普萘洛爾治療對(duì)增生性血管瘤患兒血清中VEGF、bFGF、MMP-9的影響

吳杉英 王彪 陳麗芬 黃祖根 黃循鐳 王美水

·論著·

普萘洛爾治療對(duì)增生性血管瘤患兒血清中VEGF、bFGF、MMP-9的影響

吳杉英 王彪 陳麗芬 黃祖根 黃循鐳 王美水

目的觀察口服普萘洛爾治療增生期血管瘤，對(duì)患兒血清中VEGF、bFGF、MMP-9的影響。方法選擇增生期血管瘤患兒40例，口服普萘洛爾治療，抽取服藥前與服藥后8周血液樣本，用Elisa方法檢測(cè)血清中VEGF、bFGF、MMP-9的濃度。結(jié)果服藥8周后血清中VEGF、bFGF、MMP-9的濃度比服藥前明顯降低，存在統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。結(jié)論普萘洛爾治療增生期血管瘤，其作用機(jī)制可能與下調(diào)VEGF、bFGF、MMP-9的表達(dá)有關(guān)。

普萘洛爾嬰幼兒血管瘤血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子基質(zhì)金屬蛋白酶-9

血管瘤是嬰幼兒時(shí)期最常見的良性腫瘤之一，是胚胎期血管形成過程中出現(xiàn)的一種先天性發(fā)育不良，新生兒的發(fā)病率約為1.1%～2.6%[1]，早產(chǎn)兒中較常見，尤其是女性早產(chǎn)兒，通常發(fā)生在患兒的頭部或頸部。根據(jù)血管瘤內(nèi)皮細(xì)胞的生物學(xué)特點(diǎn)及其臨床表現(xiàn)，可將血管瘤的自然病程分為增生期、退化期和退化完成期[2-3]。血管瘤內(nèi)皮細(xì)胞的增生是血管瘤增生期的主要特征[4]，血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子（VEGF）、堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子（bFGF）與血管瘤內(nèi)皮細(xì)胞增殖密切相關(guān)，可用于血管瘤的分期；而基質(zhì)金屬蛋白酶9（MMP-9）可促進(jìn)VEGF、bFGF等的釋放，促進(jìn)血管生長(zhǎng)。本研究觀察普萘洛爾治療增生期嬰幼兒血管瘤后，患兒血清中VEGF、bFGF、MMP-9的表達(dá)水平的變化，以初步揭示其可能的機(jī)制。

1 資料與方法

1.1 資料

選取2009年9月至2012年12月，我科收治的嬰幼兒增生期血管瘤患者40例為研究對(duì)象。納入標(biāo)準(zhǔn)：患兒年齡在1歲以內(nèi)；出生時(shí)或出生后7～10 d出現(xiàn)“蚊咬”狀或針尖樣紅點(diǎn)，或出生時(shí)即為片狀，之后出現(xiàn)斑片擴(kuò)大或出現(xiàn)皮下質(zhì)軟腫物；有迅速生長(zhǎng)病史；腫物表面呈草莓狀或淡藍(lán)色，壓之褪色或縮小?；几]性心動(dòng)過緩、支氣管哮喘、心源性休克、心臟傳導(dǎo)阻滯（Ⅱ～Ⅲ度房室傳導(dǎo)阻滯）、重度或急性心力衰竭等疾病的患兒除外。

1.2 方法

1.2.1 觀察療效

患兒入院后，告知口服普萘洛爾的目的、安全性及相關(guān)風(fēng)險(xiǎn)，并獲患兒家屬書面同意。治療前完善相關(guān)檢查，確認(rèn)無相關(guān)禁忌癥后開始治療。劑量為1.5 mg/Kg·d，每天1次，晨起頓服。3 d后如無明顯異常反應(yīng)，出院繼續(xù)服藥至瘤體消退，期間注意測(cè)量血管瘤大小，觀察血管瘤表面皮膚顏色及張力變化。

1.2.2 收集及檢測(cè)樣本

采集40例患兒服藥前及服藥8周后的血液樣本，每次2 mL（不加抗凝劑），分別裝入試管，在室溫下靜止30 min后，以2 000 r/min離心分離得到血清，吸取血清裝入EP管內(nèi)，-80℃保存待測(cè)。待標(biāo)本收齊后，采用Elisa方法檢測(cè)血清中VEGF、bFGF、MMP-9的濃度。

1.2.3 實(shí)驗(yàn)試劑及耗材

離心機(jī)、天平、EP管、-80℃冰箱、高精度加樣器及槍頭、酶標(biāo)儀（450 nm）、37℃恒溫箱、一次性試管、吸水紙、人VEGF ELISA檢測(cè)試劑盒、人bFGF ELISA檢測(cè)試劑盒、人MMP-9 ELISA檢測(cè)試劑盒。

1.2.4 療效判定標(biāo)準(zhǔn)

以Achauer等[5]的4級(jí)標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行分析判斷（以治療8周時(shí)結(jié)果為準(zhǔn)）。Ⅰ級(jí)（差）：瘤體縮小＜25%；Ⅱ級(jí)（中）：瘤體縮小及皮損顏色消退26%～50%；Ⅲ級(jí)（好）：瘤體及皮損顏色消退51%～75%；Ⅳ級(jí)（優(yōu)）：皮損消退＞75%，瘤體消失及病損皮膚恢復(fù)或接近正常膚色。Ⅱ～Ⅳ為有效，Ⅰ級(jí)為無效。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

采用SPSS17.0軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析。計(jì)數(shù)資料采用卡方檢驗(yàn)，計(jì)量資料采用配對(duì)t檢驗(yàn)，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

8周治療后，本組患兒中優(yōu)11例，好14例，中14例，差1例。服藥8周后，患兒血清中VEGF濃度由（264.18±15.33）pg/mL降至（142.70±18.84）pg/mL；bFGF由（59.41±4.02）pg/mL降至（38.85±5.84）pg/mL、MMP-9濃度由（411.21±28.36）pg/mL降至（279.94± 29.80）pg/mL，均較用藥前明顯下降（P＜0.05）。

3 討論

血管瘤是一種常見疾病，是以血管內(nèi)皮細(xì)胞異常增殖為基礎(chǔ)的良性腫瘤，血管瘤的形成是由血管無節(jié)制地生成或血管生成因子和抑制因子不平衡所造成。VEGF、bFGF、MMP-9在血管瘤的形成過程中發(fā)揮了重要作用。VEGF是一種糖基化分泌性多肽因子，可使內(nèi)皮細(xì)胞增殖和遷移，提高血管的通透性，促進(jìn)新生血管和基質(zhì)細(xì)胞生長(zhǎng)；bFGF是一種強(qiáng)烈的內(nèi)皮細(xì)胞和管壁結(jié)締組織促生長(zhǎng)因子，能夠促進(jìn)內(nèi)皮細(xì)胞遷移進(jìn)入細(xì)胞外基質(zhì)形成毛細(xì)血管組織，而且能誘導(dǎo)VEGF分泌[6]；基質(zhì)金屬蛋白酶（MMP）是一類具有鋅離子及鈣離子依賴性的細(xì)胞外蛋白水解酶，它不僅可促進(jìn)血管生成因子VEGF、bFGF等的釋放，促進(jìn)血管生成，還可降解細(xì)胞外基質(zhì)，促進(jìn)內(nèi)皮細(xì)胞遷移及管狀結(jié)構(gòu)的形成。

血清中VEGF的濃度與血管瘤內(nèi)皮細(xì)胞增殖的相關(guān)性早已被證實(shí)[7-8]，即增生期血管瘤患者血清中VEGF的濃度明顯高于消退期血管瘤、血管畸形及正常對(duì)照組。本研究中，服藥8周后血清中VEGF、bFGF、MMP-9的濃度較服藥前明顯降低，該研究結(jié)果與近年來相關(guān)文獻(xiàn)結(jié)果基本相符[9-10]。隨著這三個(gè)指標(biāo)濃度的下降，血管瘤停止生長(zhǎng)或消退，因此提示普萘洛爾治療增生期血管瘤，其機(jī)制可能與下調(diào)VEGF、bFGF、MMP-9的表達(dá)有關(guān)，但尚待進(jìn)一步明確。有研究發(fā)現(xiàn)，普萘洛爾可能通過抑制cAMP/PKA信號(hào)通路對(duì)ERK/MAPK信號(hào)通路的激活，從而抑制增殖期血管瘤VEGF的分泌[11]。在血管瘤治療后期，普萘洛爾通過下調(diào)Raf/絲裂原激活蛋白激酶（MAPK）通路，減少VEGF和bFGF的表達(dá)，從而促使血管瘤進(jìn)一步消退[12]。相信隨著今后研究的深入，其機(jī)制將更為明確并獲得證實(shí)。

[1]Schwartz RA,Sidor MI,Musumeci ML,et al.Infantile hemangiomas: a challenge in pediatric dermatology[J].J Eur Acad Dermatol Venereol,2010,24(6):631-638.

[2]Jinnin M,Ishihara T,Boye E,et al.Recent progress in studies of infantile hemangioma[J].J Dermatol,2010,37(4):283-298.

[3]Boye E,Olsen BR.Signaling mechanisms in infantile hemangioma [J].Curr Opin Hematol,2009,16(3):202-208.

[4]胡瓊?cè)A,王煒.血管瘤及血管畸形增殖機(jī)制及治療進(jìn)展[J].實(shí)用美容整形外科雜志,2000,11(2):95-98.

[5]Achauer BM,Chang CJ,vander Kam VM.Management of hemangioma of infancy:review of 245 patients[J].Plast Reconstr Surg,1997,99(5):1301-1308.

[6]Folkman J.Clinical application of research on angiogenesis[J].N Engl J Med,1995,333(21):1757-1763.

[7]胡瓊?cè)A,林曉曦,商慶新,等.血管瘤病人血清中VEGF的定量檢測(cè)及意義[J].中華整形外科雜志,2002,18(2):98-100.[8]張莉,林曉曦,王煒,等.血清血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子在血管瘤診斷與治療中的應(yīng)用[J].中華小兒外科雜志,2004,25(1):11-12.

[9]趙忠芳,呂仁榮,霍然,等.口服普萘洛爾治療血管瘤患者bFGF的變化[J].中國(guó)美容整形外科雜志,2011,22(8):504-507.

[10]趙忠芳,呂仁榮,霍然,等.普萘洛爾治療增生期血管瘤患兒血清中血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子及基質(zhì)金屬蛋白酶-9的變化[J].中華整形外科雜志,2011,27(5):359-361.

[11]劉大旭.普萘洛爾治療嬰幼兒增殖期血管瘤的實(shí)驗(yàn)研究[D].瀘州:瀘州醫(yī)學(xué)院,2012.

[12]Gelmetti C,Frasin A,Restano L.Innovative therapeutics in pediatric dermatology[J].Dermatol Clin,2010,28(3):619-629.

The Influence of Propranolol on VEGF,bFGF,MMP-9 in Serum Samples in the Treatment Proliferative Hemangioma

ObjectiveTo investigate the influence of propranolol on VEGF,bFGF and MMP-9 in serum samples in the treatment of proliferative hemangioma.MethodsForty children with proliferative hemangioma were enrolled and treated with propranolol.The VEGF,bFGF and MMP-9 in serum samples were detected with ELISA assay before and 8 weeks after propranolol treatment.ResultsAfter 8 weeks of treatment,the concentration levels of VEGF,bFGF and MMP-9 in serum were obviously decreased,and the differences were significant.ConclusionThe decrease on the expression of VEGF,bFGF and MMP-9 may play an important role in the treatment of proliferative hemangioma.

Propranolol;Infantile hemangioma;Vascular endothelial growth factor;Basic fibroblast growth factor; Matrix metalloproteinase-9

R732.2

A

1673－0364（2014）04－0181－03

WU Shanying,WANG Biao,CHEN Lifen,HUANG Zugen,HUANG Xunlei,WANG Meishui.
Department of Plastic Surgery, the First Affiliated Hospital of Fujian Medical University,Fuzhou 350001,China.Corresponding author:Wang Biao(E-mail: wangbiao123@tom.com).

福建省教育廳B類科技計(jì)劃項(xiàng)目（JB11055）；國(guó)家臨床重點(diǎn)?？平ㄔO(shè)項(xiàng)目。

350001福建省福州市福建醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院整形外科。

王彪（E-mail：wangbiao123@tom.com）。

2014年5月12日；

2014年6月20日）

10.3969/j.issn.1673-0364.2014.04.001