高效液相色譜法測定甲硝唑片中甲硝唑的含量

【摘要】近年來，人們生活水平的提升促使了人們對于各種醫(yī)療藥品也提出了新的要求，從而為人類身體健康提供了保證。本文就高效液相色譜法測定甲硝唑片中甲硝唑的含量進(jìn)行了分析，并探討了其工作要點(diǎn)。本實(shí)驗(yàn)的目的：建立一套系統(tǒng)的甲硝唑片中甲硝唑含量的測量方法，并著重以高效液相色譜法進(jìn)行分析。實(shí)驗(yàn)方法：利用Agilent C18液相色譜柱作為主要的測量設(shè)備，以甲醇水為相關(guān)溶液，并采用20：80的比例來配置，以冰醋酸調(diào)控其PH值，且將其PH值控制在3.5的流動相，檢測波長控制在277nm。實(shí)驗(yàn)結(jié)果：通過該方法進(jìn)行測試，得出了甲硝唑在2.8～28μg/ml濃度范圍之內(nèi)的面積與進(jìn)樣量之間存在著一定的線性關(guān)系，這種線性是呈現(xiàn)出良性狀態(tài)的，我們通過回歸方程是y=3.1437x+8.695×104來對其平均回收率進(jìn)行計(jì)算，得出結(jié)果為其平均回收率為99.6%，其中日平均相對標(biāo)準(zhǔn)差（RSD）約為0.93%，其穩(wěn)定性為1%。實(shí)驗(yàn)結(jié)論：通過以上的實(shí)驗(yàn)內(nèi)容和實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，該實(shí)驗(yàn)方法是一種使用設(shè)備易見、操作方法簡單且精確、快捷的一種實(shí)驗(yàn)方式，對于樣品的穩(wěn)定性、重現(xiàn)性都有著良好的控制作用，可以作為甲硝唑中各種微量元素含量測定方法。

【關(guān)鍵詞】高效液相；甲硝唑；甲硝唑片；含量很高

隨著國民經(jīng)濟(jì)和科學(xué)技術(shù)的發(fā)展，我國的醫(yī)學(xué)也呈現(xiàn)出繁榮態(tài)勢，尤其是在改革開放之后，隨著市場經(jīng)濟(jì)體制的確立與完善，國外各種先進(jìn)技術(shù)的引進(jìn)為我國傳統(tǒng)的醫(yī)療事業(yè)提供了發(fā)展的新動力，也為我國醫(yī)藥事業(yè)的研究與追索提供了廣闊的市場空間和基礎(chǔ)平臺。醫(yī)藥作為保證人類身體健康的關(guān)鍵部分，在整個人類身體健康方面發(fā)揮著不可替代的作用。我們在生活中，身體一旦受到疾病的影響，很難憑借自身的抵抗力去克服病魔，在折基礎(chǔ)上，藥品的重要性逐漸的發(fā)揮了出來，為人們身體健康和生命提供了有力的保障基礎(chǔ)。甲硝唑作為現(xiàn)代醫(yī)療職業(yè)中較為常見的藥品之一，其各種含量測定越來越受到人們的重視，也是相關(guān)工作人員研究的核心重點(diǎn)所在。

一、甲硝唑概述

1、甲硝唑概念

所謂的甲硝唑主要指的是白色、微黃色為主的結(jié)晶或者結(jié)晶性的粉末，且是一種具備著微臭、味苦的化學(xué)藥品。其在目前的醫(yī)療事業(yè)中較為常見，且有著廣泛的擁堵，對于抵抗各種呼吸道、消化道感染十分有效。

2、作用

2.1抗原蟲作用

甲硝唑在使用的過程中其最為基礎(chǔ)的作用在于其本身具備著良好的廣譜抗厭氧菌和抗原蟲的作用與優(yōu)勢，在臨床治療的過程中主要是用來治療和預(yù)防各種厭氧菌引起的呼吸道、消化道、腹腔感染，同時(shí)也有著各種軟組織、骨節(jié)、骨關(guān)節(jié)等部位的感染疾病的預(yù)防作用。

2.2抗厭氧菌作用

甲硝唑中由于含有一定的硝基，這種成分在無氧環(huán)境中存在著還原成氨基的變化特點(diǎn)，這個時(shí)候其顯示出一種抗厭氧菌的作用，但是對于需氧菌或者兼性需氧菌的預(yù)防和治療中則經(jīng)常都表現(xiàn)出無效的狀態(tài)。一般來說，在厭氧菌的預(yù)防和治療中，其最為關(guān)鍵和常見的作用是針對擬桿菌屬、梭形桿菌屬、消化球菌和部分真桿菌等。

二、高效液相色譜法測定甲硝唑片中甲硝唑含量實(shí)驗(yàn)分析

在傳統(tǒng)的甲硝唑含量測定工作中，通常都是采用紫外分光光度法來進(jìn)行測試和衡量的，但是這種方法由于在使用中存在著精密度、靈敏度和自動化程度叫擦的原因而逐步無法滿足目前社會發(fā)展要求，因此需要我們在工作中加以完善和優(yōu)化。隨著科學(xué)技術(shù)的日新月異，各種新技術(shù)和新設(shè)備的出現(xiàn)，促使了人們在工作中經(jīng)過總結(jié)和完善形成了以高效液相色譜法為主的新型測量措施和方式，并成為目前甲硝唑片中甲硝唑含量的主要測量方式，其具體測量方法如下：

1.儀器與試藥

安捷倫公司的A百lentll00全自動高效液相色譜儀，二極管陣列檢測器。甲硝唑?qū)φ掌罚ㄖ袡z所提供的甲硝唑?qū)φ掌罚?，甲硝唑片由某制藥廠提供（批號：060606，060812，060911；規(guī)格0.29），甲醇為國產(chǎn)色普純試劑，冰醋酸、鹽酸為國產(chǎn)分析純試劑，水為去離子經(jīng)Milli—Qplus超純水器處理。

2.色譜條件

色譜柱：Agilent—C18（5斗m150×4.6mm）柱；流動相：以甲醇一水（20：80）用冰醋酸調(diào)pH值3.5；流速：1.0IIll/min；檢測波長：277nm；柱溫：室溫；進(jìn)樣量：20斗l；甲硝唑在上述色譜條件下的保留時(shí)間約為4.1min，理論塔板數(shù)以甲硝唑峰計(jì)約為92152。

3.溶液配制

3.1對照品溶液

分別精密稱取甲硝唑?qū)φ掌芳s13mg，100ml容量瓶，加鹽酸溶液（9—1000）約30m1，微溫使甲硝唑溶解，并稀釋至刻度，搖勻，作為貯備液。再精密移取貯備液10 ml置于100ml容量瓶，加流動相稀釋至刻度，搖勻，即得。

3.2供試品溶液

取本品10片，精密稱定，研細(xì)，緊密稱取適量（約相當(dāng)于甲硝唑50mg），置100ml容量瓶中，加鹽酸溶液（9—1000）約30ml，微溫使甲硝唑溶解，加流動相稀釋至刻度，搖勻，濾過，精密量取續(xù)濾液5rnl置200ml容量瓶中，加流動相稀釋至刻度，搖勻，即得供試液。

4.方法與結(jié)果

4.1線性關(guān)系試驗(yàn)

精密稱定甲硝唑約14mg于100rnl容量瓶中，加鹽酸溶液（9一1000）約30ml，微溫使甲硝唑溶解，加流動相稀釋至刻度，搖勻，作為貯備液。分別精密移取貯。備液1.0ml，2.0ml，5.0ml，8.0m1，0.0ml于50“容量瓶中，均用流動相稀釋至刻度，搖勻，各取20斗g進(jìn)樣，在277nm波長處檢測。

4.2精密度試驗(yàn)

在上述色譜條件下，取13肛g/ml的甲硝唑?qū)φ掌啡芤褐貜?fù)進(jìn)樣，測定峰面積的RSD=0.91%（n=6）。

4.3重現(xiàn)性試驗(yàn)

對同一批樣品從稱樣起按樣品測定項(xiàng)下操作，重復(fù)實(shí)驗(yàn)6次，結(jié)果甲硝唑測定項(xiàng)的RSD=1.2%，說明本法重復(fù)性良好。

4.4加樣回收率試驗(yàn)

精密稱取已知含量的樣品粉未適量（含甲硝唑約1.2mg），于100ml容量瓶中，加鹽酸溶液（9—1000）約20ml，微溫使甲硝唑溶解，再精密加入甲硝唑?qū)φ掌焚A備10ml，用加流動相稀釋至刻度，搖勻，即得。按上述色譜條件分別測定，記錄峰面積。計(jì)算得回收率為99.2%，RSD=0.66%（n=5）。

4.5穩(wěn)定性試驗(yàn)

取060606批樣品，依“3.2”項(xiàng)下的供試品溶液配制供試液一份，于配制供試液后的0小時(shí)，2小時(shí)，4小時(shí)，6小時(shí)，8小時(shí)依法各測定1次，記錄峰面積，計(jì)算。RSD為0.62%（n=5），結(jié)果表明供試液穩(wěn)定性良好。

4.6樣品測定

取對照品溶液和供試品溶液3批，按上述色譜條件每件測定3次，按外標(biāo)法以峰面積計(jì)算甲硝唑的含量。結(jié)果與《中國藥典》的方法測定結(jié)果比較。將測定所得的峰面積按回歸方程計(jì)算即得。

三、結(jié)束語

實(shí)驗(yàn)證明，該研究提出用HPLC法測定甲硝唑片含量，選擇性、準(zhǔn)確度及專屬性比目前采用的紫外分光光度法檢測的要高，且方法簡便、回收率高，精密度、重現(xiàn)性好，自動化程度高，可作為提高甲硝唑片中甲硝唑含量測定的檢測方法。