試述如何用高效液相色譜法測定普伐他汀鈉膠囊的溶出度

【摘要】目的：以高效液相色譜法為主要方法測定普伐他汀鈉膠囊的溶出度。主要方法：按照我國05年頒布的《中國藥典》第二部為主要的參考依據(jù)，采用900ml溶劑作為主要的基礎，采用轉數(shù)為50r/min-1，并經過半小時之后進行研究和總結，從而形成一條系統(tǒng)、綜合的管理措施和檢測方法，并經過沉淀之后以高效液相色譜進行測定；其在應用的過程中色譜柱的選擇是利用DiamonsilTMC18為主，而流動相則是采用磷酸鹽緩沖溶液以及甲醇為主，其比例為40：60，且PH指控制在3.5左右。結論：這種方法的采用對于普伐他汀鈉膠囊溶出度的檢測十分關鍵，也是一項設備使用簡單、方法簡便且結果準確的工作模式。

【關鍵詞】高效液相色譜法；普伐他汀鈉；色譜柱；溶出度

隨著近年來醫(yī)學領域的不斷發(fā)展，各種醫(yī)藥檢測技術越來越受到人們的重視和關注，已成為整個醫(yī)藥發(fā)展中最為關鍵的部分和環(huán)節(jié)，也是保證各種藥品能夠發(fā)揮出其應有效率的關鍵所在。一般來說，在目前的醫(yī)藥檢測技術中最為常見的為色譜法，然而隨著社會的不斷發(fā)展，傳統(tǒng)的色譜法在應用中由于受到多種因素的影響而存在著一定的欠缺，需要我們在工作中加以完善和整理，進而形成一套綜合的管理流程和措施，即我們當前常說的高效液相色譜法。

一、普伐他汀鈉膠囊概述

在目前醫(yī)學制藥工作中，高效液相色譜法檢測普伐他汀鈉膠囊已成為人們工作中采用最多的檢測技術之一，也是目前醫(yī)學制藥領域中最為常見的方法，其在應用中對于檢測標準和準確性有著極為關鍵的作用與意義。

普伐他汀鈉膠囊是一種3-羥基，3-甲基戊二酶A還原酶為主的一種競爭性擬制劑，是目前醫(yī)學制藥中最為常見的一種，其在應用的過程中能夠擬制各種膽固醇合成物，切是一種親水性物質。這種藥品最早是由日本和美國等發(fā)達國家借助生物合成形成的他汀類藥物。經過多年的臨床實踐證明，這種藥品在應用的過程中其首要作用在于肝臟疾病的治療，由于其在應用中首先是經過肝臟，這主要是由于肝臟是整個人身體中膽固醇合成的主要器官，因此在應用中效果十分的明顯和良好。

二、高效液相色譜法檢測普伐他汀鈉膠囊溶液的要點

色譜法是目前醫(yī)學藥品檢測的主要手段和方法，也是目前最為常見的一種分離措施和方式，其在應用的過程中是由兩相、固定相和流動相兩個方面，且兩種是相互運動和轉化的過程。其在應用的過程中是將色譜法應用在目前的各種流動相溶液中，針對其中溶液物質加以研究和分析的過程。

1、儀器與試藥

在本實驗進行的過程中是采用美國的高效液相色譜儀系統(tǒng)為主的，其中包含了515形態(tài)的輸液泵、相應的監(jiān)測儀器以及色譜工作站等多種機械設備模式，同時在設備的選擇中是以標準的普伐他汀鈉膠囊為主的，而甲醇在選擇中主要是利用色譜純、磷酸二氫鈉、磷酸等液體作為主要的分析純試劑。

2、方法與結果

在目前檢驗的過程中，當流動相中所攜帶的各種混合物通過固定相的時候，就會與固定相中的相關環(huán)節(jié)和相關工作流程發(fā)生一定的作用力，在這種作用力的影響下形成一套系統(tǒng)化的工作管理流程和管理模式，并且在這種推動力的作用下使得其不同組分在固定相中滯留并且形成了一定的分析基礎和前提，使得其中的各種物質得到有效的監(jiān)測和標出。一般來說，這種方法的應用是通過固定相中各種液相存在時間的長短和流出的順序來進行管理與控制的一項工作措施和方法手段。

2.1色譜條件色譜柱：DiamonsilTMC18（200mm×4.60mm，5μm），流動相：甲醇-磷酸鹽緩沖液（60：40）用85%磷酸調pH3.5±0.05，（磷酸鹽緩沖液配制：稱取2.76g磷酸二氫鈉，加水至1000ml，混合均勻）流速：1.0ml·min-1，進樣量：20μl，檢測波長：238nm，柱溫為室溫。理論塔板數(shù)：按普伐他汀鈉計算為4500。

2.2溶液的制備

對照品儲備液精密稱取普伐他汀鈉對照品20mg，置200ml量瓶中，加水溶解稀釋至刻度，混合均勻。

2.3干擾性實驗

取裝有不含普伐他汀鈉的空白膠囊及普伐他汀鈉膠囊樣品（規(guī)格10mg）各1粒，分別置于溶出杯內，照本文的溶出度測定法，取出溶液濾過，取續(xù)濾液及對照品溶液各20μl分別進樣，按上述色譜條件記錄色譜圖。結果空白膠囊在普伐他汀鈉主峰出峰處無色譜峰，空白膠囊峰與普伐他汀鈉主峰分離度（1.8）符合要求，表明在此條件下無背景干擾。結果見圖1。

2.4線性實驗分別吸2.2.1標準品儲備液3.0，5.0，8.0，10.0，12.0ml，置于100ml量瓶中，加水至刻度，搖勻，制成每1ml含3.0，5.0，8.0，10.0，12.0μg的溶液。

2.5精密度實驗取2.2.2的對照品溶液，重復進樣5次，記錄色譜圖。計算峰面積的RSD為0.4%，符合精密度實驗要求。

2.6穩(wěn)定性實驗取2.2.2的對照品溶液，在室溫下分別放置0，2，4，6，8h進樣測定，RSD=1.8%，表明溶液穩(wěn)定性良好。

2.7回收率實驗稱取普伐他汀鈉標準品10.0mg各6份，分別加入到已裝有1粒不含普伐他汀鈉的輔料膠囊的溶出杯中，按上述溶出度測定方法操作及選定的色譜條件測定，以外標法計算普伐他汀鈉的溶出度，計算回收率，結果為99.86%，RSD=1.7%，（n=6），表明回收率好，方法可行。

2.8重復性實驗取040501（10mg）批樣品，按溶出度測定方法測定6次，溶出含量的RSD為0.8%，表明重復性良好。

2.9樣品溶出度測定取本品6粒，照溶出度測定法，以水900ml為溶劑，轉速為50r·min-1，依法操作，經30min時，取溶液10ml，濾過，取續(xù)濾液作為樣品溶液。另精密稱取普伐他汀鈉標準品適量，加水溶解，并定量稀釋成每毫升中含10μg（規(guī)格10mg）或5μg（規(guī)格5mg）的溶液作為標準品溶液。

三、結論

關于本品的溶出度在企業(yè)標準草案中是用紫外分光光度法測定，但由于空心膠囊的溶出液在238nm波長處有較大的吸收，對測定結果產生影響，使得溶出度結果偏高。本法沿用了企業(yè)標準草案中含量測定使用的流動相及溶出度檢查規(guī)定的條件，用HPLC法檢測。通過實驗發(fā)現(xiàn)，HPLC法可將主峰與空白膠囊峰分離，測定方法簡便，結果準確，可用于控制產品質量。