清潔型復(fù)合飼料添加劑對發(fā)酵床育肥前期豬生長、營養(yǎng)代謝及激素分泌的影響

閆俊書，宦海琳，周維仁，楊 杰，徐小明，馮國興，顧洪如

（江蘇省農(nóng)科院畜牧研究所，江蘇南京210014）

目前，隨著規(guī)?；i場快速發(fā)展和糞污處理相對落后矛盾的逐漸凸顯，畜糞對環(huán)境的污染日益嚴重。2006年，我國規(guī)模化養(yǎng)殖場（小區(qū)、專業(yè)戶）的畜禽糞便產(chǎn)生量達2.43×108t，尿液產(chǎn)生量達1.63×108t，成為農(nóng)業(yè)主要的污染源之一［1］。畜禽糞便的處理成為當前畜牧業(yè)發(fā)展中迫切需要解決的一個重大問題。發(fā)酵床養(yǎng)豬是一種基于環(huán)境保護理念的綠色養(yǎng)殖技術(shù)，其利用微生物與墊料構(gòu)建生豬生長的發(fā)酵床基質(zhì)，通過床體中功能菌的新陳代謝分解生豬排泄的糞尿，從而實現(xiàn)對周圍環(huán)境零排放的一種生態(tài)養(yǎng)殖方法［2］，實現(xiàn)了無污染、低排放的目的，緩解了養(yǎng)豬業(yè)對環(huán)境造成的壓力。但由于飼料中抗生素大量使用帶來了一系列問題，如導(dǎo)致豬體內(nèi)菌群失調(diào)、抑制床體微生物的發(fā)酵、產(chǎn)生抗藥性及藥物殘留等，使發(fā)酵床養(yǎng)殖模式的應(yīng)用受到限制。飼料中添加的抗生素隨排泄物進入到墊料中，對墊料中的微生物尤其是益生微生物造成了極大的損害［3］，降低了墊料的使用效率［4］。因此，如何從源頭上控制抗生素的使用，減少糞便中殘留抗生素對發(fā)酵床微生物的影響成為關(guān)鍵性問題。本試驗將無抗生素的清潔型復(fù)合飼料添加劑應(yīng)用于發(fā)酵床養(yǎng)殖模式中，研究其對發(fā)酵床育肥前期豬生長性能、血液生化指標及激素水平的影響，旨在解決發(fā)酵床養(yǎng)殖中的抗生素污染問題，并為其在發(fā)酵床養(yǎng)豬中的廣泛應(yīng)用提供依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

本試驗用清潔型復(fù)合飼料添加劑由植酸酶、復(fù)合酶、微生態(tài)制劑（芽孢桿菌、乳酸菌、酵母菌）組成，其中植酸酶和復(fù)合酶由廣東溢多利生物科技股份有限公司生產(chǎn)，微生態(tài)制劑由安琪酵母股份有限公司生產(chǎn)。各組試驗豬日糧參照NRC（1998）豬營養(yǎng)需要配制，基礎(chǔ)日糧配方及營養(yǎng)水平見表1，對照組飼喂基礎(chǔ)日糧，試驗組用酶制劑及微生態(tài)制劑等量玉米構(gòu)成試驗飼糧，其中植酸酶添加量100g／t，復(fù)合酶添加量100g／t，微生態(tài)制劑中枯草芽孢桿菌500 g／t，酵母菌500g／t，乳酸菌3kg／t。

1.2 發(fā)酵床的制作

本試驗圈舍發(fā)酵床采用地上床面設(shè)計，發(fā)酵床面厚度為60cm。發(fā)酵床墊料采用鋸末、稻殼及稻草秸稈等作為主要成分，制作時將墊料準備好后接種菌種，調(diào)節(jié)水分和拌勻后，鋪至發(fā)酵床發(fā)酵。發(fā)酵床的日常維護主要包括墊料的淺層翻扒，將糞便集中的區(qū)域人工分散，當墊料出現(xiàn)明顯下降時補充同樣比例的墊料。自然發(fā)酵7～10d即可用于豬生長期飼養(yǎng)試驗。飼養(yǎng)過程中，除隨時翻轉(zhuǎn)部分板結(jié)區(qū)域外，每半個月翻轉(zhuǎn)一次墊料床，定期補加墊料和菌種。

1.3 試驗動物及分組

試驗選取健康無病體重30kg 左右的蘇鐘豬120頭，隨機分為2組，分別為對照組（基礎(chǔ)日糧）和試驗組（清潔型日糧），每個處理組4個重復(fù)，每個重復(fù)15頭。試驗于江蘇省農(nóng)業(yè)科學(xué)院六合動物科學(xué)基地豬場進行，預(yù)飼7d，預(yù)試期間，初步掌握每頭豬的采食規(guī)律，測定每頭豬日采食量。每日早8∶00時加料，全期自由采食及飲水，按豬場常規(guī)程序進行免疫、驅(qū)蟲、消毒和管理等。試驗結(jié)束豬只全群稱重，統(tǒng)計日采食量、日增重及飼料報酬。

1.4 測定指標與方法

1.4.1 生長性能 試驗開始和試驗結(jié)束時分別對試驗豬進行空腹稱重，每天觀察豬群生長情況，記錄飼料消耗情況，計算生長豬平均日增重、平均日采食量、料重比。

1.4.2 血液生化指標的測定 豬只稱重同時進行前腔靜脈采血約5mL，3 000r／min離心10min，分離血清，－20 ℃保存?zhèn)溆?。采用試劑盒分析測定血清中總蛋白（TP）、白蛋白（ALB）、球蛋白（GLB）、葡萄糖（GLU）、尿素氮（UN）、總膽固醇（TCHO）、高密度膽固醇、低密度膽固醇、甘油三酯（TG）含量、谷丙轉(zhuǎn)氨酶（ALT）和谷草轉(zhuǎn)氨酶（AST）活性，試劑盒購自南京建成生物科技有限公司。

1.4.3 內(nèi)分泌指標的測定 血清中生長激素（GH）、胰島素樣生長因子（IGF－Ⅰ）、胰島素（INS）、甲狀腺素（T3、T4）的含量采用Elisa試劑盒測定。

表1 飼糧組成及營養(yǎng)水平（風干基礎(chǔ)）Table 1 Composition and nutrient levels of diets（air－dry basis）

1.5 數(shù)據(jù)統(tǒng)計

試驗數(shù)據(jù)采用Excel 2007 進行初步整理，用SAS 9.2軟件進行統(tǒng)計分析，采用單因子方差（Oneway ANOVA）分析進行差異顯著性檢驗，并用鄧肯氏（Duncan＇S）法進行多重比較，結(jié)果以平均值±標準誤（mean±SE）表示。

2 結(jié)果與分析

2.1 清潔型復(fù)合飼料添加劑對發(fā)酵床育肥前期豬生長性能的影響

由表2可知，在發(fā)酵床育肥前期豬日糧中應(yīng)用清潔型復(fù)合飼料添加劑發(fā)現(xiàn)，清潔飼料組體重較對照組無顯著差異，但清潔飼料組平均日增重較對照組提高了4.76%（P＞0.05），同時料重比較對照組降低了1.72%（P＞0.05）。

2.2 清潔型復(fù)合飼料添加劑對發(fā)酵床育肥前期豬蛋白質(zhì)、脂肪代謝及酶活性的影響

清潔型復(fù)合飼料添加劑對發(fā)酵床育肥前期豬血清中蛋白質(zhì)、脂肪代謝及酶活性的影響見表3，清潔型復(fù)合飼料添加劑組總蛋白及白蛋白較對照組均有提高，但差異不顯著（P＞0.05），表明清潔型復(fù)合飼料添加劑對發(fā)酵床育肥前期豬蛋白質(zhì)代謝無顯著影響；清潔復(fù)合飼料添加劑組甘油三酯含量較對照組降低了58.82%（P＜0.01），而對葡萄糖、膽固醇、高密度膽固醇及低密度膽固醇的影響差異不顯著（P＞0.05）；清潔型復(fù)合飼料添加劑對血清中酶活性的變化無顯著性影響，但谷丙轉(zhuǎn)氨酶及谷草轉(zhuǎn)氨酶都有提高的趨勢（P＞0.05）。

表2 清潔型復(fù)合飼料添加劑對發(fā)酵床育肥前期豬生長性能的影響Tabel 2 Effect of no antibiotic diets on growth performance of pre－fattening pigs in microbial fermentation bed system

表3 清潔型復(fù)合飼料添加劑對發(fā)酵床育肥前期豬蛋白質(zhì)、脂肪代謝及酶活性的影響Tabel 3 The effect of no antibiotic diets on protein and fat metabolism，enzyme activity of pre－fattening pigs in microbial fermentation bed system

2.3 清潔型復(fù)合飼料添加劑對發(fā)酵床育肥前期豬內(nèi)分泌激素的影響

清潔型日糧對發(fā)酵床育肥前期豬內(nèi)分泌激素的影響見表4。由表4可知，清潔日糧組血清中T3、T4含量均顯著提高，其中T3 含量較對照組提高了18.12%（P＜0.05），T4含量較對照組提高了18.84%（P＜0.05），清潔日糧組IGF－Ⅰ、INS、GH 含量較對照組也有提高的趨勢，但差異不顯著（P＞0.05）。

3 討論

3.1 清潔型復(fù)合飼料添加劑對發(fā)酵床育肥前期豬生長性能的影響

近年來，飼用酶制劑及益生菌作為一種綠色、環(huán)保型飼料添加劑，在豬日糧中的應(yīng)用效果已經(jīng)得到肯定。飼用酶制劑能補充豬體內(nèi)內(nèi)源酶的不足，通過去除抗營養(yǎng)因子［5］，提高營養(yǎng)物質(zhì)的消化率［6］，降低仔豬腹瀉率［7］，改善豬只腸道微生態(tài)平衡［8］，從而提高飼料營養(yǎng)價值和豬的生產(chǎn)性能，提高飼料轉(zhuǎn)化率，增進豬體健康，減少環(huán)境污染，提高經(jīng)濟效益。王向榮等［9］在28日齡斷奶仔豬日糧中添加4種不同比例由半乳糖苷酶、木聚糖酶、β－葡聚糖酶、果膠酶、蛋白酶和淀粉酶組成的復(fù)合酶，結(jié)果顯示，4 種復(fù)合酶均可提高仔豬的生產(chǎn)性能；但張民等［10］研究發(fā)現(xiàn)，復(fù)合酶對斷奶仔豬全期日增重、料重比無顯著影響；高玉紅等［11］報道，復(fù)合酶可提高斷奶仔豬日增重，料重比也有較大程度降低，但差異不顯著。有益菌群能夠促進營養(yǎng)成分的吸收利用和有效合成，促進豬的生長發(fā)育和增重。微生態(tài)制劑能夠改善胃腸道的生態(tài)環(huán)境，產(chǎn)生有益物質(zhì)，建立和維持腸道微生態(tài)平衡，促進豬對營養(yǎng)物質(zhì)的消化吸收，提高飼料的轉(zhuǎn)化和利用率，增強生豬的消化功能［12］。李煥友等［13］認為用微生態(tài)制劑取代肥育豬日糧中的抗生素類、抗菌藥物類添加劑，能夠大幅度提高試驗豬的生長速度與飼料利用率，降低單位增重飼料成本；劉成江等［14］研究表明飼料中添加微生態(tài)制劑可使豬日增重提高8%～10% ，料重比降低5%～8% ，成活率達99% ，可提前10d左右出欄；Giang等［15］研究表明，復(fù)合微生態(tài)制劑（含乳酸桿菌；芽孢桿菌；酵母菌）可提高生長豬（28～52kg）的生長性能，飼料轉(zhuǎn)化率和養(yǎng)分消化率。本試驗將復(fù)合酶制劑及益生菌組成的清潔飼糧應(yīng)用于發(fā)酵床育肥前期豬，結(jié)果表明，清潔飼糧對豬組體重無顯著影響，但清潔飼糧組平均日增重較對照組提高了4.76%，同時料重比較對照組降低了1.72%，由此可見，在發(fā)酵床育肥前期豬應(yīng)用清潔型日糧具有改善豬生長性能的趨勢，可提高豬的平均日增重，降低料重比。

表4 清潔型復(fù)合飼料添加劑對發(fā)酵床育肥前期豬內(nèi)分泌激素的影響Tabel 4 The effect of no antibiotic diets on endocrine hormones of pre－fattening pigs in microbial fermentation bed system

3.2 清潔型復(fù)合飼料添加劑對發(fā)酵床育肥前期豬血清中蛋白質(zhì)、營養(yǎng)物質(zhì)代謝及酶活性的影響

血液生化指標的改變是組織細胞通透性發(fā)生改變和機體新陳代謝機能發(fā)生改變的反映。血清蛋白指標是機體蛋白質(zhì)合成代謝的一個重要標志，血清中總蛋白、白蛋白和球蛋白的含量反映了機體對蛋白質(zhì)的吸收和代謝狀況［16］，血清中蛋白質(zhì)含量的升高，有利于提高動物的代謝水平和免疫能力，促進蛋白質(zhì)的合成和增加氮沉積［17］。血清中的尿素氮是蛋白質(zhì)和氨基酸代謝的最終產(chǎn)物，其含量可以準確的反映動物體內(nèi)蛋白質(zhì)代謝和氨基酸之間的平衡狀況。陳旭東等［18］在斷奶仔豬日糧中添加芽孢桿菌能顯著提高斷奶仔豬血清總蛋白水平，提高幅度為10%～80%，并能顯著降低尿素氮水平。Canibe等［19］研究表明，斷奶仔豬飼喂乳酸菌，促使淀粉酶和蛋白合成酶活性顯著增強，參與機體新陳代謝，從而促進動物生長和提高生產(chǎn)性能。本試驗結(jié)果發(fā)現(xiàn)，清潔型日糧有提高血清總蛋白及白蛋白的趨勢，表明清潔型日糧可能會促進機體蛋白質(zhì)的合成，促進豬的生長，這與清潔型日糧可改善豬的生長性能結(jié)果一致。血清中血糖、膽固醇、甘油三酯的含量是反映機體脂肪代謝水平的幾個重要指標［20］，本試驗研究發(fā)現(xiàn)，清潔日糧可顯著降低發(fā)酵床育肥前期豬血清中甘油三酯的含量，表明清潔型日糧參與了機體的脂肪代謝，改善了育肥前期豬脂肪代謝水平。谷丙轉(zhuǎn)氨酶和谷草轉(zhuǎn)氨酶是動物體內(nèi)兩種重要的轉(zhuǎn)氨酶，其主要作用在于催化氨基酸的α－氨基轉(zhuǎn)移至α－酮酸的酮基位置，反映了蛋白質(zhì)合成和分解代謝的狀況［21－22］，在非必需氨基酸的合成與蛋白質(zhì)分解代謝中起重要的催化作用，其濃度的提高意味著體內(nèi)氨基酸代謝的加強。本試驗結(jié)果發(fā)現(xiàn)，清潔日糧組谷丙轉(zhuǎn)氨酶及谷草轉(zhuǎn)氨酶都有提高的趨勢，表明清潔型日糧可能加快了機體內(nèi)蛋白質(zhì)分解代謝，從而使豬生產(chǎn)性能有提高的趨勢。

3.3 清潔型復(fù)合飼料添加劑對發(fā)酵床育肥前期豬內(nèi)分泌激素的影響

內(nèi)分泌激素（生長激素、IGF－I、T3、T4 和胰島素等）在機體代謝、生長調(diào)節(jié)上起重要作用。甲狀腺激素是調(diào)節(jié)糖、脂肪、蛋白質(zhì)代謝的重要激素，是維持動物生長和發(fā)育的必要激素，并與生長激素有協(xié)同作用，適量的甲狀腺激素是生長激素發(fā)揮促生長作用的必需條件。

甲狀腺素對脂類代謝同樣產(chǎn)生重要影響，甲狀腺激素既可刺激膽固醇的合成，又可促進外周組織利用并促進肝臟中的膽固醇進入血中加速利用［23］。本試驗將清潔型日糧應(yīng)用于發(fā)酵床育肥前期豬，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，血清中T3、T4含量顯著提高，表明在發(fā)酵床育肥前期豬日糧中添加清潔型日糧改變了豬的內(nèi)分泌狀態(tài)，機體的代謝水平提高，從而促進豬的生長。生長激素對動物體內(nèi)的蛋白質(zhì)代謝和脂肪代謝有顯著調(diào)控作用。其主要通過影響機體的代謝過程和代謝活動來實現(xiàn)調(diào)節(jié)機體生長［24］。IGF－I在動物生長發(fā)育中起著重要調(diào)節(jié)作用，其作為下丘腦－垂體－肝臟構(gòu)成的生長激素調(diào)控軸的“終端”，最能反映動物的營養(yǎng)和生長狀況［25］。IGF－I能直接促進細胞生長，增強機體對氨基酸的攝取和利用，促進蛋白質(zhì)和RNA 的合成，增強肌肉的生長，還可與其它細胞生長因子協(xié)同促進肌細胞、成骨細胞、脂肪細胞以及膠質(zhì)細胞的增殖與分化，而且IGF－I水平與機體氮平衡呈很強的正相關(guān)［26］，其在調(diào)節(jié)生長的過程中，容易受到機體營養(yǎng)水平的調(diào)控［27］。本試驗結(jié)果，清潔日糧組IGF－Ⅰ、INS、GH 含量較對照組也有提高的趨勢，由此可見，在發(fā)酵床育肥前期豬日糧中添加清潔型日糧改變了豬的內(nèi)分泌狀態(tài)，提高血清中的激素含量，表明清潔型日糧可能通過改變育肥前期豬的內(nèi)分泌激素的水平而促進生長。

4 結(jié)論

在發(fā)酵床育肥前期豬日糧中應(yīng)用無抗生素的清潔型復(fù)合飼料添加劑，可提高豬的生長性能，改善營養(yǎng)物質(zhì)代謝水平，降低血清中甘油三酯的含量，并提高豬血清中T3、T4的含量，改善豬體內(nèi)內(nèi)分泌激素的水平，表明清潔型日糧可應(yīng)用于發(fā)酵床養(yǎng)豬，并有效促進豬的生長。

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