不同填料固相萃取柱提取魚塘水中擬除蟲菊酯類農(nóng)藥對比

【摘要】目的：對比分析不同填料固相萃取柱提取魚塘水中擬除蟲菊酯類農(nóng)藥。方法：選擇不同的固相萃取柱的填料，在不同濃度的標本溶液下對不同填料固相萃取小柱氰戊菊酯萃取回收率進行對比分析，同時將萃取回收率最高的固相萃取柱的填料對6種菊酯類農(nóng)藥進行提取，通過外標法對線性范圍以及檢出限進行測定。結(jié)果：結(jié)果顯示C18提取效率最高，與其他固相萃取柱填料的提取率比較差異顯著（P<0.05），具有統(tǒng)計學意義；C18對6種菊酯類農(nóng)藥進行提取發(fā)現(xiàn)氯氰菊酯的檢出限與其他幾種擬除蟲菊酯類農(nóng)藥存在一定程度的偏差。結(jié)論：固相萃取是一種迅速有效、操作簡便的萃取方法，提取率較高，可作為提取魚塘水中擬除蟲菊酯類農(nóng)藥的首先方法。

【關(guān)鍵詞】擬除蟲菊酯類農(nóng)藥；不同填料固相萃取柱；提??；對比分析

由于擬除蟲菊酯類藥物對于害蟲具有顯著的防止作用從而保護農(nóng)作物的生長而在日常生活中被廣泛地使用[1]，研究顯示擬除蟲菊酯類藥物對家禽以及人類的毒性較低，然而對于魚塘中養(yǎng)殖的水生生物卻具有很大的毒性，常常會引起魚蝦的死亡，近些年來就有關(guān)于應(yīng)用擬除蟲菊酯類藥物對魚塘進行投毒的事件的發(fā)生?，F(xiàn)階段，在法庭科學領(lǐng)域應(yīng)用固相萃取法已經(jīng)十分廣泛，然而在水中擬除蟲菊酯類殺蟲劑痕量檢測方面的應(yīng)用卻并不普遍。本文通過選擇不同的固相萃取柱的填料，通過不同的實驗操作，旨在對比分析不同填料固相萃取柱提取魚塘水中擬除蟲菊酯類農(nóng)藥，具體信息如下。

1、材料與方法

1.1材料

1.1.1儀器：選擇由上海比朗儀器有限公司生產(chǎn)提供的型號為QSE-12的固相萃取裝置；由上海金凱德分析儀器有限公司生產(chǎn)提供的GC-2050系列的氣象色譜儀，由上海思達分析儀器有限責任公司提供的型號為CP-840自動進樣器，以及美國Varian公司生產(chǎn)的電子檢測捕獲器。

1.1.2填料：固相萃取柱的填料的種類、尺寸以及規(guī)格：VARIAN Bond Elut FL：6ml、30mg；Qasis HLB：3ml、10mg；DIKMA ProElutTM Florisi：500mg 3ml、50mg；DIKMA ProElutTM C18：1000mg 6ml、30mg；DIKMA ProElutTM PSA：6ml、30mg；

1.1.3試劑：氟氯氰菊酯、甲氰菊酯、三氟氯氰菊酯、氯氰菊酯、溴氰菊酯以及氰戊菊酯均由公安部物證鑒定中心提供，其藥物濃度都是2mg/ml；將上述藥物配成濃度為0.4mg/ml的丙酮母液，取一定數(shù)量上述藥物的母液配置成濃度為50μg/ml與5ng/ml的混合液，將其放置于4攝氏度的環(huán)境中保存。

1.2方法

在使用固相萃取柱前，必須通過應(yīng)用5ml水和甲醇對其進行活化，一次浸潤的時間約為0.5min，然后再通過使用真空泵將水分抽干。去魚塘水樣250ml，并在其中加入20g的氯化鈉（NaCl），然后控制速度在5ml/min左右通過固相萃取小柱完成富集。將柱子用清水洗干凈，通過真空泵將其水分抽干，然在再離心干燥，接下來通過氮吹儀對其進行吹掃2-3分鐘，等待檢查使用。固相萃取小柱通過使用三氯甲烷與二氯甲烷的混合配制而成的洗脫液來洗脫；洗脫液則需要在40攝氏度的空氣中流下吹干，使用甲醇定容，等待檢查使用。

1.3統(tǒng)計學分析

采用SPSS13.0統(tǒng)計學軟件，計數(shù)資料采用X2檢驗，P<0.05差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。

2、結(jié)果

2.1取出濃度為5ng/ml的混合液，按照上述的操作方法分別配制成濃度為0.2ng/ml、5ng/ml、10ng/ml、25ng/ml的樣本濃度混合液，運用氣相色譜電子捕獲檢測器得到各檢測藥物的峰面積為S’，同時配制濃度為0.2ng/ml、5ng/ml、10ng/ml、25ng/ml的樣本濃度混合液直接進樣分析，檢測藥物的峰面積為S，回收率=（S’÷S）×100%。結(jié)果顯示C18提取效率最高，與其他固相萃取柱填料的提取率比較差異顯著（P<0.05），具有統(tǒng)計學意義，具體見表1。

注：*表示與其它比較差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。

2.2C18對6種菊酯類農(nóng)藥進行提取發(fā)現(xiàn)氯氰菊酯的檢出限與其他幾種擬除蟲菊酯類農(nóng)藥存在一定程度的偏差，具體見表2。

3、討論

固相萃取是近些年才發(fā)展起來的樣品前處理技術(shù)，其將液相色譜與液固萃取技術(shù)兩者結(jié)合，固相萃取主要應(yīng)用于樣品的分離，凈化和富集，然而應(yīng)用固相萃取法主要是為了減少樣品基質(zhì)的干擾，從而提高檢測的靈敏度。傳統(tǒng)的液液萃取法具有①操作繁瑣、費時；②需要大量的有機溶劑，進而需要較高的成本和引起對環(huán)境的影響；③不易從水腫提取高水溶性物質(zhì)等缺點；而蛋白沉淀法具有①非特異性的沉淀反應(yīng)可能使微量的分析物隨著基質(zhì)蛋白質(zhì)共同沉淀而損失；②凈化效果差，檢測靈敏度和可靠性低等缺點。然而固相萃取較好的彌補了液液萃取和蛋白沉淀法存在的缺陷，具有①能夠?qū)悠愤M行富集與凈化的操作，很大程度上提升檢測的靈敏度；②速度快、消耗的試劑少、能夠自動化批量處理；③重現(xiàn)性好的優(yōu)點。

然而在不同濃度的標本溶液下對不同填料固相萃取小柱氰戊菊酯萃取回收率會存在差異性，本次研究結(jié)果顯示C18提取效率最高，與其他固相萃取柱填料的提取率比較差異顯著（P<0.05），另外C18對6種菊酯類農(nóng)藥進行提取發(fā)現(xiàn)氯氰菊酯的檢出限與其他幾種擬除蟲菊酯類農(nóng)藥存在一定程度的偏差。

綜上所述，固相萃取是一種迅速有效、操作簡便的萃取方法，提取率較高，可作為提取魚塘水中擬除蟲菊酯類農(nóng)藥的首先方法。

參考文獻

[1]謝偉宏，田國剛，羅永此.不同填料固相萃取柱提取魚塘水中擬除蟲菊酯類農(nóng)藥的比較[J].中國法醫(yī)學雜志，2008，23（5）：336-337.