應用氣相色譜法測定冰硼散中樟腦的含量

張 輝，陳文秋，余敏靈，薛 瓊

(1.四川省醫(yī)學科學院·四川省人民醫(yī)院皮膚病性病研究所，四川 成都610031;2.四川省樂山市食品藥品檢驗所，四川 樂山614000)

冰硼散是由冰片、硼砂、朱砂、玄明粉組成的中藥成方制劑，收載于《中國藥典》2010 版一部。其功能主治為清熱解毒，消腫止痛。用于熱毒蘊結(jié)所致的咽喉疼痛、牙齦腫痛、口舌生瘡［1］，也有局部外用治療宮頸糜爛和云南白藥加冰硼散調(diào)菜油外擦治療帶狀瘡疹的報道［2，3］，但無冰硼散中樟腦定量分析的報道。處方中的冰片具有開竅醒神，清熱止痛功效，《中國藥典》2010 版一部對冰片中樟腦的含量做了限量規(guī)定［1］，測定樟腦的含量對評價冰硼散的質(zhì)量有一定的臨床意義。參閱相關(guān)文獻［4～6］，本文采用毛細管氣相色譜法對冰硼散中的樟腦進行了含量測定，為冰硼散的質(zhì)量控制提供一種可行方法。

1 材料與方法

1.1 儀器與試藥 浙江福立分析儀器有限公司GC 9750 氣相色譜儀;PEG 2000 石英毛細管柱(30 m×0.25 mm×0.25 μm);XS 205 電子天平(SETTLER公司);FID 檢測器;樟腦對照品來源于中國藥品生物制品檢定所(批號110747-200507);冰硼散樣品由泉州市靈源藥業(yè)有限公司提供(批號:100907、100923、101025。規(guī)格:每瓶重0.6 g)。陰性對照樣品所用原料均符合藥用要求;其余試劑均為分析純。

1.2 方法 ①對照品溶液制備:精密稱取樟腦對照品60.00 mg，置100 ml 量瓶中，加乙酸乙酯溶解并稀釋至刻度，搖勻，作為對照品貯備液。②供試品溶液和陰性對照液制備:取冰硼散適量，研細，精密稱取2.0136 g，置具塞錐形瓶中，精密加乙酸乙酯10 ml，精密稱定重量，超聲處理15 min，再精密稱定重量，加醋酸乙酯補足減失的重量，用0.45 μm 微孔濾膜濾過，取續(xù)濾液作為供試品溶液。另取處方量藥品(除冰片外)，按質(zhì)量標準規(guī)定工藝制成陰性對照品制劑，精密稱取陰性對照品制劑2.1012 g，置具塞錐形瓶中，精加乙酸乙酯10 ml，精密稱定重量;超聲處理15 min，再精密稱定重量，用乙酸乙酯補足減失的重量，用0.45 μm 微孔濾膜濾過，取續(xù)濾液作為陰性對照溶液。③色譜條件:PEG2000 石英毛細管柱(30 m× 0.25 mm×0.25 μm)，柱溫:140 ℃。載氣N2;進樣口溫度180 ℃，流速1.2 ml/min;進樣量:1 ∶l，分流比15 ∶1。FID 檢測器溫度:180 ℃。④系統(tǒng)適應性試驗:精密量取對照品貯備液5 ml，置10 ml 量瓶中，加乙酸乙酯稀釋至刻度，搖勻，作為對照品供試溶液，取對照品供試溶液、供試品溶液和陰性對照溶液照第③項色譜條件分別進樣，結(jié)果繪圖。⑤線性關(guān)系:精密量取樟腦對照品貯備液1、2.5、4、5.5、7 和8.5 ml，分別置6 個10 ml 量瓶中，加乙酸乙酯稀釋至刻度，搖勻，分別吸取上述溶液各1 μl 注入氣相色譜儀中，按第③項色譜條件進行測定。以樟腦峰面積(A)為縱坐標與樟腦濃度(μg/ml)為橫坐標作回歸曲線。⑥精密度試驗:精密量取對照品貯備液5 ml，分置6 個10 ml 量瓶中，加乙酸乙酯稀釋至刻度，搖勻，按第③項色譜條件，分別吸取上述溶液各1 μl 注入氣相色譜儀中，進行測定。連續(xù)進樣6 次。⑦重現(xiàn)性試驗:取冰硼散(批號:100907 每1 g 冰硼散含樟腦0.436 mg)適量，研細，稱取細粉適量(約2 g)，共6 份，精密稱定，分置6 個具塞錐形瓶中，精加乙酸乙酯10 ml，精密稱定重量，超聲處理15 min，再精密稱定重量，加乙酸乙酯補足減失的重量;用0.45 μm 微孔濾膜濾過，取續(xù)濾液作為供試品溶液。分別吸取上述溶液各1 μl注入氣相色譜儀中，按第③項色譜條件進行測定。⑧穩(wěn)定性試驗 取供試品溶液于0、2、4、6、8、12 小時測定。⑨加樣回收試驗:取冰硼散(批號:100907 每1 g 冰硼散含樟腦0.436 mg)適量，研細，稱取9 份(每份約1 g)，精密稱定，分別置于9 個10 ml 量瓶中，精密加入樟腦對照品貯備液0.60、0.60、0.60、0.75、0.75、0.75、0.90、0.90 和0.90 ml，分別加乙酸乙酯9.40、9.40、9.40、9.25、9.25、9.25、9.10、9.10 和9.10 ml，精密稱定重量，超聲處理15 min，再精密稱定重量，加乙酸乙酯補足減失的重量，用0.45 μm 微孔濾膜濾過，取續(xù)濾液作為供試品溶液。按第③項色譜條件測定，結(jié)果用第⑤線性關(guān)系回歸方程計算。⑩樣品含量測定:取冰硼散(批號:100907、100923、101025)適量，研細，稱取約1 g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精加乙酸乙酯10 ml，精密稱定重量;超聲處理15 min，再精密稱定重量，用乙酸乙酯補足減失的重量，用0.45 μm 微孔濾膜濾過，作為供試品溶液。按第③項色譜條件測定，用第⑤線性關(guān)系回歸方程含量。

2 結(jié)果

2.1 系統(tǒng)適應性 見圖1。供試品溶液色譜圖中有與對照品溶液色譜圖中樟腦色譜峰相對應的色譜峰，并且該色譜峰與其他色譜峰的分離度大于1.5，理論塔板數(shù)大于2000;而陰性對照溶液無這一色譜峰。

2.2 線性關(guān)系 線性關(guān)系回歸曲線結(jié)果:y =79.7867x+10.0125，r=0.9999(n=6)。表明樟腦進樣量在60 ～510 ng 線性關(guān)系良好。

2.3 精密度 精密度試驗結(jié)果樟腦的平均峰面積為23936，RSD 為1.33%。

2.4 重現(xiàn)性 重現(xiàn)性試驗結(jié)果樟腦平均峰面積(折算為樣品稱量2.0000 g 時)為7002，RSD 為1.78%。

2.5 穩(wěn)定性 穩(wěn)定性試驗結(jié)果樟腦峰面積變化不大，RSD 為1.96%，表明樣品溶液在室溫條件下12 h 內(nèi)穩(wěn)定，能滿足含量測定要求。

2.6 加樣回收試驗結(jié)果 回收率平均98.9%，RSD 1.2，見表1。

圖1 氣相色譜圖 a:陰性對照;b:對照品;c:樣品;1.樟腦

表1 樟腦回收率試驗結(jié)果 (n=6)

2.7 樣品含量 見表2。

表2 樣品含量測定結(jié)果

3 討論

①該方法快速，準確，被測溶液穩(wěn)定，適合于冰硼散中樟腦的定量分析，可作為冰硼散中樟腦限量檢查的方法。②樟腦作為合成龍腦的一種雜質(zhì)，本文對樟腦定量檢測的研究可間接考察制劑所用原料質(zhì)量水平，從而促進制劑質(zhì)量的提高。

［1］國家藥典委員會.《中華人民共和國藥典》2010 年版一部［S］.北京:中國醫(yī)藥科技出版社，2010:702.

［2］師彩梅，賈守月.局部外用冰硼散治療宮頸糜爛療效觀察與分析［J］.基層醫(yī)學論壇，2010，14(8 月中旬刊):709.

［3］朱必建，劉劍秋. 云南白藥加冰硼散調(diào)菜油外擦治療帶狀瘡疹30 例療效觀察［J］.實用中西醫(yī)結(jié)合臨床，2010，10(6):13.

［4］劉亞梅，蒲旭峰，張良.毛細管氣相色譜法測定青蒿及青蒿油中石竹烯和樟腦的含量［J］.華西藥學雜志，2007，22(2):218-220.

［5］周剛，王巨才，禹鳳英，等.毛細管氣相色譜法測定復方薄荷腦滴鼻液中薄荷腦和樟腦的含量［J］. 解放軍藥學學報，2006，22(2):150-152.

［6］閻正，陳培云，曹照真，等.毛細管柱氣相色譜法測定中藥膏藥中樟腦、薄荷腦、龍腦及異龍腦含量［J］.理化檢驗手冊-化學分冊，2008，44(12):1196-1198.