α-羥丁酸脫氫酶檢測對非霍奇金淋巴瘤診斷及預(yù)后的意義*

楊海平 陳 琳 魏旭東 米瑞華 尹青松 杜建偉

非霍奇金淋巴瘤（non-Hodgkin's lymphoma,NHL）是起源于淋巴組織的一類惡性增殖性疾病。乳酸脫氫酶（LDH）是一種糖酵解酶，廣泛存在于人體組織內(nèi)。β2-微球蛋白（β2-MG）是細(xì)胞組織相容性抗原的一部分，主要由淋巴細(xì)胞合成。人們發(fā)現(xiàn)在NHL患者血清中LDH與β2-MG水平升高并于1993年將LDH作為獨(dú)立預(yù)后因素，將血清LDH水平納入NHL國際預(yù)后指數(shù)模型。α-羥丁酸脫氫酶（α-HBDH）是LDH的同功酶，已經(jīng)發(fā)現(xiàn)在急性白血?。?］、多發(fā)性骨髓瘤［2］等惡性血液疾病中升高。但NHL中α-HBDH的相關(guān)研究國內(nèi)外鮮見報(bào)道。本文回顧性分析了2011年11月至2012年10月本院診治的104例NHL患者血清α-HBDH情況，報(bào)道如下。

1 材料與方法

1.1 病例

選擇鄭州大學(xué)附屬腫瘤醫(yī)院血液科2011年11月至2012年10月收治的104例NHL患者，所有患者均經(jīng)病理組織學(xué)確診，采用CT、彩超、PET-CT等輔助檢查以明確分期，骨髓細(xì)胞學(xué)檢查以明確是否有骨髓累及，病理分型按世界衛(wèi)生組織淋巴組織腫瘤分類，臨床分期采用Ann Arbor分期系統(tǒng)。入組患者分別按年齡（＞60歲、≤60歲）、性別、疾病分期（Ⅰ/Ⅱ期、Ⅲ/Ⅳ期）和病理類型（惰性、侵襲性）進(jìn)行分組，患者中DLBCL36例，MCL12例，F(xiàn)L13例，NK/T28例，其他病理類型15例（表1）。因心功能異常時(shí)α-HBDH亦會(huì)升高，故同時(shí)檢測患者肌酸激酶（CK）和肌酸激酶同工酶（CK-MB）以觀察心功能，排除CK及CK-MB異常及肝腎功能異常的患者?；颊呋?～3個(gè)周期后檢測上述指標(biāo)以評估LDH、α-HBDH及β2-MG隨著腫瘤負(fù)荷下降而變化的趨勢。15例患者采用R-CHOP方案化療，其余患者均采用CHOP方案化療。正常對照標(biāo)本80例來自本院健康體檢者，排除腫瘤、心肺肝腎功能異常等可能引起LDH、α-HBDH異常的疾病，未檢測血清β2-MG水平，只進(jìn)行血清α-HBDH、LDH比較。

1.2 檢測方法

采集標(biāo)本前經(jīng)過患者知情同意，于入院后次日空腹采集靜脈血3 mL，不抗凝，1 h內(nèi)送檢。將標(biāo)本離心后取血清，血清采用羅氏P800全自動(dòng)生化分析儀檢測α-HBDH、LDH、β2-MG。操作方法詳見操作手冊。正常參考范圍α-HBDH為72～182 U/L，LDH為109～245 U/L，β2-MG為0.8～2.2 mg/L。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)使用SPSS 18.0軟件，治療前后的觀察指標(biāo)值（血清LDH、α-HBDH及β2-MG水平）與正常人指標(biāo)值的比較采用兩獨(dú)立樣本的t檢驗(yàn)。治療前后的觀察指標(biāo)值比較采用配對資料的t檢驗(yàn)。Ⅰ/Ⅱ期與Ⅲ/Ⅳ期的觀察指標(biāo)升高陽性率的比較采用χ2檢驗(yàn)。相關(guān)性分析采用秩相關(guān)進(jìn)行檢驗(yàn)。P＜0.05為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 α-HBDH與疾病分期、腫瘤惡性程度的關(guān)系

所有NHL患者檢測血清α-HBDH水平，34.6%（36/104）的患者血清α-HBDH升高，Ⅲ/Ⅳ期患者升高比例為39.1%（25/64），明顯高于Ⅰ/Ⅱ期患者升高比例 17.5%（7/40）；Ⅲ/Ⅳ期組α-HBDH 絕對值為（222.73±125.03）U/L，明顯高于 I/II期組（172.24±104.13）U/L。侵襲性淋巴瘤患者中α-HBDH升高比例35.5%（27/76）亦高于惰性淋巴瘤患者32.1%（9/28）；侵襲性淋巴瘤患者血清α-HBDH絕對值為（205.98±114.00）U/L，亦明顯高于惰性淋巴瘤患者該值（153.51±40.11）U/L。但在不同年齡及性別的患者中，HBDH升高率及血清絕對值無明顯差異（表2）。

2.2 NHL患者與健康人群血清α-HBDH水平的比較

正常對照的血清α-HBDH均在正常范圍內(nèi)，均值為（120.06±15.11）U/L。淋巴瘤患者α-HBDH明顯升高為（323.62±114.74）U/L，化療2～3個(gè)療程后表達(dá)水平下降，為（155.92±35.70）U/L，但仍高于正常對照組，三者之間有有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（表3）。

表1 患者資料Table 1 Basic characteristics of patients with NHL

表2 患者血清α-HBDH、LDH及β2-MG水平比較 （±s）Table 2 Comparison of serum α-HBDH,LDH,and β2-MG levels of patients with NHL （±s）

表2 患者血清α-HBDH、LDH及β2-MG水平比較 （±s）Table 2 Comparison of serum α-HBDH,LDH,and β2-MG levels of patients with NHL （±s）

FactorsⅠ/Ⅱ stageⅢ/Ⅳ stage P Indolent Aggressive P＞60 years old≤60 years old P Male Female P HBDH（U/L）172.24±104.13 222.73±125.03 0.036 153.51±40.11 205.98±114.00 0.047 176.52±71.54 211.11±126.97 0.549 207.93±124.24 179.63±82.24 0.449 LDH（U/L）240.11±149.27 298.04±145.60 0.230 212.93±68.07 287.59±160.05 0.024 249.29±105.98 287.83±207.94 0.685 286.98±163.29 247.75±110.63 0.453 β2-MG（mg/L）2.66±1.13 3.47±1.65 0.005 2.77±1.18 3.05±1.44 0.185 4.24±2.09 2.58±0.80＜0.001 3.36±1.80 2.71±0.85 0.292

2.3 血清α-HBDH、LDH、β2-MG水平與緩解率

36例血清α-HBDH值升高的NHL患者中，獲得緩解和部分緩解的共有24例，總有效率為66.7%，α-HBDH正常的患者的總有效率為85.3%（58/68）（P=0.02，表1，圖1）。

LDH結(jié)果與α-HBDH類似，35.6%（37/104）的NHL患者LDH升高，除不同分期之間未發(fā)現(xiàn)顯著性差異之外（P=0.23），余統(tǒng)計(jì)學(xué)處理結(jié)果與α-HBDH高度一致，即與病癥惡性程度呈正相關(guān)，與年齡及性別無關(guān)（表1、2，圖2）。

59.6%（62/104）患者血清β2-MG升高，Ⅲ/Ⅳ期患者升高比例高于Ⅰ/Ⅱ期患者，其血清絕對值在不同分期之間差異明顯（P=0.005），但其絕對值在不同病理類型組之間無顯著性差異（P=0.185），患者化療2～3個(gè)周期后，β2-MG水平下降但化療前后無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P=0.153，圖3）。

對α-HBDH與LDH、β2-MG進(jìn)行相關(guān)性分析，均具有明顯相關(guān)性：α-HBDH和LDH：rs=0.945，P＜0.001；HBDH和β2-MG：rs=0.347，P=0.001。

表3 LDH、α-HBDH及β2-MG治療前后指標(biāo)比較 （±s）Table 3 Comparison of indices before and after LDH,α-HBDH,and β2-MG treatment （±s）

表3 LDH、α-HBDH及β2-MG治療前后指標(biāo)比較 （±s）Table 3 Comparison of indices before and after LDH,α-HBDH,and β2-MG treatment （±s）

a：Before treatment group compared to normal controls；b：After treatment group compared to normal controls；c：Comparison before and after treatment

Group Before treatment After treatment Control β2-MG（mg/L）4.47±4.41 2.70±1.21 Pa Pb Pc LDH（U/L）425.59±137.04 216.00±41.92 147.39±17.60＜0.001＜0.001＜0.001 α-HBDH（U/L）323.62±114.74 155.92±35.70 120.06±15.11＜0.001＜0.001＜0.001——0.153

圖2 患者治療前后及正常人血清LDH水平比較Figure 2 Comparison of serum LDH before and after treatment

圖1 患者治療前后及正常人血清α-HBDH水平比較Figure 1 Comparison of serum α-HBDH before and after treatment

圖3 患者治療前后及正常人血清β2-MG水平比較Figure 3 Comparison of serum β2-MG before and after treatment

3 討論

α-HBDH可以催化α-酮丁酸為α-羥丁酸，它是含H基團(tuán)的LDH1和LDH2的總稱，實(shí)際反映的是體內(nèi)LDH1和LDH2的總體水平，文獻(xiàn)報(bào)導(dǎo)在白血病［1］、多發(fā)骨髓瘤［2］以及貧血性疾?。?］中都存在α-HBDH增高。LDH在機(jī)體內(nèi)存在5種同工酶：LDH1，LDH2，LDH3，LDH4，LDH5。其中淋巴組織中主要是LDH3。在腫瘤組織中LDH釋放增加［4］，Dumontet等［5］指出，NHL患者中，LDH3升高最具有特異性，而LDH2升高最常見。在總LDH升高的NHL患者中，不僅LDH2升高人數(shù)較其他亞型多，LDH2/總LDH比值改變更為明顯，而LDH1/總LDH、LDH3/總LDH與正常對照相比改變較小。LDH的5種同工酶中，LDH4和LDH5的活性很弱，其余三種同工酶活性依次是LDH2＞LDH1＞LDH3，因人體差異，有的人酶活性依次為LDH2＞LDH3＞LDH1，LDH2和LDH3均與較短的總體生存率及無病生存率相關(guān)，LDH1主要存在于心肌、腎臟中。在LDH2升高的患者中，當(dāng)心功能正常即CK和CK-MB正常時(shí)，α-HBDH升高主要反映LDH2的改變，α-HBDH或許更能直接反映患者的腫瘤負(fù)荷并推斷預(yù)后。

非霍奇金淋巴瘤是一組源于淋巴組織的惡性腫瘤，具有高度異質(zhì)性，不同分期和病理類型之間預(yù)后差別較大。研究證實(shí)，LDH和β2-微球蛋白（β2-MG）是反映非霍奇金淋巴瘤腫瘤負(fù)荷和判斷預(yù)后的重要指標(biāo)。LDH影響淋巴瘤患者的總生存［6-7］，NHL的β2-MG水平升高，其升高機(jī)制多樣［8］，其水平與疾病程度及進(jìn)展相關(guān)［9-11］。本組資料顯示NHL患者與正常人的β2-MG含量具有明顯差異，在Ⅲ/Ⅳ期患者升高例數(shù)明顯高于Ⅰ/Ⅱ期患者例數(shù)，兩組在升高的程度上亦具有明顯差異，侵襲性淋巴瘤患者血清β2-MG水平亦較惰性淋巴瘤患者高，這與之前的報(bào)導(dǎo)［12］相符。而且在Ⅰ/Ⅱ期患者中，β2-MG升高的比例明顯高于LDH及α-HBDH，可能β2-MG在早期診斷上的意義較LDH及α-HBDH更明顯。另外β2-MG升高的NHL患者治療前與治療2～3療程后β2-MG水平無明顯變化（P＞0.05），這與報(bào)道［13］相符。

本組資料所有NHL患者中，α-HBDH和LDH進(jìn)行回歸分析顯示二者具有明顯相關(guān)性，在Ⅲ/Ⅳ期與Ⅰ/Ⅱ期患者比較中，LDH水平差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，其原因可能是因?yàn)椋孩?Ⅳ期患者中年輕患者比例較Ⅰ/Ⅱ期患者高，減弱了分期對于血清指標(biāo)水平的比較意義，但即便如此，α-HBDH在兩組之間的差異仍具有顯著意義。文獻(xiàn)［14］報(bào)導(dǎo)LDH2和LDH3在晚期淋巴瘤和侵襲性淋巴瘤出現(xiàn)頻率最高，本組資料亦顯示惰性與侵襲性NHL的患者間的血清α-HBDH及LDH均具有明顯的差異。本組資料將NHL患者的α-HBDH水平同LDH、β2-MG進(jìn)行關(guān)聯(lián)性分析，發(fā)現(xiàn)他們有明顯的正相關(guān)，LDH已經(jīng)是國際公認(rèn)的NHL預(yù)后指標(biāo)，α-HBDH亦能較好的反應(yīng)NHL患者的病情程度和預(yù)后［15］，在α-HBDH正常表達(dá)的患者中其有治療效率明顯高于α-HBDH高表達(dá)的患者。患者治療前后的血清α-HBDH及LDH水平下降，具有顯著性差異，但是化療2到3個(gè)療程的患者與正常人比較仍具有顯著性差異，可能是因?yàn)榛熀蠡颊唠m有緩解，但體內(nèi)仍存在一定的腫瘤負(fù)荷。α-HBDH在NHL患者中的表達(dá)同LDH和β2-MG呈正相關(guān)，有可能成為反應(yīng)患者腫瘤負(fù)荷的新指標(biāo)，并協(xié)助判斷預(yù)后。

1 Chen HB,Pan ZY,Hong GP.Clinical Significance of LDH,HBDH and Beta 2 Microglobulin Monitoring in Acute Leukemia[J].Hainan Medical,2010,21(13):112-113.［陳海斌,潘志遠(yuǎn),洪國平.LDH、HBDH和β2微球蛋白監(jiān)測在急性白血病中的臨床意義[J].海南醫(yī)學(xué),2010,21(13):112-113.］

2 Ma HF,Guo SL,Pang XH,et al.Clinical Significance of LDH,HBDH and Super C-reactive protein in Patients with Multiple myeloma[J].International Journal of Laboratory Medicine,2011,32(14):1550-1551［.馬慧霞,郭淑麗,龐秀慧,等.多發(fā)性骨髓瘤患者血清乳酸脫氫酶、α-羥丁酸脫氫酶、超敏C反應(yīng)蛋白的變化及臨床意義[J].國際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志,2011,32(14):1550-1551.］

3 Guo LH.The Value of Myocardial Enzyme in Diagnosis of Anemia[J].Chinese Medicine Guidelines,2012,10(20):490-492［.郭麗華.心肌酶在貧血病診斷中的價(jià)值[J].中國醫(yī)藥指南,2012,10(20):490-492.］

4 Chen CC,Yang CF,Yang MH,et al.Pretreatment prognostic factors and treatment outcome in elderly patients with de novo acute myeloid leukemia[J].Ann Oncol,2005,16(8):1366-1373.

5 Dumontet C,Drai J,Bienvenu J,et al.Profiles and prognostic values of LDH isoenzymes in patients with non-Hodgkin's lymphoma.Profiles and prognostic values of LDH isoenzymes in patients with non-Hodgkin's lymphoma[J].Leukemia,1999,13(5):811-817.

6 Wen QQ,Zhou JL,Liu ZB,et al.Survival and Prognosis analysis for four hundred and nine patients with diffuse large B cell lymphoma[J].The Chinese Journal of Hematology,2014,35(4):318-324.［文青青,周佳麗,劉志彬,等.409例彌漫大B細(xì)胞淋巴瘤患者的生存預(yù)后分析[J].中華血液學(xué)雜志.2014,35(4):318-324.］

7 Gu AH,Kou KR,Wang Y,et al.Clinical significance of LDH and Beta 2 microglobulin monitoring in patients with non-hodgkin's lymphoma[J].Chinese Clinical New Medicine,2013,6(3):221-223［.古愛虎,寇克韌,王 勇,等.非霍奇金淋巴瘤患者血清LDH與β2-MG檢測及其臨床意義[J].中國臨床新醫(yī)學(xué),2013,6(3):221-223.］

8 Xu XQ,Wang JM.Clinical Significance of Beta 2 microglobulin in hematologic malignancies[J].The Chinese Journal of Hematology,2005,26(7):444-446［.許曉倩,王健民.β2-微球蛋白在惡性血液病中的臨床意義[J].中華血液學(xué)雜志,2005,26(7):444-446.］

9 Federico M,Guglielmi C,Luminari S,et al.Prognostic relevance of serum beta2 microglobulin in patients with follicular lymphoma treated with anthracycline-containing regimens[J].Haematologica,2007,92(11):1482-1488

10 Gui W,Wang T,Wang J,et al.An improved prognostic parameter for non-Hodgkin's lymphoma based on the combination of three serum tumor markers[J].Int J Biol Markers,2008,23(4):207-213.

11 Zhang HX,Xu J,Liu T,et al.Clinical Features and pro Survival Analysis of Mantle Cell Lymphoma[J].The Chinese Journal of Hematology,2011,32(4):231-235［.張海溪,徐 娟,劉 霆,等.套細(xì)胞淋巴瘤患者的臨床特征及生存預(yù)后分析[J].中華血液學(xué)雜志,2011,32(4):231-235.］

12 Huang RX,Li XL,Huang XC,et al.Clinical significance of LDH and Beta 2 microglobulin monitoring in patients with non-hodgkin's lymphoma[J].Journal of Chinese Modern Medicine,2008,17(10):1357-1359［.黃然欣,李曉林,黃曉春,等.非霍奇金淋巴瘤血清乳酸脫氫酶和β2微球蛋白水平及臨床意義[J].中國現(xiàn)代醫(yī)學(xué)雜志,2008,18(10):1357-1359.］

13 Chen W,Luo RC,Fan WW,et al.Clinical significance of monitoring LDH,TPS,CEA and beta 2 microglobulin in non-hodgkin's lymphoma[J].Journal of Southern Medical Uuniversity,2006,26(2):227-228,230.［陳 維,羅榮城,樊衛(wèi)文,等.聯(lián)合測定LDH、TPS、CEA和β2-MG對非霍奇金淋巴瘤中的臨床意義[J].南方醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào),2006,26(2):227-228,230.］

14 Bouafia F,Drai J,Bienvenu J,et al.Profiles and prognostic values of serum LDH isoenzymes in patients with haematopoietic malignancies[J].Bull Cancer,2004,91(7-8):E229-E240.

15 Pan SY,Zhu B.Clinical Significance of LDH monitoring in patients with non-hodgkin's lymphoma[J].Journal of Chinese Physician,2014(1:111-1120［.潘韶英,朱 斌.非霍奇金淋巴瘤患者血清LDH檢測的臨床意義[J].中國醫(yī)師雜志,2014,16(1):111-1120.］