青刺尖茶湯對(duì)便秘模型小鼠潤(rùn)腸通便的效果

方 玉，劉 剛,2,*，張曉喻,2，張 宏,2

（1.四川師范大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院，四川 成都 610101；

2.四川師范大學(xué)植物資源應(yīng)用與開發(fā)研究所，四川 成都 610101）

青刺尖茶湯對(duì)便秘模型小鼠潤(rùn)腸通便的效果

方 玉1，劉 剛1,2,*，張曉喻1,2，張 宏1,2

（1.四川師范大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院，四川 成都 610101；

2.四川師范大學(xué)植物資源應(yīng)用與開發(fā)研究所，四川 成都 610101）

目的：研究青刺尖茶湯對(duì)便秘模型小鼠的潤(rùn)腸通便作用。方法：將雄性昆明小鼠隨機(jī)分為空白組、模型組、陽性組和低、中、高3 個(gè)劑量的給藥組。給藥組分別經(jīng)口給予低、中、高劑量（1、2、6 g/（kg·d））的青刺尖茶湯；空白組和模型組給予0.3 mL/20 g的蒸餾水；陽性組給予0.9 g/（kg·d）的麻仁丸。連續(xù)灌胃7 d后，觀察各組小鼠的首次排黑便時(shí)間、5 h內(nèi)排便粒數(shù)，測(cè)定糞便含水量和小腸墨汁推進(jìn)率。結(jié)果：3 個(gè)劑量組與模型組和陽性組比較，各測(cè)定指標(biāo)都有顯著性差異；青刺尖茶湯能明顯縮短小鼠首次排黑便時(shí)間，增加小鼠5 h內(nèi)排便數(shù)量、糞便含水量和小腸推進(jìn)率。結(jié)論：青刺尖茶湯有明顯的潤(rùn)腸通便功效。

青刺尖茶；通便；小鼠；便秘

青刺尖（Prinsepia utilis Royle）屬薔薇科李亞科扁核木屬的落葉灌木，別名炮筒果、牛奶捶、雞蛋糕、梅花刺、槍子果、阿那斯、蒙自扁核木等[1]，其冬季開花，夏季結(jié)果，雌雄同株，主要分布云南、貴州、四川、西藏等地，生于山坡、荒地、山谷或路旁等處[2-3]。青刺尖的根、莖、葉和果實(shí)均可入藥，在納西族、白族、彝族、摩梭人等少數(shù)民族中已有上千年的應(yīng)用歷史。在《貴州草藥》、《中藥大詞典》等均有記載：青刺尖莖葉主治癰疽毒瘡、風(fēng)火牙痛、槍傷、骨折、蛇咬傷；根主治虛咳、久咳、積食、風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎；果主治目翳多淚、消化不良等[4-5]。近幾年，人們對(duì)青刺尖進(jìn)行了大量研究，發(fā)現(xiàn)它具有很高的藥用價(jià)值、營(yíng)養(yǎng)價(jià)值、經(jīng)濟(jì)價(jià)值和生態(tài)價(jià)值[6-7]。

便秘是一種臨床常見病[8]，多由飲食、排便習(xí)慣不良、腸道蠕動(dòng)減退、腸黏膜應(yīng)激性減退等原因而逐漸形成，在中老年人群中常見，據(jù)調(diào)查顯示：在北京、上海、廣州、西安、成都和沈陽6 個(gè)地區(qū)，8 252 名60 歲以上老年人的便秘發(fā)生率為11.5%，且發(fā)病率隨年齡上升而增加[9]。長(zhǎng)期便秘會(huì)加劇腸道內(nèi)有害菌的大量增殖，有毒代謝物明顯增加，使腸道微生態(tài)失衡，形成惡性循環(huán)，甚至誘發(fā)腸癌[10]。目前臨床上常用的治療方法是給患者服用能刺激腸道分泌和減少吸收、增加腸道內(nèi)滲透壓和流體靜力壓的瀉藥，但長(zhǎng)期應(yīng)用瀉藥有副作用，如引起腸黏膜吸收障礙，嚴(yán)重的會(huì)出現(xiàn)機(jī)體脫水、電解質(zhì)紊亂，甚至出現(xiàn)依賴性及頑固性便秘[11]。因此便秘越來越受重視，成為近幾年常見疾病研究的重點(diǎn)[12-13]。

用當(dāng)年生青刺尖的葉可制備成茶，用開水沖泡即成茶飲，該茶飲的潤(rùn)腸通便功能目前尚未見文獻(xiàn)報(bào)道。本研究對(duì)青刺尖茶湯的潤(rùn)腸通便功能進(jìn)行初步動(dòng)物研究，以期為青刺尖資源的開發(fā)利用提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

1.1.1 材料與動(dòng)物

青刺尖茶，產(chǎn)自鹽源縣左所鄉(xiāng)，成都某公司提供。

雄性昆明小鼠，體質(zhì)量18～22 g，合格證號(hào)SCXK（川）2008-24，成都達(dá)碩實(shí)驗(yàn)動(dòng)物公司提供。小鼠專用飼料，合格證號(hào)SCXK（川）2010-01，成都達(dá)碩實(shí)驗(yàn)動(dòng)物公司提供。

1.1.2 試劑

蒙脫石散粉末（批號(hào)120414） 山東頤和制藥有限公司；研碎麻仁丸（批號(hào)12110040） 重慶桐君閣藥廠有限公司。

墨汁的制備：準(zhǔn)確稱取阿拉伯樹膠100 g，加800 mL水后煮沸至溶液透明，再稱取50 g活性碳（粉狀）加入上述溶液中，煮沸3 次，待溶液涼后加水定容至1 000 mL，4 ℃保存。

蒙脫石散混懸液的配制：取蒙脫石散粉末6 g加蒸餾水100 mL配制成質(zhì)量濃度為60 mg/mL的蒙脫石散混懸液，灌胃劑量為0.9 g/(kg·d)。

麻仁丸混懸液的配制：研碎麻仁丸，取6 g加入蒸餾水100 mL，制成質(zhì)量濃度60 mg/mL的麻仁丸混懸液，灌胃劑量為0.9 g/(kg·d)。

1.2 方法

1.2.1 青刺尖茶湯的制備

準(zhǔn)確稱取青刺尖茶75 g，以料液比1∶20（m/V）加入1 500 mL煮沸的蒸餾水，立即移入沸水浴中浸提，每10 min搖晃燒杯一次，浸提45 min立即過濾，茶渣用沸蒸餾水洗滌數(shù)次，濾液減壓濃縮后定容至500 mL，得質(zhì)量濃度為0.15 g/mL的青刺尖茶湯，按灌胃量0.3 mL/20 g計(jì)算，即得6.0 g/（kg·d）高劑量的青刺尖茶湯，稀釋制備1.0、2.0 g/（kg·d）的低劑量和中劑量青刺尖茶湯，冷藏備用。

1.2.2 動(dòng)物飼養(yǎng)

參照吳光杰等[14]的方法，制定實(shí)驗(yàn)方案：雄性昆明小鼠72 只，隨機(jī)分組裝籠，每籠6 只，飼養(yǎng)于相對(duì)濕度為64%，溫度為27 ℃的動(dòng)物房中，適應(yīng)性飼養(yǎng)3 d后進(jìn)行正式實(shí)驗(yàn)，每天每籠飼喂小鼠專用飼料90 g，供水120 mL，每天換水和墊料一次以確保小鼠生長(zhǎng)環(huán)境干凈舒適。隨機(jī)分成6 組，即空白組、模型組、陽性組和3 個(gè)劑量水平的給藥組，每組12 只，每組進(jìn)行不同的實(shí)驗(yàn)處理，測(cè)定相應(yīng)的指標(biāo)[15-16]，實(shí)驗(yàn)重復(fù)3 次。

1.2.3 動(dòng)物分組及給藥

根據(jù)預(yù)實(shí)驗(yàn)的結(jié)果，3 個(gè)給藥組小鼠分別灌胃1.0、2.0、6.0 g/（kg·d）的低、中和高劑量的青刺尖茶湯（相當(dāng)于人體推薦量的5、10、30 倍）；空白組和模型組均灌胃蒸餾水；陽性組灌胃0.9 g/（kg·d）的麻仁丸混懸液。各組灌胃量0.3 mL/20 g，每天1 次，連續(xù)7 d，實(shí)驗(yàn)前每只小鼠稱體質(zhì)量，實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)再稱一次。實(shí)驗(yàn)期間小鼠自由飲食，每日分別記錄各組小鼠的體質(zhì)量和排出糞便的性狀，并觀察小鼠實(shí)驗(yàn)前后進(jìn)食量的變化。

1.2.4 小鼠排便實(shí)驗(yàn)

末次給藥的當(dāng)天晚上，各組小鼠禁食但不限飲水16 h，除空白組小鼠灌胃同體積的蒸餾水外，其他組的小鼠分別灌胃0.9 g/kg蒙脫石散混懸液0.3 mL。30 min后，陽性組和實(shí)驗(yàn)處理組灌胃含相應(yīng)受試物的墨汁，空白組和模型組灌胃墨汁，同時(shí)開始計(jì)時(shí)。每只小鼠單獨(dú)飼養(yǎng)，自由飲水、攝食，觀察記錄每只小鼠首次排黑便的時(shí)間、5 h排便粒數(shù)并及時(shí)稱量排出糞便的濕質(zhì)量，再在100 ℃條件下干燥糞便至恒質(zhì)量，計(jì)算出糞便的含水量。

再選雄性小鼠72 只，動(dòng)物飼養(yǎng)分組及處理方式同

1.2.2 節(jié)和1.2.3節(jié)。

小鼠灌胃墨汁25 min后，頸椎脫臼處死，打開腹腔分離腸系膜，剪取上端自幽門、下端至回盲部的腸管，置于托盤上，輕輕將小腸拉成直線進(jìn)行測(cè)量，得到“小腸總長(zhǎng)度”，從幽門至墨汁前沿為“墨汁推進(jìn)長(zhǎng)度”，按下列公式計(jì)算墨汁推進(jìn)率。

式中：L0為墨汁推進(jìn)長(zhǎng)度/cm；L1為小腸總長(zhǎng)度/cm。

1.3 統(tǒng)計(jì)分析及結(jié)果判定

其他各組與空白組的體質(zhì)量比較采用t檢驗(yàn)的方法，用SPSS 13.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析[17]。在便秘模型成立的條件（P＜0.01）下，小鼠的首次排黑便所需時(shí)間、5 h內(nèi)排便粒數(shù)、糞便含水量和墨汁推進(jìn)率的顯著性分析先采用陽性組、給藥組與模型組間的t檢驗(yàn)，再對(duì)給藥組與陽性組進(jìn)行t檢驗(yàn)。

上述任何一項(xiàng)指標(biāo)顯陽性，可判定該受試物具有潤(rùn)腸通便的功能[18]。

工程高邊坡危害后果分析是通過對(duì)邊坡影響范圍內(nèi)的承災(zāi)體進(jìn)行識(shí)別，分析承災(zāi)體價(jià)值、災(zāi)害到達(dá)承災(zāi)體概率、承災(zāi)體時(shí)空概率、承災(zāi)體易損性，進(jìn)而估算人身傷害損失和財(cái)產(chǎn)損失[15]。

2 結(jié)果與分析

2.1 青刺尖茶湯對(duì)小鼠體質(zhì)量的影響

表1 腸運(yùn)動(dòng)實(shí)驗(yàn)前、后小鼠體質(zhì)量的比較（x±s）Table1 Mouse body weights on the first and seventh days of the bowel movement experiments (x ± s)

由表1可知，在小鼠腸運(yùn)動(dòng)實(shí)驗(yàn)中，各組小鼠的初始體質(zhì)量分別與空白組比較，均無顯著性差異（P＞0.05），說明腸運(yùn)動(dòng)實(shí)驗(yàn)的小鼠分組是均衡的。經(jīng)灌胃處理7 d后，各組的小鼠體質(zhì)量與空白組比較，無顯著性差異（P＞0.05），說明各受試物沒有影響小鼠體質(zhì)量的正常增加。

表2 排便實(shí)驗(yàn)前、后小鼠體質(zhì)量的比較（x±s）Table2 Mouse body weights on the first and last days of the defecation experimennttss ((x ± s)

由表2可知，在小鼠排便實(shí)驗(yàn)中，各組小鼠的初始體質(zhì)量分別與空白組進(jìn)行比較，均無顯著性差異（P＞0.05），說明排便實(shí)驗(yàn)的小鼠分組是均衡的。經(jīng)灌胃處理7 d后，各組的小鼠體質(zhì)量與空白組比較，也無顯著性差異（P＞0.05），說明各受試物沒有影響小鼠體質(zhì)量的正常增加。

2.2 青刺尖茶湯對(duì)小鼠排便的影響

由表3可知，小鼠排便實(shí)驗(yàn)中，與空白組比較，模型組的首次排黑便的時(shí)間、5 h內(nèi)排便粒數(shù)和糞便含水量均有極顯著性的差異（P＜0.01），表明小鼠便秘模型建立成功。與模型組相比，青刺尖茶湯的低、中和高劑量組小鼠的糞便粒數(shù)和糞便含水量有顯著性的差異（P＜0.05和P＜0.01），而首次排黑便所需時(shí)間減少，有明顯差異（P＜0.05和P＜0.01）。隨劑量的增加，青刺尖茶湯的排便效應(yīng)增加，呈一定的劑量依從性。統(tǒng)計(jì)分析表明：高劑量組的青刺尖茶湯對(duì)便秘小鼠的通便作用優(yōu)于陽性組，有顯著的差異（P＜0.05）。

表3 青刺尖茶湯對(duì)小鼠排便的影響（x±s）Table3 Effect off Prinsepia utilliiss tea on indices of defecation (x ± s)

2.3 青刺尖茶對(duì)便秘小鼠小腸蠕動(dòng)的影響

表4 青刺尖茶對(duì)小鼠小腸墨汁推進(jìn)率的影響（x±s）Table4 Effect off Prinsepia utiilliiss tea on intestinal ink propelling (x ± s)

由表4可知，模型組的墨汁推進(jìn)率與空白組差異極顯著（P＜0.01），說明便秘模型成立。青刺尖茶湯給藥組小鼠的墨汁推進(jìn)率均高于模型組，經(jīng)數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析發(fā)現(xiàn)，高、中、低劑量青刺尖茶湯給藥組小鼠的墨汁推進(jìn)率與便秘模型組比較，均有顯著性差異（P＜0.01），表明青刺尖茶湯具有促進(jìn)小鼠小腸蠕動(dòng)的作用。

3 討 論

本實(shí)驗(yàn)小鼠灌胃不同劑量的青刺尖茶湯7 d后，與模型組相比，低、中和高劑量組的小鼠小腸碳末推進(jìn)率得到顯著提高，排黑便時(shí)間也顯著地縮短，5 h排便粒數(shù)增加顯著，因此，可以認(rèn)為青刺尖茶湯對(duì)便秘模型小鼠具有潤(rùn)腸通便的作用。

目前對(duì)于便秘的治療主要依靠滲透性、容積性和潤(rùn)滑性類的瀉藥。滲透性和潤(rùn)滑性藥物可減輕部分患者便秘癥狀，但可能會(huì)伴隨一些副作用，也可能會(huì)形成藥物依賴等。實(shí)驗(yàn)過程中，青刺尖茶湯沒有對(duì)小鼠的體質(zhì)量造成影響，也沒有觀察到小鼠有腹瀉癥狀，并且實(shí)驗(yàn)前后小鼠進(jìn)食量差異不大，表明了其潤(rùn)腸通便作用的溫和性，在低劑量水平（1 g/（kg·d）），其潤(rùn)腸通便作用表現(xiàn)良好。目前對(duì)于青刺尖茶湯潤(rùn)腸通便的有效成分和機(jī)制還不清楚，還有待深入研究，為青刺尖茶湯開發(fā)成為保健飲品提供理論支持。

茶葉是世界三大軟飲料之一，在我國(guó)農(nóng)業(yè)經(jīng)濟(jì)中占據(jù)重要地位，2011年，我國(guó)茶葉產(chǎn)量排名世界第一， 達(dá)到163.32萬 t，占全球總量的38.49%[19]。近年來，隨著食品加工技術(shù)的發(fā)展及現(xiàn)代生活節(jié)奏的加快，茶制品多元化發(fā)展將會(huì)越來越受到人們的關(guān)注，尤其是功能性茶制品。本研究中的青刺尖茶是一種用青刺尖嫩葉制成的天然無任何添加劑的代用茶。青刺尖是云南等多民族習(xí)用中藥之一，在民間已有很悠久的習(xí)用歷史，青刺尖葉與車前草、海棠果一同煨服，有消炎、清涼、解毒作用；青刺尖葉搗碎擠出汁液服用，可排毒解毒；青刺尖嫩葉作為蔬菜或腌制成咸菜食用，有開胃消食、清熱去火、抑制口腔及腸道炎癥等作用；青刺尖果實(shí)、葉煮水洗腳，可預(yù)防和治療腳氣病。研究報(bào)道，青刺尖藥理作用主要表現(xiàn)在抑菌，抗炎，免疫調(diào)節(jié)、耐缺氧，調(diào)節(jié)血脂，降血糖，抑制血小板聚集等方面。青刺尖茶在我國(guó)云南麗江的納西族、白族、彝族、摩梭人等少數(shù)民族中具有悠久的延用歷史，這種茶飲能預(yù)防和治療各種痔瘡、便秘和肛周疾病。青刺尖茶具有很大的開發(fā)利用價(jià)值，將其開發(fā)為茶制品是很有意義的。

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Laxative Effect of Prinsepia utilis Tea on Mouse Constipation Model

FANG Yu1, LIU Gang1,2,*, ZHANG Xiao-yu1,2, ZHANG Hong1,2
(1.College of Life Sciences, Sichuan Normal University, Chengdu 610101, China; 2. Institute of Phytochemistry, Sichuan Normal University, Chengdu 610101, China)

Objective: To explore the laxative effect of Prinsepia utilis tea (PUT) infusion on constipated mice. Methods: Male Kunming mice were randomly divided into control group, model control group, positive control group and low, medium- and high-dose treatment groups which were administered with PUT infusion at 1, 2 and 6 g/(kg·d)) for 7 days, respectively. The mice from both the blank control and model control groups were administered with distilled water at a volume of 0.3 mL/20 g for 7 days, while those from the positive control group were administered with Marenwan at a dose of 0.9 g/(kg·d) for 7 days. After the administration period, the time of the first black feces excretion and the number of feces granules within 5 h were recorded. Fecal water content and ink propelling rates were measured. Results: All the tested parameters differed significantly between each dose of PUT infusion and either the model group or the positive control group. PUT could markedly shorten the time of the first black feces excretion, increase the number of feces granules within 5 h. In addition, water content of mouse feces and ink propelling rates also revealed a significant increase. Conclusion: Prinsepia utilis tea has an obvious laxative effect.

Prinsepia utilis tea; defecation; mouse; constipation

S567.1；TS272.5

A

1002-6630（2014）11-0265-04

10.7506/spkx1002-6630-201411053

2013-06-29

方玉（1989—），女，碩士研究生，研究方向?yàn)樯锘瘜W(xué)與分子生物學(xué)、植物化學(xué)。E-mail：jmtx613@163.com

*通信作者：劉剛（1968—），男，副教授，碩士，研究方向?yàn)樘烊恢参锍煞址蛛x及其功能。E-mail：rh682@sohu.com