木耳屬4個野生菌株的培養(yǎng)特性研究*

王 敬，姚方杰，王小娥，方 明，陳 影

(吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)園藝學(xué)院，食藥用菌教育部工程研究中心，吉林 長春 130118)

〈育種與馴化〉

木耳屬4個野生菌株的培養(yǎng)特性研究*

王 敬，姚方杰，王小娥，方 明，陳 影

(吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)園藝學(xué)院，食藥用菌教育部工程研究中心，吉林 長春 130118)

通過研究不同營養(yǎng)和環(huán)境條件對木耳屬4個主要種類的野生菌株生長速率和生長勢等培養(yǎng)特性的影響，明確了黑木耳、毛木耳、皺木耳、紫木耳菌絲生長的最適溫度范圍以及最佳碳源和氮源。

木耳屬；培養(yǎng)特性；碳源；氮源；最適溫度

木耳屬AuriculariaBull.ex Mérat，屬于真菌門、擔(dān)子菌亞門、層菌綱、有隔擔(dān)子亞綱、木耳目、木耳科。婁隆后、朱慧真等提出我國木耳屬共14個種類，其中以黑木耳和毛木耳是栽培地區(qū)最為廣泛、產(chǎn)量最高的種類[1-3]。近年來研究發(fā)現(xiàn)，皺木耳和紫木耳的食用價值和可栽培性也具有很大潛力，市場反應(yīng)較好[4-6]。但是，關(guān)于木耳屬4個主要種類培養(yǎng)特性的比較研究尚未見報道。本文研究了木耳屬4個主要種類野生菌株培養(yǎng)的適宜營養(yǎng)源和溫度條件，旨在為木耳屬的進(jìn)一步馴化栽培和遺傳育種研究提供科學(xué)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

1.1.1 供試菌株

由云南省農(nóng)業(yè)科學(xué)院提供，保存于吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)園藝學(xué)院國家食用菌產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系黑木耳育種崗位研究室，研究室已經(jīng)通過出耳試驗(yàn)證明了供試菌株種類的準(zhǔn)確性。供試菌株情況見表1。

1.1.2 碳源利用培養(yǎng)基

碳源分別為葡萄糖、蔗糖、乳糖、糊精和甘露醇，詳見文獻(xiàn)[7，8]。

1.1.3 氮源利用培養(yǎng)基

氮源分別為蛋白胨、酵母浸粉、牛肉膏和硝酸銨，詳見文獻(xiàn)[7-9]。

1.2 試驗(yàn)方法

1.2.1 溫度參數(shù)

用直徑7 mm的打孔器將活化好的菌種接種于直徑9 cm的PDA平板培養(yǎng)基中，共設(shè)15℃、20℃、25℃、30℃、35℃等5個溫度處理，每個處理設(shè)5次重復(fù)。接種后待菌種開始萌發(fā)后測量，待菌絲將要長滿平板時結(jié)束測量。

1.2.2 碳源參數(shù)

以碳源利用培養(yǎng)基為基礎(chǔ)培養(yǎng)基，將所使用的碳源設(shè)5個處理，每個處理5次重復(fù)。置于25℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，接種后待菌種開始萌發(fā)后測量，待菌絲將要長滿平板時結(jié)束測量。

1.2.3 氮源參數(shù)

以氮源利用培養(yǎng)基為基礎(chǔ)培養(yǎng)基，將所使用的碳源設(shè)4個處理，每個處理5次重復(fù)。置于25℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，接種后待菌種開始萌發(fā)后測量，待菌絲將要長滿平板時結(jié)束測量。

2 結(jié)果與分析

2.1 木耳屬不同菌株的適宜溫度

不同溫度對木耳屬野生菌株菌絲生長的影響見圖1。

2.2 木耳屬不同菌株的適宜碳源

木耳屬4個主要種類野生菌株的生長速率和生長勢因碳源不同而呈現(xiàn)較大差異，結(jié)果見表2、圖2。

注：+++為菌絲粗壯、濃密，菌落潔白；++為菌絲較粗壯、較濃密，菌落潔白；+為菌絲稀疏、纖細(xì)，菌落灰白色。

結(jié)合生長速率和生長勢來看，皺木耳最適宜碳源為蔗糖，葡萄糖次之，糊精效果最差；黑木耳最適宜碳源為蔗糖，葡萄糖次之，乳糖效果最差；毛木耳以蔗糖培養(yǎng)基上的生長速率最快，但以葡萄糖培養(yǎng)基上的生長勢最佳；紫木耳最適宜碳源為乳糖，葡萄糖次之。

2.3 木耳屬不同菌株的適宜氮源

不同氮源對木耳屬野生菌株菌絲生長勢的影響見表3、圖3。

注：+++為菌絲粗壯、濃密，菌落潔白；++為菌絲較粗壯、較濃密，菌落潔白；+為菌絲稀疏、纖細(xì)，菌落灰白色。

由表3和圖3可以看出，木耳屬4個主要種類的野生菌株生長速率和生長勢因氮源不同而存在較大差異。綜合生長速率與生長勢來分析，皺木耳最佳氮源為牛肉膏，但在蛋白胨培養(yǎng)基上生長速率最快；黑木耳最佳氮源為酵母浸粉，蛋白胨次之；毛木耳的最佳氮源是牛肉膏，酵母浸粉次之；紫木耳的最佳氮源為蛋白胨。硝酸銨為氮源時，所有菌株的生長速率和生長勢均最差。

3 討論

3.1 木耳屬適宜生長溫度

本試驗(yàn)結(jié)果表明，木耳屬4個主要種類的野生菌株對溫度、碳源、氮源的要求不同。在溫度試驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)，4個種的野生菌株菌絲生長的最適溫度除黑木耳為30℃外，其它均為25℃，而且35℃條件下仍能緩慢生長。溫亞麗[10]研究認(rèn)為，黑木耳在生長溫度15℃～32℃均可生長，最適生長溫度為25℃～28℃，差異的產(chǎn)生，可能是供試菌株不同造成的。

葉叢永、葉錦蕊等[11]報道毛木耳菌絲生長溫度范圍8℃～32℃，其中以22℃～25℃為最適，溫亞麗也認(rèn)為毛木耳菌絲生長最適溫度為25℃～32℃，這些與本研究結(jié)果基本一致。張志光、張曉云等[12]認(rèn)為紫木耳菌絲在溫度20℃～32℃可以極為正常的生長，在26℃～27℃達(dá)到最大值，這與本研究結(jié)果基本相符。

另外，本研究中黑木耳、皺木耳和紫木耳在15℃時菌絲不生長，可能是因?yàn)橐吧甑木z活力差或菌絲生長極其緩慢不容易被觀察到造成的。要確定黑木耳種類的適宜生長溫度條件還需采用更多的野生、栽培菌株開展研究。

3.2 木耳屬最佳碳源

本試驗(yàn)研究表明，皺木耳和黑木耳菌絲生長的最佳利用碳源是蔗糖，葡萄糖次之，但李玉梅、姜云天等[13]認(rèn)為黑木耳菌種液體培養(yǎng)的最佳碳源為葡萄糖；毛木耳在葡萄糖培養(yǎng)基上生長勢好，在蔗糖培養(yǎng)基上速率是最快，王謙、尹紅芳等[14]的研究結(jié)果也認(rèn)為葡萄糖是毛木耳菌絲生長的最佳碳源。紫木耳菌絲生長的最佳利用碳源是乳糖。關(guān)于紫木耳和皺木耳在碳源利用方面的研究還未見報道。

3.3 木耳屬最佳氮源

在氮源試驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)，皺木耳和毛木耳的最佳利用氮源是牛肉膏，黑木耳的最佳利用氮源則是酵母浸粉，紫木耳的最佳利用氮源是蛋白胨，4個種利用最差的氮源是硝酸銨。矯天育[15]認(rèn)為在黑木耳搖瓶培養(yǎng)營養(yǎng)篩選中，以酵母膏促進(jìn)菌絲生長方面最佳；暴增海、何瀅等[16]的研究成果也認(rèn)為牛肉膏在毛木耳菌絲體的生長方面促進(jìn)作用最大，其次是酵母膏、蛋白胨，效果最差的是硝酸銨，這與本研究結(jié)果相符。關(guān)于紫木耳和皺木耳在氮源利用方面的研究還未見報道。

4 結(jié)論

本文明確了木耳屬4個種野生菌株對溫度、碳源、氮源的不同要求。在15℃～35℃的溫度條件下，菌絲生長速率差異較大，皺木耳在15℃生長極其緩慢，其它3個種甚至停止生長，35℃條件下仍能緩慢生長；最適溫度除黑木耳為30℃外，其它均為25℃。

皺木耳和黑木耳菌絲生長的最佳利用碳源是蔗糖，葡萄糖次之；紫木耳菌絲生長的最佳利用碳源是乳糖；毛木耳在葡萄糖培養(yǎng)基上生長勢好，但是在蔗糖培養(yǎng)基上生長速率最快。

皺木耳和毛木耳的最佳利用氮源是牛肉膏，黑木耳的最佳利用氮源則是酵母浸粉，紫木耳的最佳利用氮源是蛋白胨，4個種利用最差的氮源是硝酸銨。

其中，關(guān)于紫木耳和皺木耳的碳源和氮源利用方面的培養(yǎng)條件還未見報道。今后將對這4個供試菌株開展進(jìn)一步的液體培養(yǎng)、馴化栽培及遺傳育種研究。

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Study on Cultivation Characteristics of Four Wild Species ofAuriculariaBull.ex Mérat

WANG Jing， YAO Fang-jie， WANG Xiao-e， FANG Ming， CHEN Ying

(College of Horticulture, Engineer Research Center of Edible and Medical Mushroom of Education Ministry, Jilin Agricultural University, ChangchunJilin130118)

By studying the influence of different nutrition and environmental conditions on the cultural characteristics including growth rate and growth potential of four main wild species ofAuriculariaBull.ex Mérat, the optimum temperature, the best carbon resource and nitrogen resource on the mycelium growth ofAuriculariaauricular,A.polytricha,Auriculariasp. andA.delicatewere obtained.

AuriculariaBull.ex Mérat; Cultivation characteristic; Carbon resource; Nitrogen resource; Optimum temperature

*項(xiàng)目來源：國家現(xiàn)代產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系(CARS-24)。

王敬(1986-)，女，在讀碩士研究生，現(xiàn)主要從事食用菌形態(tài)結(jié)構(gòu)的研究工作。

**通信作者： 姚方杰，女，教授，現(xiàn)主要從事設(shè)施園藝調(diào)控及食用菌工程學(xué)研究。E-mail: yaofj@yahoo.com.cn

2014-01-26

S646.6

A

1003-8310(2014)02-0000-00