阿維菌素和甲維鹽對(duì)家蠶的毒性測(cè)定

沈忠明，孫海燕，戴建忠，陳偉國(guó)

（1.許村鎮(zhèn)農(nóng)技水利服務(wù)中心，浙江海寧314409；2.海寧市蠶桑技術(shù)服務(wù)站，浙江 海寧 314400）

阿維菌素和甲維鹽對(duì)家蠶的毒性測(cè)定

沈忠明1，孫海燕2，戴建忠2，陳偉國(guó)2

（1.許村鎮(zhèn)農(nóng)技水利服務(wù)中心，浙江海寧314409；2.海寧市蠶桑技術(shù)服務(wù)站，浙江 海寧 314400）

本文測(cè)定了阿維菌素和甲氨基阿維菌素苯甲酸鹽（簡(jiǎn)稱“甲維鹽”）4種殺蟲劑制劑對(duì)家蠶的急性食下毒性和殘毒期，結(jié)果表明：對(duì)3齡起蠶的LC50值分別為阿維菌素乳油7.2343×10-4mg/L，阿維菌素水乳劑7.6512×10-4mg/L，甲維鹽微乳劑8.5940×10-4mg/L，甲維鹽乳油14.0112×10-4mg/L。阿維菌素和甲維鹽4種制劑的相同質(zhì)量濃度（13.33 mg/L）稀釋液噴灑桑樹，在桑葉上的殘毒期分別為3.2%阿維菌素乳油2400倍約為50 d，1.8%阿維菌素水乳劑1350倍、2.3%甲維鹽乳油1725倍約為60 d，2.2%甲維鹽微乳劑1650倍＞60 d；阿維菌素類4種制劑對(duì)家蠶的急性食下毒性極強(qiáng)，處理間差異較小，但在桑葉上的殘毒期很長(zhǎng)，處理間差異較大。

阿維菌素；甲維鹽；家蠶；毒性

阿維菌素（Avermectin）是由灰色鏈霉菌（Strepto?myces avermitilis）發(fā)酵產(chǎn)生的，具有殺蟲、殺螨、殺線蟲活性的十六元大環(huán)內(nèi)酯化合物，被作為殺蟲劑在農(nóng)業(yè)和畜牧業(yè)中廣泛使用。為提高活性、擴(kuò)大抗蟲譜和降低毒性，通過誘變、生物轉(zhuǎn)化和化學(xué)修飾等方法，產(chǎn)生了阿維菌素類衍生物，目前已商品化的有伊維菌素（Ivermectin）、甲氨基阿維菌素苯甲酸鹽（又名埃瑪菌素，簡(jiǎn)稱甲維鹽，Emamectin Benzoate）、埃普里諾菌素（又名乙酰氨基阿維菌素，Eprinomectin）、和多拉菌素（Doramectin）等4種化學(xué)結(jié)構(gòu)改造產(chǎn)物［1-2］，其中阿維菌素、伊維菌素、甲維鹽主要用作農(nóng)作物殺蟲劑［3］。隨著對(duì)殺蟲劑的安全性和環(huán)保性要求提高，從傳統(tǒng)的乳油制劑向微乳劑和水乳劑等水性化農(nóng)藥劑型發(fā)展［4］，由此，使得阿維菌素類殺蟲劑的產(chǎn)品類型越來越豐富。盡管近年來阿維菌素類殺蟲劑對(duì)家蠶的毒性研究報(bào)道較多［5-10］，但涉及的殺蟲劑劑型種類不多，且以急性毒性研究為主，結(jié)合在桑葉上的殘毒期測(cè)定較少［9-10］。為此，我們比較了阿維菌素和甲維鹽4種制劑對(duì)家蠶的急性毒性和桑葉上的殘毒期，為該類殺蟲劑在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)上的合理使用和對(duì)養(yǎng)蠶生產(chǎn)的安全性評(píng)價(jià)提供參考依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 供試材料

供試農(nóng)藥：3.2%阿維菌素乳油，浙江錢江生物化學(xué)股份有限公司生產(chǎn)，農(nóng)藥登記證號(hào)PD20110266；1.8%阿維菌素水乳劑，浙江錢江生物化學(xué)股份有限公司生產(chǎn)，農(nóng)藥登記證號(hào)PD20110261；2.3%甲維鹽乳油，浙江錢江生物化學(xué)股份有限公司生產(chǎn)，農(nóng)藥登記證號(hào)PD20096698；2.2%甲維鹽微乳劑，浙江海正化工股份有限公司生產(chǎn)，農(nóng)藥登記證號(hào)PD20110495。

家蠶品種：白玉×秋豐，浙江省海寧市新興蠶種制造有限公司生產(chǎn)。

桑樹品種：海寧市鹽官鎮(zhèn)城北村郭建鑫農(nóng)戶的桑園。強(qiáng)桑1號(hào)，3年生，中干偏低養(yǎng)成，栽植密度為每667 m2桑園栽植800株。

1.2 對(duì)家蠶的急性食下毒性測(cè)定

經(jīng)預(yù)備試驗(yàn)，將阿維菌素乳油、阿維菌素水乳劑、甲維鹽乳油、甲維鹽微乳劑等4種殺蟲劑均稀釋成5～7個(gè)梯度濃度，取適熟桑葉分別浸入不同處理的藥液中1 min，取出后自然晾干，置于保鮮盒內(nèi)備用，各處理區(qū)用20頭3齡起蠶供試，在26.5±1℃、相對(duì)濕度75%～85%的恒溫室內(nèi)飼養(yǎng)，24 h后改用新鮮無毒桑葉繼續(xù)飼養(yǎng)至4齡餉食，每天調(diào)查幼蟲中毒死亡率，以清水處理為空白對(duì)照，3次重復(fù)。采用DPS統(tǒng)計(jì)軟件對(duì)藥液質(zhì)量濃度對(duì)數(shù)與幼蟲死亡率概率值進(jìn)行線性回歸分析［11］，求出致死中濃度（LC50）和95%置信限。

1.3 在桑葉上的殘毒期試驗(yàn)

將阿維菌素類4種供試殺蟲劑均稀釋成有效成份為13.33 mg/L的藥液，即3.2%阿維菌素乳油2400倍，1.8%阿維菌素水乳劑1350倍，2.3%甲維鹽乳油1725倍，2.2%甲維鹽微乳劑1650倍。每種藥液分別噴10株桑樹，枝條頂端最大葉位以上用標(biāo)簽標(biāo)記，防止采摘未噴藥的桑葉。噴藥后15 d開始每隔5 d采摘桑葉飼喂3齡起蠶，直至未見中毒蠶出現(xiàn)，分別于噴藥后15 d、20 d、25 d、30 d、35 d、40 d、45 d、50 d、55 d、60 d采葉飼喂3齡起蠶，共10批供試蠶，每個(gè)批持續(xù)喂飼1個(gè)齡期，以蠶能就眠蛻皮為正常，至4齡起蠶時(shí)統(tǒng)計(jì)中毒蠶頭數(shù)，各試驗(yàn)小區(qū)30頭蠶，3次重復(fù)。

1.4 對(duì)家蠶的中毒癥狀觀察

將桑葉分別浸入有效成份均為13.33 mg/L的阿維菌素類4種供試殺蟲劑稀釋液中1 min，取出后自然晾干，喂飼3齡起蠶和5齡第3 d蠶，觀察記錄中毒癥狀。

2 結(jié)果與分析

2.1 阿維菌素和甲維鹽對(duì)家蠶的急性食下毒性

采用浸葉法測(cè)定阿維菌素類4種殺蟲劑對(duì)3齡起蠶的急性食下毒性，試驗(yàn)結(jié)果見表1。對(duì)家蠶的毒性大小依次為：阿維菌素乳油的LC50值7.2343×10-4mg/L＞阿維菌素水乳劑的LC50值7.6512×10-4mg/L＞甲維鹽微乳劑的LC50值8.5940×10-4mg/L＞甲維鹽乳油的LC50值14.0112×10-4mg/L，極差為6.7769×10-4mg/L，即供試的阿維菌素和甲維鹽4種制劑對(duì)3齡起蠶的急性食下毒性均極強(qiáng)，但不同制劑產(chǎn)品的毒性差異較小。

2.3 阿維菌素和甲維鹽對(duì)家蠶的殘毒期

阿維菌素和甲維鹽4種制劑稀釋藥液噴于桑樹后間隔不同時(shí)間采葉喂飼3齡起蠶，統(tǒng)計(jì)中毒死亡率，結(jié)果見表2。3.2%阿維菌素乳油2400倍，噴藥后20 d內(nèi)死亡率為100%，噴藥后25 d～45 d的死亡率逐漸下降，50 d后無中毒死亡蠶；1.8%阿維菌素水乳劑1350倍，噴藥后25 d內(nèi)死亡率為100%，噴藥后30 d～55 d的死亡率逐漸下降，60 d后無中毒死亡蠶；2.2%甲維鹽微乳劑1650倍噴藥后40 d內(nèi)死亡率為100%，噴藥后60 d的死亡率仍達(dá)54.44%；2.3%甲維鹽乳油1725倍，對(duì)3齡起蠶的殘毒表現(xiàn)與1.8%阿維菌素水乳劑1350倍相似。

表1 阿維菌素和甲維鹽4種制劑對(duì)3齡起蠶的急性食下毒性測(cè)定Table 1 The acute peroral toxicity determination of 4 insecticides on the third period silkworm

表2 阿維菌素和甲維鹽4種制劑對(duì)3齡起蠶的殘毒期測(cè)定Table 1 The residual time determination of 4 insecticides on the third period silkworm

試驗(yàn)結(jié)果表明，阿維菌素和甲維鹽4種制劑在桑葉上的殘毒期均很長(zhǎng)，3.2%阿維菌素乳油2400倍約為50 d，1.8%阿維菌素水乳劑1350倍、2.3%甲維鹽乳油1725倍約為60 d，2.2%甲維鹽微乳劑1650倍＞60 d。

2.3 家蠶的中毒癥狀

阿維菌素和甲維鹽4種制劑對(duì)家蠶的中毒癥狀和中毒反映時(shí)間基本一致，這與不同種類的急性食下毒性比較接近的結(jié)果相符。家蠶食下質(zhì)量濃度均為13.33 mg/L的4種供試殺蟲劑藥液處理的桑葉后，3齡起蠶約1 h后表現(xiàn)出拒食，靜伏不動(dòng)；未見明顯吐液或吐液量極少；部分蠶死亡前后尾部向背彎曲，側(cè)倒；12 h左右全部死亡，體色清白，蠶體軟癟。5齡第3 d蠶約1 h后食桑明顯減緩，2 h后出現(xiàn)靜伏，拒食；可見少量吐液，約12 h后死亡，蠶體軟癟，尾部有明顯縮皺。

3 結(jié)論和討論

隨著阿維菌素類衍生物及其新劑型的開發(fā)，阿維菌素類殺蟲劑作為高效無公害生物農(nóng)藥在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中的應(yīng)用仍將擴(kuò)大，對(duì)養(yǎng)蠶生產(chǎn)安全的不利影響隨之增加，因此，正確評(píng)價(jià)阿維菌素類殺蟲劑對(duì)家蠶的毒性及安全性顯得更加重要。

本試驗(yàn)結(jié)果表明，阿維菌素和甲維鹽4種不同制劑產(chǎn)品對(duì)家蠶的急性食下毒性均極強(qiáng)，對(duì)3齡起蠶的LC50值為7.2343×10-4～14.0112×10-4mg/L，甚至高于擬除蟲菊酯類和殺蟲雙等農(nóng)藥［12-14］，屬于目前大量使用的對(duì)家蠶毒性等級(jí)最高的殺蟲劑品種。本試驗(yàn)測(cè)定阿維菌素和甲維鹽4種制劑產(chǎn)品在桑葉上的殘毒期，質(zhì)量濃度均為13.33 mg/L的稀釋液處理的桑葉，對(duì)家蠶的殘毒期最短的約50 d，最長(zhǎng)的經(jīng)過60 d后對(duì)家蠶的死亡率仍超過50%。

供試的阿維菌素和甲維鹽4種制劑對(duì)家蠶的急性食下毒性差異不大，但在桑葉上的殘毒期則相差很大，由此可見，阿維菌素類殺蟲劑的急性食下毒性與殘毒期的相關(guān)性不強(qiáng)，因此，不能以急性食下毒性結(jié)果來評(píng)價(jià)其對(duì)家蠶的風(fēng)險(xiǎn)大小，也不能以某種阿維菌素類殺蟲劑的殘毒期來推測(cè)其它不同種類或劑型，以避免由此造成的家蠶中毒損失。

由于影響阿維菌素在桑葉上殘毒期長(zhǎng)短的因素很多，其中光照條件對(duì)桑葉上阿維菌素的毒性消解十分明顯［15-16］。因此，在判斷阿維菌素類殺蟲劑污染桑園時(shí)也必須考慮類似因素，在桑樹生長(zhǎng)旺盛期，枝葉生長(zhǎng)茂盛，光照強(qiáng)度弱，會(huì)使阿維菌素類殺蟲劑在桑葉上的殘留毒性消解減慢。

阿維菌素類殺蟲劑的應(yīng)用趨勢(shì)是制劑含量逐步提高，種類和劑型不斷增加，混配應(yīng)用十分普及，因此，對(duì)于蠶桑地區(qū)防止阿維菌素類殺蟲劑引起的家蠶中毒必須引起高度重視。

［1］徐映明，朱文達(dá).農(nóng)藥問答（第四版）［M］.北京：化學(xué)工業(yè)出版社，2005：154.

［2］張毅，胡西洲.阿維菌素及其衍生物的研究進(jìn)展［J］.湖北農(nóng)業(yè)科學(xué)，2007，46（5）：845～848.

［3］鄭嵐，王梅，段勁生，等.阿維菌素類農(nóng)藥的殘留研究綜述［J］.現(xiàn)代農(nóng)業(yè)科技，2011，（11）：169～170.

［4］華乃震.阿維菌素劑型及水乳劑的開發(fā)和前景［J］.世界農(nóng)藥，2009，31（2）：33～37.

［5］馬惠，姜輝，陶傳江等.27種農(nóng)藥對(duì)家蠶的毒性評(píng)價(jià)研究［J］.農(nóng)藥學(xué)學(xué)報(bào)，2005，7（2）：156～159.

［6］石緒根，王冕，司樹鼎，等.三類生物源農(nóng)藥及其混配制劑對(duì)家蠶的毒性與評(píng)價(jià)［J］.蠶業(yè)科學(xué)，2009，35（2）：345～349.

［7］吳聲敢，王強(qiáng)，趙學(xué)平，等.阿維菌素和氟蟲腈對(duì)家蠶毒性與安全性評(píng)價(jià)研究［J］.浙江農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào)，2004，16（5）：309～312.

［8］李保同.六種殺蟲劑對(duì)家蠶的毒性與安全評(píng)價(jià)研究［J］.農(nóng)藥學(xué)學(xué)報(bào)，2001，3（3）：83～85.

［9］白錫川，楊海江，沈柏鶴，等.蟲螨克在桑園治蟲上應(yīng)用的可行性研究［J］.植物保護(hù)，2001，27（1）：42～43.

［10］陳偉國(guó)，朱燕，董瑞華，等.不同企業(yè)生產(chǎn)的阿維菌素乳油對(duì)家蠶的急性毒性和殘毒期比較［J］.中國(guó)蠶業(yè)，2012，33（2）：39～42.

［11］唐啟義，馮明光.DPS數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)［M］.北京：科學(xué)出版社，2007：327～330.

［12］石緒根，王冕，司樹鼎，等.三類生物源農(nóng)藥及其混配制劑對(duì)家蠶的毒性與評(píng)價(jià)［J］.蠶業(yè)科學(xué)，2009，35（2）：345～349.

［13］魯興萌，周勤，周金錢，等.微量氯氰菊酯對(duì)家蠶的毒性［J］.農(nóng)藥學(xué)報(bào)，2003，5（4）：42～46.

［14］孫新友，袁善奎，林榮華，等.91種農(nóng)藥制劑對(duì)家蠶的急性毒性研究［J］.農(nóng)藥科學(xué)與管理，2011，32（8）：21～25.

［15］陳偉國(guó)，孫海燕，董瑞華，等.環(huán)境因子對(duì)4種農(nóng)藥在桑葉上殘留毒性消解動(dòng)態(tài)的生物測(cè)定［J］.中國(guó)蠶業(yè)，2013，34（1）：25～28.

［16］吳傳萬，杜小鳳，王偉中，等.阿維菌素光分解及其光穩(wěn)定劑的篩選［J］.農(nóng)藥，2006，45（12）：828～830.

Determination of Silkworm Toxicity of Avermectin and Emamectin Benzoate

SHEN Zhong-ming1,SUN Hai-yan2,DAI Jian-zhong2,CHEN Wei-guo2
(1.Xucun Agriculture and Water Conservancy Service Center,Haining 314409 Zhejiang,China;
2.Haining Sericultural Technology Service Stations,Haining 314400 Zhejiang,China）

In this paper,the acute peroral toxicity and residual times of 4 insecticides with Avermectin and Emamectin Benzoate preparations were determined.The results showed that the LC50on the third period silkworm were 7.2343×10-4mg/L of Avermectin EC,7.6512×10-4mg/L of Avermectin EW,8.5940×10-4mg/L of Emamectin Benzoate Microemulsion and 14.0112×10-4mg/L of Emamectin Benzoate Emulsifiable Concentrate.The same concentration(13.33 mg/L)of 4 di?luted preparations with Avermectin and Emamectin Benzoate were sprayed on the mulberry,and the residual time were 50 d of 2400 times'3.2%Avermectin EC,60 d of 1350 times'1.8%Avermectin EW and 1725 times'2.3%Emamectin Benzoate Emulsifiable Concentrate,and more than 60 d of 1650 times'2.2%Emamectin Benzoate Microemulsion.It was concluded that the 4 Avermectin preparations were extremely toxic on the acute peroral toxicity,and the residual times on the mulberry leaves were very long.

Avermectin;Emamectin Benzoate;silkworm;toxicity

S884.9+6

A

0258-4069［2014］01-015-04

沈忠明（1967-），男，浙江海寧人，農(nóng)藝師，主要從事蠶桑技術(shù)推廣工作。E-mail:tsycom@163.com

陳偉國(guó)，推廣研究員。E-mail:bscwg@163.com