日糧賴氨酸水平對(duì)12～18周齡雌性臨武鴨血液生化指標(biāo)的影響

林 謙，戴求仲＊，張 旭，蔣桂韜，王向榮，李 闖，黃 璇

（1.湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科學(xué)技術(shù)學(xué)院，湖南長(zhǎng)沙410128；2.湖南省畜牧獸醫(yī)研究所動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)與飼養(yǎng)技術(shù)研究室，湖南長(zhǎng)沙410131）

臨武鴨俗稱“鉤嘴鴨”，是中國(guó)八大名鴨之一，屬肉蛋兼優(yōu)型品種，亦是中國(guó)地理標(biāo)志性產(chǎn)品，因其產(chǎn)蛋多、適應(yīng)性強(qiáng)、飼料報(bào)酬高、肉質(zhì)細(xì)嫩、皮下脂肪沉積良好、味道鮮美而深受生產(chǎn)者和消費(fèi)者喜愛［1－2］。而賴氨酸作為家禽的第二限制性氨基酸，主要參與機(jī)體蛋白質(zhì)合成，同時(shí)與動(dòng)物生長(zhǎng)、發(fā)育密切相關(guān)，可見準(zhǔn)確評(píng)估賴氨酸的需要量對(duì)家禽營(yíng)養(yǎng)的研究與生產(chǎn)實(shí)踐至關(guān)重要。但是目前，還未見有關(guān)于后備期雌性臨武鴨賴氨酸需要量的研究報(bào)道。

本試驗(yàn)選用12～18周齡（后備期）雌性臨武鴨為試驗(yàn)動(dòng)物，飼喂不同賴氨酸水平日糧，研究其對(duì)試?guó)喲荷图に刂笜?biāo)的影響，同時(shí)從血液營(yíng)養(yǎng)代謝指標(biāo)和激素方面探討該階段雌性臨武鴨賴氨酸需要量的適宜水平，為臨武鴨飼養(yǎng)及營(yíng)養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)的制訂提供一定的參考。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)動(dòng)物與設(shè)計(jì)

選取健康、體重接近的84日齡雌性臨武鴨210羽，隨機(jī)分為5個(gè)處理（即0.55%、0.65%、0.75%、0.85%、0.95%五個(gè)賴氨酸水平處理），每個(gè)處理設(shè)6個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)設(shè)7只鴨來進(jìn)行試驗(yàn)，試驗(yàn)全期試?guó)啚?4～126日齡。

1.2 試驗(yàn)飼糧及營(yíng)養(yǎng)水平

試驗(yàn)飼糧參照NRC（1994）及本研究室對(duì)雌性臨武鴨粗蛋白質(zhì)需要量的研究結(jié)果，采用單因子試驗(yàn)設(shè)計(jì)，設(shè)5 個(gè)賴氨酸水平，即0.55%（Ⅰ組）、0.65%（Ⅱ組）、0.75%（Ⅲ組）、0.85%（Ⅳ組）、0.95%（Ⅴ組）。飼糧以小麥、玉米、豆粕、次粉為主要原料配合而成，試驗(yàn)飼糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平見表1。試驗(yàn)鴨采用顆粒料飼喂，飼糧由湖南省畜牧獸醫(yī)研究所飼料廠生產(chǎn)。

1.3 飼養(yǎng)管理

試驗(yàn)在湖南省畜牧獸醫(yī)研究所試驗(yàn)鴨場(chǎng)進(jìn)行，采用網(wǎng)上平養(yǎng)。試?guó)喿杂娠嬎筒墒常?4h 光照；舍內(nèi)自然通風(fēng)，保持正常溫度，相對(duì)濕度60%±5%。

1.4 測(cè)定指標(biāo)與方法

1.4.1 血清生化指標(biāo) 在飼養(yǎng)試驗(yàn)結(jié)束時(shí)，每重復(fù)隨機(jī)選取體重相近的試驗(yàn)鴨1只，空腹12h后，翼靜脈采血8mL，注入10mL 離心管傾斜放置，讓血液自然凝固。在血凝0.5h 后以3000r／min 離心15min分離血清，收集離心管上層血清分裝，于－20 ℃下保存，以測(cè)定相關(guān)生理生化指標(biāo)。

表1 試驗(yàn)（12～18周齡）日糧組成和營(yíng)養(yǎng)水平（風(fēng)干基礎(chǔ)）Table 1 Composition and nutrient levels of basal diets（air－dry basis，12～18w）

血清中葡萄糖（GLU）采用葡萄糖氧化酶法測(cè)定，甘油三酯（TG）采用甘油氧化酶法測(cè)定，總膽固醇（CHO）采用膽固醇氧化酶法測(cè)定，尿酸（UA）采用酶聯(lián)比色法測(cè)定，尿素氮（BUN）采用尿素酶法測(cè)定，肌酐（Cr）采用苦味酸法測(cè)定，堿性磷酸酶（ALP）采用AMP 緩沖液法測(cè)定，谷丙轉(zhuǎn)氨酶（ALT）采用乳酸脫氫酶法測(cè)定，谷草轉(zhuǎn)氨酶（AST）采用蘋果酸脫氫酶法測(cè)定，總蛋白（TP）采用雙縮脲法測(cè)定、白蛋白（ALB）采用溴甲酚綠法測(cè)定，尿酸測(cè)試試劑盒由浙江東歐醫(yī)療診斷產(chǎn)品公司生產(chǎn)，其余指標(biāo)都使用由桂林優(yōu)利特醫(yī)療電子有限公司產(chǎn)的相應(yīng)試劑盒測(cè)定，所有檢測(cè)均在URIT－8000全自動(dòng)生化分析儀（桂林優(yōu)利特醫(yī)療電子有限公司生產(chǎn)）上進(jìn)行；而球蛋白（GLO）含量通過計(jì)算獲得，即GLO含量＝TP含量－ ALB含量。

1.4.2 血清激素指標(biāo) 利用步驟1.4.1獲得的血清樣本采用放射性同位素免疫法（RI?。?，使用由北京北方生物技術(shù)研究所生產(chǎn)的相應(yīng)試劑盒在GC－300型γ－放免儀（安徽中科中佳科學(xué)儀器有限公司生產(chǎn)）上測(cè)定生長(zhǎng)激素（GH）、胰島素（Ins）、胰高血糖素（GIU）、三碘甲腺原氨酸（T3）、甲狀腺素（T4）和皮質(zhì)醇（Cor）含量，并計(jì)算T3／T4。

1.5 數(shù)據(jù)處理與統(tǒng)計(jì)分析

試驗(yàn)數(shù)據(jù)用Excel 2003軟件進(jìn)行初步處理后，采用SPSS 13.0 統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行單因素方差分析（one－way ANOVA），若組間差異顯著，則采用Duncan氏法進(jìn)行多重比較，顯著水平為P＜0.05。試驗(yàn)結(jié)果以“平均值±標(biāo)準(zhǔn)差”表示。

2 結(jié)果與分析

2.1 日糧不同賴氨酸水平對(duì)12～18周齡雌性臨武鴨血液生化指標(biāo)的影響

由表2可知，血清中血糖、總膽固醇、尿酸、尿素氮、肌酐和谷丙轉(zhuǎn)氨酶分別以0.85%、0.95%、0.95%、0.65%、0.55%和0.55%Lys組最高，但均無顯著差異（P＞0.05）。日糧賴氨酸水平顯著或極顯著影響試?guó)喲甯视腿ィ≒＜0.01）、堿性磷酸酶（P＜0.01）和谷草／谷丙轉(zhuǎn)氨酶水平（P＜0.05），其中，甘油三酯以0.95%Lys 組最高，為3.55 mmol／L，分別比0.55%、0.65%、0.75%和0.85%Lys組高出65.12%（P＜0.01）、65.89%（P＜0.01）、47.92%（P＜0.01）和40.87%（P＜0.01），而0.55%、0.65%、0.75%和0.85%Lys組間血清甘油三酯含量差異不顯著（P＞0.05）；堿性磷酸酶以0.75%Lys 組最高，為396.00IU／L，分別比0.55%、0.65%、0.85% 和0.95%Lys 組高出89.02%（P＜0.01）、154.66%（P＜0.01）、185.92%（P＜0.01）和410.97%（P＜0.01），另外，0.55%Lys組血清堿性磷酸酶含量顯著高于0.95%Lys組（P＜0.05），而0.55%、0.65%和0.85%Lys組間血清堿性磷酸酶含量差異不顯著（P＞0.05）；谷草／谷丙轉(zhuǎn)氨酶以0.85%Lys組最高，為1.49，比0.65%Lys組高出50.51%（P＜0.05）。谷草轉(zhuǎn)氨酶以0.95%Lys組最高，為51.75IU／L，比0.55%Lys組高出26.22%（P＜0.05）?？偟鞍滓?.55%Lys組最高，為60.00g／L，比0.75%Lys組高出17.65%（P＜0.05）。白蛋白以0.95%Lys組最高，為24.33 g／L，比0.75%Lys組高出23.69%（P＜0.05）。球蛋白以0.55%Lys組最高，為39.00g／L，分別比0.85%和0.95%Lys組高出30.00%（P＜0.05）和30.74%（P＜0.05）。白球比以0.95%Lys組最高，為0.87，比0.55%Lys組高出58.18%（P＜0.05）。

表2 不同賴氨酸水平對(duì)12～18周齡周齡雌性臨武鴨生長(zhǎng)性能的影響Table 2 Effects of different Lys levels in diets on serum biochemical indices of 12～18wLinwu duck

2.2 雌性臨武鴨血液激素指標(biāo)的影響

不同賴氨酸水平對(duì)12～18周齡雌性臨武鴨血清激素指標(biāo)的影響見表3。由表3可知，日糧賴氨酸水平對(duì)血清生長(zhǎng)激素、胰島素、胰高血糖素、皮質(zhì)醇、T3、T4和T3／T4影響均不顯著（P＞0.05）。其中，血清中生長(zhǎng)激素、皮質(zhì)醇、T3、T4和T3／T4分別以0.75%、0.75%、0.75%、0.95%和0.75%Lys組最高，但均無顯著差異（P＞0.05）；胰島素以0.95%Lys組最高，為4.82μIU／mL，比0.55%Lys組高出100.83%（P＜0.05）；胰高血糖素以0.55%Lys組最高，為208.53 pg／mL，比0.65%Lys 組高出142.08%（P＜0.05）。

表3 不同賴氨酸水平對(duì)12～18周齡雌性臨武鴨血清激素指標(biāo)的影響Table 3 Effect of different Lys levels diets on serum hormonal indices of 12～18wLinwu duck

3 討論

3.1 日糧賴氨酸水平對(duì)12～18周齡雌性臨武鴨血液生化指標(biāo)的影響

方勇軍［3］選用3日齡櫻桃谷肉鴨108羽，分別飼喂6 組不同精氨酸水平（0.620%、0.745%、0.850%、0.995%、1.120%和1.620%）日糧，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，各試驗(yàn)組肉鴨血清中甘油三酯含量較之對(duì)照組均有不同程度的下降，其中日糧精氨酸水平為1.120%的試驗(yàn)Ⅴ組達(dá)到顯著水平；張括等［4］對(duì)玉米－豆粕型日糧中不同色氨酸水平對(duì)后備蛋鴨營(yíng)養(yǎng)代謝的影響進(jìn)行研究，結(jié)果表明，適宜水平的色氨酸能顯著提高血清中的白蛋白、總蛋白和堿性磷酸酶的水平，顯著降低血清尿素氮、葡萄糖、膽固醇和和甘油三酯的水平，但對(duì)血清乳酸脫氫酶無顯著影響，并以試?guó)喲鍫I(yíng)養(yǎng)代謝指標(biāo)為評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)，認(rèn)為后備蛋鴨色氨酸需要量為0.256%～0.270%。不過目前對(duì)后備期蛋鴨賴氨酸需要量的研究報(bào)道十分少見，更未見有對(duì)日糧不同賴氨酸水平對(duì)后備臨武鴨血液生化指標(biāo)的影響研究報(bào)道。而本研究結(jié)果顯示日糧賴氨酸水平顯著或極顯著影響試?guó)喲甯视腿ァA性磷酸酶和谷草轉(zhuǎn)氨酶／谷丙轉(zhuǎn)氨酶水平（P＜0.05或P＜0.01），但對(duì)血糖、總膽固醇、尿酸、尿素氮、肌酐和谷丙轉(zhuǎn)氨酶影響均不顯著（P＞0.05）。王安等［5］報(bào)道，堿性磷酸酶在動(dòng)物體內(nèi)蛋白質(zhì)合成方面起到重要的作用，其與機(jī)體蛋白質(zhì)合成呈正相關(guān)。本試驗(yàn)中，0.55%Lys組和0.75%Lys組血清中ALP含量最高，說明0.55%賴氨酸水平日糧即可滿足12～18周齡雌性臨武鴨生長(zhǎng)發(fā)育需要，而日糧賴氨酸水平在0.75%時(shí)最利于12～18周齡雌性臨武鴨生長(zhǎng)發(fā)育需要。

張婷等［6］選用1日齡金定蛋雛鴨180羽，分別飼喂5組不同賴氨酸水平（1.03%、1.10%、1.17%、1.24%和1.31%）日糧，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，血清中的總蛋白、白蛋白和球蛋白含量均以Ⅲ組最高，且前二者含量顯著高于對(duì)照組。血清總蛋白及白蛋白含量可反映機(jī)體蛋白質(zhì)代謝狀況，白球比則是衡量機(jī)體免疫水平的一項(xiàng)指標(biāo)，白球比下降說明機(jī)體特異性免疫應(yīng)答水平在提升［7］，本試驗(yàn)中，血清中總蛋白和球蛋白二者與日糧賴氨酸水平呈負(fù)相關(guān)，白蛋白和白球比與日糧賴氨酸水平則呈現(xiàn)出正相關(guān)，同時(shí)宋凱等［8］研究表明，谷丙轉(zhuǎn)氨酶和谷草轉(zhuǎn)氨酶在非必需氨基酸的合成和機(jī)體蛋白質(zhì)代謝過程中扮演重要角色，同時(shí)與肝臟細(xì)胞的完整性也密切相關(guān)，本試驗(yàn)條件下，日糧賴氨酸水平對(duì)AST 影響趨于顯著，對(duì)AST／ALT 影響顯著，表明高賴氨酸水平日糧可造成后備期臨武鴨肝細(xì)胞受損，綜合說明日糧0.55%賴氨酸水平即可滿足12～18周齡雌性臨武鴨生長(zhǎng)、免疫和機(jī)體發(fā)育需要。

血清甘油三酯能反映機(jī)體脂類代謝水平，其含量過高對(duì)機(jī)體健康不利［9］，本試驗(yàn)中，試?guó)喲逯懈视腿ズ侩S著日糧賴氨酸水平的增加而增加，且0.95%Lys組甘油三酯含量極顯著高于其他各組（P＜0.01），而其他各組間血清甘油三酯含量差異不顯著（P＞0.05），說明在本試驗(yàn)條件下日糧0.95%賴氨酸水平不利于12～18周齡雌性臨武鴨機(jī)體健康。

3.2 日糧賴氨酸水平對(duì)12～18周齡雌性臨武鴨血液激素指標(biāo)的影響

陳志敏等［10］研究表明，不同賴氨酸添加水平（0.65%、0.80%、0.95%、1.10%、1.25%和1.40%）對(duì)0～3周齡雄性肉仔雞血液中T3含量影響顯著，且二者呈正相關(guān)，而血液中T4、生長(zhǎng)激素和胰島素含量沒發(fā)現(xiàn)在各組之間存在顯著差異。張括等［11］研究12～17周齡金定蛋鴨適宜色氨酸需要量時(shí)發(fā)現(xiàn)0.252%～0.269%的色氨酸能顯著提高試?guó)喲灏准?xì)胞介素（IL－2）和免疫球蛋白G 含量（P＜0.05），顯著降低血清皮質(zhì)醇（Cor）和免疫球蛋白M 的含量（P＜0.05），0.242%～0.260%的色氨酸對(duì)試?guó)喆俾雅菁に睾痛贫挤置谟绊懖伙@著（P＞0.05），對(duì)血清中促黃體生成素和孕酮影響顯著（P＜0.05）。本試驗(yàn)結(jié)果顯示，隨著日糧賴氨酸水平的增加，生長(zhǎng)激素、T3和T4均呈先增后降趨勢(shì)，這與陳偉等［12］研究結(jié)果相似，且T3和T4間呈負(fù)相關(guān)趨勢(shì)，其原因可能是試?guó)啿墒掣哔嚢彼崴饺占Z限制了腦垂體前葉嗜酸性細(xì)胞對(duì)激素的分泌，而生長(zhǎng)激素又是一種由嗜酸性細(xì)胞分泌的激素，因此限制了生長(zhǎng)激素的分泌；甲狀腺激素方面，可能是由于T3的降低，導(dǎo)致T4向T3轉(zhuǎn)化量下降，使T4的濃度增加［13］。

另有報(bào)道生長(zhǎng)激素直接影響性腺發(fā)育，其在卵巢和子宮上有受體，可能直接或協(xié)同參與畜禽生殖機(jī)能調(diào)控［14－15］，皮質(zhì)醇參與動(dòng)物機(jī)體應(yīng)激活動(dòng)，能引起蛋白質(zhì)、脂肪和糖原等的分解代謝，還能引發(fā)免疫抑制［16］，本試驗(yàn)中各組生長(zhǎng)激素、皮質(zhì)醇含量無顯著差異（P＞0.05），但日糧0.75%、0.85%賴氨酸組血清GH 含量最高，日糧0.55%、0.85%賴氨酸組血清Cor含量最低，說明日糧0.55%賴氨酸水平即可滿足12～18周齡雌性臨武鴨生長(zhǎng)發(fā)育需要，而日糧賴氨酸水平在0.75%～0.85%時(shí)對(duì)后備期臨武鴨的機(jī)體生長(zhǎng)發(fā)育最有利。

有研究報(bào)道胰島素不僅是體內(nèi)能量代謝的重要激素，同時(shí)其可主要通過早期生長(zhǎng)應(yīng)答蛋白－1 途徑、胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激酶途徑和神經(jīng)肽Y 途徑三條通路對(duì)促性腺激素釋放激素的分泌與活性進(jìn)行調(diào)控［17］，同時(shí)本試驗(yàn)結(jié)果顯示，日糧賴氨酸水平對(duì)試?guó)喲逡葝u素和胰高血糖素含量影響均不顯著（P＞0.05），說明對(duì)后備期雌性臨武鴨生長(zhǎng)發(fā)育來說日糧0.55%賴氨酸水平即可滿足其需要。

4 結(jié)論

在本試驗(yàn)條件下，以血液生化和激素為評(píng)價(jià)指標(biāo)，12～18周齡（后備期）雌性臨武鴨賴氨酸水平為0.55%即可滿足試?guó)啓C(jī)體生長(zhǎng)發(fā)育需要，而日糧賴氨酸水平為0.75%～0.85%時(shí)對(duì)后備期臨武鴨的生長(zhǎng)發(fā)育來說最適宜。

［1］張復(fù)生，李麗立，蘭欣怡，等.臨武鴨肉質(zhì)營(yíng)養(yǎng)特性［J］.中國(guó)畜牧獸醫(yī)，2008，35（4）：121－124.

［2］夏新山.臨武鴨異地保護(hù)生產(chǎn)性能的研究［J］.中國(guó)家禽，2008，30（23）：54－56.

［3］方勇軍.精氨酸對(duì)肉鴨生長(zhǎng)性能、免疫機(jī)能、胴體品質(zhì)和血液脂質(zhì)的影響［D］.武漢：武漢工業(yè)學(xué)院，2009.

［4］張 括，王 安.后備蛋鴨色氨酸需要量研究［J］.中國(guó)飼料，2012，（8）：31－33，39.

［5］王 安，范承浩，李士平.低溫環(huán)境下飼糧電解質(zhì)平衡時(shí)對(duì)后備蛋鴨激素分泌及營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)代謝的影響［J］.動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)學(xué)報(bào)，2010，22（6）：1 566－1 570.

［6］張 婷，王 安，姜麗麗，等.飼糧賴氨酸水平對(duì)籠養(yǎng)蛋雛鴨生長(zhǎng)性能、免疫器官發(fā)育及血清生化指標(biāo)的影響［J］.飼料工業(yè)，2013，34（22）：9－12.

［7］林 謙，戴求仲，賓石玉，等.益生菌與酶制劑對(duì)黃羽肉雞血液生化指標(biāo)和免疫性能影響的協(xié)同效應(yīng)研究［J］.飼料工業(yè)，2012，33（14）：31－36.

［8］宋 凱，單安山，李建平.不同配伍酶制劑添加小麥飼糧中對(duì)肉仔雞生長(zhǎng)和血液生化指標(biāo)的影響［J］.動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)學(xué)報(bào)，2004，16（4）：25－29.

［9］林 謙.益生菌與酶制劑對(duì)黃羽肉雞生產(chǎn)性能影響的協(xié)同機(jī)理研究［D］.廣西桂林：廣西師范大學(xué)，2012.

［10］陳志敏，蔡輝益，于會(huì)民，等.不同賴氨酸添加水平對(duì)肉仔雞血液生理生化指標(biāo)的影響［J］.黑龍江畜牧獸醫(yī)，2006（11）：68－69.

［11］張 括，王 安，劉陽景.12～17周齡金定蛋鴨色氨酸適宜需要量的研究［J］.飼料工業(yè)，2011，32（20）：6－9.

［12］陳 偉，王 爽，張罕星，等.日糧賴氨酸水平對(duì)蛋鴨產(chǎn)蛋高峰期產(chǎn)蛋性能及血漿激素變化影響［C］／／印遇龍，譚支良，賀建華，等.中國(guó)畜牧獸醫(yī)學(xué)會(huì)動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)學(xué)分會(huì)第十一次全國(guó)動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)學(xué)術(shù)研討會(huì)論文集.長(zhǎng)沙：中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)技術(shù)出版社，2012：420.

［13］顧憲紅，王新謀.高溫對(duì)蛋雞甲狀腺及血漿甲狀腺激素的影響［J］.中國(guó)畜牧雜志，1995，31（2）：8－10.

［14］吳國(guó)權(quán)，王 安.低溫和硒對(duì)育成期籠養(yǎng)蛋鴨性發(fā)育及相關(guān)激素的影響［J］.動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)學(xué)報(bào)，2008，20（1）：29－33.

［15］劉立文.日糧能量對(duì)初情期前母豬FSH、LH、GH、胰島素及IGF－I釋放的影響［D］.長(zhǎng)春：吉林大學(xué)，2006.

［16］張 括.不同水平色氨酸對(duì)后備蛋鴨生長(zhǎng)性能及生化指標(biāo)的影響［D］.哈爾濱：東北農(nóng)業(yè)大學(xué)，2012.

［17］朱宇旌，丁 蘭，張 勇，等.胰島素對(duì)促性腺激素釋放激素分泌及活性的調(diào)控［J］.動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)學(xué)報(bào)，2013，25（1）：1－7.