補(bǔ)陽(yáng)還五湯和腰交感神經(jīng)節(jié)切除對(duì)大鼠坐骨神經(jīng)損傷的影響

劉青龍，秦振龍，王繡伯

1.河北省唐山市中醫(yī)醫(yī)院外科（唐山063000）

2.北京中醫(yī)藥大學(xué)附屬醫(yī)院東方醫(yī)院麻醉科（北京100078）

3.中國(guó)航天科技集團(tuán)公司第五研究院502研究所第五研究院門診部?jī)?nèi)科（北京100190）

周圍神經(jīng)損傷后，結(jié)構(gòu)和功能恢復(fù)與神經(jīng)再生的微環(huán)境密切相關(guān)。物理和藥物療法，可以通過(guò)改變神經(jīng)再生的微環(huán)境，促進(jìn)非離斷性周圍神經(jīng)損傷的恢復(fù)[1]。本研究所觀察腰交感神經(jīng)節(jié)切除術(shù)（lumbar sympathetic ganglionectomy，LSG）原主要用于治療下肢缺血性疾病，但是它的創(chuàng)傷大，起效慢，有較多的手術(shù)并發(fā)癥?，F(xiàn)配合補(bǔ)陽(yáng)還五湯口服加藥浴，觀察此聯(lián)合治療對(duì)大鼠坐骨神經(jīng)損傷再生影響。

1 材料與方法

1.1 動(dòng)物 60只SD大鼠，編為1～60號(hào)。由河北醫(yī)科大學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心提供，動(dòng)物合格證號(hào)1105033。

1.2 試劑及儀器

1.2.1 試劑 50%戊二醛，天津天泰精細(xì)化學(xué)品有限公司進(jìn)口（配成3%溶液使用），水合氯醛，華北制藥（配成10%溶液使用）。

1.2.2 儀器設(shè)備 肌電誘發(fā)電位儀，德國(guó)Easote Phasis型。顯微鏡及照相機(jī)，日本Olympus20型。手術(shù)器械，上海手術(shù)器械廠。紅外線測(cè)溫儀，上海華興精密儀器總廠。電子天平，上海華興精密儀器總廠。

1.3 藥品 補(bǔ)陽(yáng)還五湯組成：黃芪120 g（生），當(dāng)歸尾6 g，赤芍5 g，地龍3 g，川芎3 g，紅花3 g，桃仁3 g。每劑水煎2次，每次200 mL，混合備用。

1.4 模型制備與分組 60只SD大鼠用10%水合氯醛3 mL/kg腹腔內(nèi)注射麻醉，股部剪毛，在無(wú)菌操作下暴露左側(cè)坐骨神經(jīng)，在脛神經(jīng)與腓總神經(jīng)分叉的上方約2 cm處，用止血鉗將坐骨神經(jīng)長(zhǎng)約2 mm鉗壓1 min（鉗壓強(qiáng)度：鉗子的第二扣），造成Seddon II類損傷[2]：即軸索離斷，外膜仍較完整，暴露并切除位于左腎動(dòng)脈下的L2～L5腰交感神經(jīng)節(jié)。隨機(jī)分為對(duì)照組和實(shí)驗(yàn)組各30只，對(duì)照組只行LSGT，實(shí)驗(yàn)組除LSGT外，加補(bǔ)陽(yáng)還五湯口服，2次/d，每次5 mL。傷口完全愈合后，每天進(jìn)行2次、每次10 min的藥浴。

1.5 測(cè)定指標(biāo)及方法

1.5.1 左后足部皮膚溫度 手術(shù)前用記號(hào)筆標(biāo)記兩組大鼠左后足同一部位，大鼠清醒時(shí)用測(cè)溫儀測(cè)量皮膚溫度。在手術(shù)后1、2周在標(biāo)記點(diǎn)再次測(cè)量。兩次測(cè)量方法和環(huán)境溫度、濕度等恒定。

1.5.2 坐骨神經(jīng)功能指數(shù) 在2、4、6周時(shí)，從每組隨機(jī)抽取10只大鼠進(jìn)行坐骨神經(jīng)功能指數(shù)（SFI）測(cè)量。選取每側(cè)3或4個(gè)足印，選實(shí)驗(yàn)側(cè)足(E)、正常側(cè)足(N)的足印，測(cè)量3個(gè)變量。均精確到mm，取其最大值。PL（print length）:足印的最長(zhǎng)距離，即從足跟到足尖。TS（distance between first and fifth toes or total spreading）:第1趾到第5趾連線距離。⑶IT（distance between intermediary toes）:第2趾到第4趾連線距離。將上述3個(gè)變量帶入Bain公式計(jì)算出SFI[3]。

坐骨神經(jīng)功能指數(shù)(SFI)=0為正常，-100為完全損傷

1.5.3 坐骨神經(jīng)傳導(dǎo)速度 手術(shù)完成第2、4、6周，從實(shí)驗(yàn)組、對(duì)照組取10只大鼠，用肌電誘發(fā)電位儀測(cè)定坐骨神經(jīng)傳導(dǎo)速度（sciatic nerve conduction velocity，SNCV）。用自制鉑金絲做刺激電極和引導(dǎo)電極，兩端的距離定為25 mm。暴露并游離坐骨神經(jīng)。刺激電極放置于損傷神經(jīng)近心端0.4 cm處，引導(dǎo)電極置于損傷神經(jīng)遠(yuǎn)心端。測(cè)量方法、環(huán)境溫度及濕度均保持恒定。

1.6 統(tǒng)計(jì)方法 所有數(shù)據(jù)以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(±s)表示,采用SPSS 18.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理,組間采用完全隨機(jī)設(shè)計(jì)單因素方差分析,以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 左后足部皮膚溫度 兩組間左后足部皮膚溫度，在實(shí)驗(yàn)前比較無(wú)顯著性差異（P＞0.05）。在第1、2周，兩組間比較實(shí)驗(yàn)組皮膚溫度較對(duì)照組有明顯升高（P＜0.01）。見(jiàn)表1。

表1 兩組大鼠不同時(shí)間點(diǎn)左后足的皮膚溫度比較（℃±s，n=10)

表1 兩組大鼠不同時(shí)間點(diǎn)左后足的皮膚溫度比較（℃±s，n=10)

注：與對(duì)照組比較，a P＜0.01

組別實(shí)驗(yàn)組對(duì)照組實(shí)驗(yàn)前31.02±0.12 31.04±0.11術(shù)后1周31.90±0.13a 31.05±0.10術(shù)后2周31.88±0.17℃a 31.55±0.12℃

2.2 坐骨神經(jīng)功能指數(shù) 術(shù)后第2、4、6周，實(shí)驗(yàn)組坐骨神經(jīng)功能指數(shù)均明顯優(yōu)于對(duì)照組且有顯著性差異（P＜0.01）。見(jiàn)表2。

表2 兩組大鼠手術(shù)后不同時(shí)間點(diǎn)SFT變化(±s，n=10)

表2 兩組大鼠手術(shù)后不同時(shí)間點(diǎn)SFT變化(±s，n=10)

注：與對(duì)照組比較,a P＜0.01

組別實(shí)驗(yàn)組對(duì)照組2周-86.56±1.37a-76.30±1.81 4周-56.45±2.67a-38.21±2.81 6周-35.79±3.01a-17.12±3.27

2.3 坐骨神經(jīng)傳導(dǎo)速度 術(shù)后第2、4、6周時(shí)，實(shí)驗(yàn)組的坐骨神經(jīng)傳導(dǎo)速度顯著快于對(duì)照組，有顯著性差異（P＜0.01）。見(jiàn)表3。

表3 大鼠手術(shù)后不同時(shí)間點(diǎn)SNCV比較（m/s，±s，n=10)

表3 大鼠手術(shù)后不同時(shí)間點(diǎn)SNCV比較（m/s，±s，n=10)

注：與對(duì)照組比較,a P＜0.01

組別實(shí)驗(yàn)組對(duì)照組2周14.22±1.95a 8.54±2.11 4周27.52±2.67a 16.66±2.75 6周33.25±3.35a 21.19±3.27

3 討論

周圍神經(jīng)損傷的恢復(fù)直接影響著患者的生活質(zhì)量。以前治療主要是LSG，因?yàn)長(zhǎng)SG后能擴(kuò)張下肢血管，從而降低血管阻力，加速下肢的血液循環(huán)[4]。LSG手術(shù)簡(jiǎn)單，但要求術(shù)者手術(shù)技術(shù)高，且術(shù)后并發(fā)癥較多，存在一定的風(fēng)險(xiǎn)[5]。

坐骨神經(jīng)損傷相當(dāng)于中醫(yī)的經(jīng)絡(luò)受損，氣血阻滯，久病正氣虧虛,故治療提倡補(bǔ)氣、活血、通絡(luò)并行。補(bǔ)陽(yáng)還五湯主要用于治療中風(fēng)后遺癥，本研究用于治療坐骨神經(jīng)損傷，是因?yàn)榭紤]坐骨神經(jīng)損傷的病因病機(jī)是正氣不足，氣血凝滯。補(bǔ)陽(yáng)還五湯中用黃芪以補(bǔ)氣，正氣存內(nèi)，邪不可干，正氣充足則邪自除。氣為血之母，氣行則血行，血行瘀自散。桃仁、紅花、赤芍、當(dāng)歸、川芎養(yǎng)血，活血化瘀，舒筋通絡(luò)，消瘀散結(jié)。地龍專入經(jīng)絡(luò)，活血化瘀通絡(luò)。補(bǔ)陽(yáng)還五湯不但具有補(bǔ)氣養(yǎng)血功效，而且還有很好的宣通散結(jié)止痛的功效[6]。主要治療痹證，切中本病氣血不足、氣血凝滯這一病因病機(jī)，實(shí)為標(biāo)本兼治。補(bǔ)陽(yáng)還五湯藥浴，可以明顯改善損傷神經(jīng)處的微循環(huán)。

本實(shí)驗(yàn)應(yīng)用手術(shù)方法，使大鼠的坐骨神經(jīng)產(chǎn)生人為損傷，通過(guò)觀察坐骨神經(jīng)功能指數(shù)、左后足部皮膚溫度、坐骨神經(jīng)傳導(dǎo)速度，推斷坐骨神經(jīng)損傷的恢復(fù)情況。緣SFI是大鼠后肢伸屈踝、趾諸肌功能協(xié)調(diào)程度的表現(xiàn)，是判斷坐骨神經(jīng)再生及功能恢復(fù)的可靠方法，是全部指標(biāo)的綜合反映。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，實(shí)驗(yàn)組、對(duì)照組的SFI隨實(shí)驗(yàn)的進(jìn)行都有顯著提高，但二組之間有顯著性差異，實(shí)驗(yàn)組數(shù)據(jù)明顯好于對(duì)照組（P＜0.01）。實(shí)驗(yàn)組內(nèi)部各時(shí)間段間的SFI也有顯著性差異（P＜0.01）。這說(shuō)明補(bǔ)陽(yáng)還五湯口服加藥浴并LSG，有助于大鼠受損坐骨神經(jīng)的再生和功能恢復(fù)。

補(bǔ)陽(yáng)還五湯口服加藥浴并LSG，可以有效地緩解血管平滑肌痙攣，使小的動(dòng)、靜脈擴(kuò)張。同時(shí)也可以使局部的毛細(xì)血管括約肌擴(kuò)張，明顯降低小血管的張力，明顯改善受損神經(jīng)的微循環(huán)，增加血流，增加神經(jīng)的營(yíng)養(yǎng)，減輕神經(jīng)水腫。因?yàn)樯窠?jīng)再生微環(huán)境中的吞噬細(xì)胞是血源性的，而吞噬細(xì)胞在瓦勒式變性過(guò)程中的作用非常重要，可以加速完成瓦勒式變性過(guò)程，從而提供了神經(jīng)軸突再生的通路，加速了再生軸突的推進(jìn)。加速的血液循環(huán)還能刺激細(xì)胞中的氧化還原酶分子，使其增強(qiáng)氧利用能力和各種代謝、合成，進(jìn)而促進(jìn)新陳代謝，及時(shí)清除代謝產(chǎn)物，快速減輕炎癥反應(yīng)，可以把神經(jīng)缺血性損傷的程度減到最低程度。豐富的血流為雪旺細(xì)胞帶來(lái)了更多養(yǎng)分，促進(jìn)雪旺細(xì)胞大量增殖，從而可以分泌更多的神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子NTFs，為神經(jīng)再生和修復(fù)提供了充足的物質(zhì)條件。使軸突逐漸恢復(fù)其連續(xù)性，電荷的損耗明顯減少，使其傳導(dǎo)恢復(fù)其跳躍性，結(jié)間距快速變長(zhǎng)，使SFI和SNCV逐漸恢復(fù)。補(bǔ)陽(yáng)還五湯在治療周圍神經(jīng)損傷方面的機(jī)制雖然尚未完全闡明,但應(yīng)考慮與其補(bǔ)氣活血通絡(luò)的作用有關(guān)。所以有理由認(rèn)為補(bǔ)陽(yáng)還五湯口服加藥浴并腰交感神經(jīng)節(jié)切除，可以明顯加速坐骨神經(jīng)損傷后功能的恢復(fù)。

[1]Myckatyn TM,Brenner M,Mackinnon SE,et al.Effects of External Beam Radiation in the Rat Tibial Nerve after Crush,Transection and Repair,or Nerve Isograft Paradigms[J].Laryngoscope,2004,114(5):931-938.

[2]李育浩,吳清和,溫素萍,等.絡(luò)通片對(duì)大鼠坐骨神經(jīng)損傷的影響[J].中國(guó)新藥與臨床藥理,1994,5(3):31-34.

[3]Hare GMT.Walking track analysis a long-term assessment of pe?ripheral nerve recovery[J].Plast Reconstr Surg,1992,89(2):251.

[4]Aydin MA,Urbanchek MG,Kuzon WM.Improved Early Muscle Re?covery Using FK506 in a Rat Nerve-Repair Model[J].J Reconstr Microsurg,2004,20(2):183-192.

[5]代遠(yuǎn)斌，盧小剛.經(jīng)電視腹腔鏡腰交感神經(jīng)節(jié)切除術(shù)的并發(fā)癥及防治[J].重慶醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)，2005，30（6）：912-914.

[6]寧秀艷.補(bǔ)陽(yáng)還五湯辨證加減治療繼發(fā)子宮性閉經(jīng)療效觀察[J].河北中醫(yī)，2011,33（7）:1018-1019.