲醇-水)，三氯化鐵-鐵氰化鉀反應(yīng)陽(yáng)性，3%硫酸-乙醇顯色，顯棕色。1H-NMR(400 MHz，DMSO-d6)δ：8.85(1H，br s，4-OH)，8.76(1H，br s，4′-OH)，6.73(1H，d，J=1.6 Hz，2-H)，6.68(1H，d，J=8.0 Hz，5-H)，6.66(1H，d，J=1.7 Hz，5′-H)，6.64(1H，d，J=7.92 Hz，2′-H)，6.59(1H，dd，J=1.68 Hz，J=8.0 Hz，6-H)，6.50(1H，dd，J=1.7 Hz，J=7.92 Hz，6′-H)，6.21(1H，s，8′-OH)，3.95(1H，d，J=8.72 Hz，9-H)，3.92(1H，d，J=8.72 Hz，9-H)，3.72(3H，s，-OCH3)，3.69(3H，s，-OCH3)，2.99(1H，d，J=13.52 Hz，7-H)，2.82(1H，d，J=13.52 Hz，7-H)，2.60(1H，dd，J=2.6 Hz，J=11.96 Hz，7′-H)，2.40(1H，dd，J=9.68 Hz，J=12.89 Hz，7′-H)，2.33(1H，m，8-H)；13C-NMR(100 MHz，DMSO-d6)δ：178.0(C-9)，147.5(C-4′)，147.2(C-4)，145.3(C-3′)，144.8(C-3)，130.0(C-1′)，126.5(C-1)，122.7(C-6)，120.7(C-6′)，115.4(C-5′)，115.2(C-5)，114.4(C-2)，112.7(C-2′)，75.4(C-8)，70.0(C-9)，55.5(-OCH3)，55.4(-OCH3)，42.8(C-8′)，40.1(C-7)，30.7(C-7′)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道基本一致[9]，故鑒定化合物5為蕘花酚，為首次從瑞香料植物中分離得到。。

化合物6：白色粉末(甲醇-水)，三氯化鐵反應(yīng)呈陽(yáng)性。1H-NMR(400 MHz，DMSO-d6)δ：9.02(1H，br s，4′-OH)，6.92(1H，d，J=1.3 Hz，H-2′)，6.78(1H，dd，J=1.4 Hz，J=8.1 Hz，H-6′)，6.75(1H，d，J= 8.1 Hz，H-5′)，4.63(1H，d，J=6.4 Hz，H-6)，4.48(1H，dd，J=6.9 Hz，J=9.4 Hz，H-4a)，4.32(1H，dd，J=9.4 Hz，J=9.4 Hz，H-4b)，4.20(1H，t，J=8.6 Hz，J=8.6 Hz，H-8a)，3.93(1H，dd，J= 3.3 Hz，J=9.0 Hz，H-8b)，3.76(1H，s，-OCH3)，3.60(1H，ddd，J=8.6 Hz，J=8.6 Hz，J=3.2 Hz，H-1)，3.14(1H，q，J=8.5 Hz，J=6.76 Hz，H-5)。13C-NMR(100 MHz，DMSO-d6)δ：178.8(C-2)，147.6(C-3′)，146.3(C-4′)，130.8(C-1′)，118.8(C-6′)，115.2(C-5′)，110.4(C-2′)，85.6(C-6)，70.2(C-8)，69.4(C-4)，55.6(C-3′-OCH3)，47.5(C-1)，45.9(C-5)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道一致[10]，故鑒定化合物6為salicifoliol，為首次從瑞香料植物中分離得到。

化合物7：淡黃色粉末(三氯甲烷-甲醇)，mp 96～97 ℃，三氯化鐵-鐵氰化鉀反應(yīng)陽(yáng)性，3%硫酸-乙醇顯色，顯橘紅色。1H-NMR(400 MHz，DMSO-d6)δ：8.93(2H，br s，4-OH，4′-OH)，7.57(1H，dd，J=1.8 Hz，J=8.3 Hz，H-6′)，7.52(1H，d，J=1.8 Hz，H-2′)，6.92(1H，d，J=1.5 Hz，H-2)，6.89(1H，d，J=8.24 Hz，H-5′)，6.77(1H，dd，J=1.6 Hz，J=8.16 Hz，H-6)，6.72(1H，d，J=8.04 Hz，H-5)，4.86(1H，br s，9′-OH)，4.54(1H，d，J=8.24 Hz，H-7′)，4.16(1H，m，H-8′)，4.10(1H，dd，J=16.6 Hz，J=8.24 Hz，H-9′)，3.83(3H，s，-OCH3)，3.76(3H，s，-OCH3)，3.46(2H，t，J=4.08 Hz，J=9.04 Hz，H-9)，2.52(1H，m，H-8)；13C-NMR(100 MHz，DMSO-d6)δ：197.6(C-7)，151.8(C-4)，147.6(C-3)，147.4(C-4′)，145.9(C-3′)，132.5(C-1′)，128.1(C-1)，123.4(C-6)，119.1(C-6′)，115.1(C-5)，115.0(C-5′)，111.6(C-2)，110.7(C-2′)，83.0(C-7′)，70.0(C-9′)，59.7(C-9)，55.6(-OCH3)，55.5(-OCH3)，53.0(C-8′)，48.7(C-8)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道基本一致[11]，故鑒定化合物7為vladinol D，為首次從瑞香料植物中分離得到。

化合物8：白色粉末(三氯甲烷-甲醇)，三氯化鐵-鐵氰化鉀反應(yīng)陽(yáng)性。1H-NMR(DMSO-d6，400 MHz)δ：6.68(1H，d，J=8.00 Hz，H-5)，6.64(1H，d，J=1.6 Hz，H-2)，6.49(1H，dd，J=1.24 Hz，J=8.04 Hz，H-6)，6.60(1H，s，H-2′)，6.10(1H，s，H-5′)，3.70(3H，s，-OCH3)，3.69(3H，s，-OCH3)，3.57(1H，dd，J=6.8 Hz，J=1.88 Hz，H-9′)，3.43(1H，overlapped，H-9)，3.42(1H，overlapped，H-9′)，3.17(1H，d，J=9.6 Hz，H-9)，3.74(1H，d，J=10.8 Hz，H-7)，2.68(2H，m，H-7′)，1.83(1H，m，H-8′)，1.62(1H，m，H-8′)，4.48(1H，br s，-OH)，4.40(1H，br s，-OH)；13C-NMR(100 MHz，DMSO-d6)δ：149.0(C-3)，147.2(C-3′)，146.0(C-4)，145.2(C-4′)，138.6(C-1)，134.2(C-1′)，129.0(C-6)，123.2(C-6′)，117.4(C-5)，116.0(C-5′)，113.8(C-2)，112.4(C-2′)，65.9(C-9)，62.2(C-9′)，48.1(C-7)，48.0(C-8)，35.5(C-8′)，33.1(C-7′)，56.4(-OCH3)，56.3(-OCH3)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道基本一致[12]，故鑒定化合物8為異落葉松酯醇，為首次從芫花枝條中分離得到。

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StudyonLignansfromtheBranchofDaphnegenkwa

XUGuang1，LITianjing2，RUANZheng1，JIANGYongtao1*

(1.ShandongLuyePharmaceuticalCo.，Ltd.，Yantai264003，China；2.SchoolofPharmacy，YantaiUniversity，Yantai264005，China)

Objective：To study lignans from the branch ofDaphnegenkwaSieb.et Zucc.MethodsThe compounds were isolated and repeatedly purified by silica gel，TLC，Sephadex LH-20，and RP-C18column chromatographic methods，and their structures were elucidated on the basis of physic-chemical constants and spectral analysis.ResultsEight compounds were obtained and elucidated as sesamin(1)，syringaresinol(2)，lariciresinol(3)，(-)-pinoresinol(4)，wikstromol(5)，salicifoliol(6)，vladinol D(7)，isolariciresinol(8).ConclusionCompound 8 was isolated from the branch ofDaphnegenkwafor the first time.Compounds1，5，6and7were separated from the Thymelaeaceae for the first time.

DaphnegenkwaSieb.et Zucc.branch ；Lignans

10.13313/j.issn.1673-4890.2014.06.005

2013-11-25)