HPLC法檢測鱘魚中孔雀石綠、結晶紫及其代謝產物

摘要：采用高效液相色譜法同時檢測鱘魚（Acipenser sturio L.）中的孔雀石綠、隱色孔雀石綠、結晶紫和隱色結晶紫。采用冷凍的方法除去樣品中所含的油脂，討論了過柱與否對回收率的影響。結果表明，該方法測得的回收率為61.24%～105.81%，相對標準偏差為0.2%～6.3%，孔雀石綠的檢出限為2 μg/kg，其他3種物質的檢出限均為1 μg/kg。該方法處理簡單，節(jié)省時間，可用于大量樣品的快速分析。

關鍵詞：高效液相色譜（HPLC）；鱘魚（Acipenser sturio L.）；孔雀石綠；結晶紫

中圖分類號：X131 文獻標識碼：A 文章編號：0439-8114（2013）11-2647-03

隨著水產養(yǎng)殖規(guī)模的不斷擴大，養(yǎng)殖產品出現的疾病種類亦逐年增加，導致孔雀石綠、結晶紫等危害性較大的藥品廣泛使用，從而對水環(huán)境和水產品造成嚴重污染。

孔雀石綠、結晶紫均系三苯甲烷類染料，可用作殺菌劑、驅蟲劑，是藥用染料中抗菌效果較強的一類。在水產養(yǎng)殖中對魚類水霉病、爛鰓病、爛鰭病、寄生蟲病等都有很好的預防和治療效果[1-2]。但是許多研究表明，孔雀石綠、結晶紫及其代謝物具有高毒、高殘留和致畸、致癌、致突變等副作用[3-5]，而且較難降解[6-7]，已經被許多國家明令禁止用于食用水產品中。目前，孔雀石綠、結晶紫及其代謝產物的檢測方法主要有分光光度法[8]、高效液相法[9]、酶聯免疫檢測法[10]、液質聯用法[11]及毛細管電泳法[12]。本研究采用高效液相色譜法同時測定孔雀石綠 （MG）、隱色孔雀石綠（LMG）、結晶紫（CV）、隱色結晶紫（LCV）殘留量，試驗表明，該方法操作簡單，靈敏度和準確度較高，可用于日常分析。

1 材料與方法

1.1 儀器與試劑

3 小結與討論

在本試驗中，由于鱘魚樣品中含有大量油脂，為了不影響檢測效果，除脂是非常重要的一步。采用常用正己烷除脂測得回收率偏低。為了保證回收率，本試驗采用冷凍除脂，在二氯甲烷層合并以后，將梨形瓶放入冰箱中冷凍30 min，之后將其中上層白色物質除去，旋蒸、定容、待測。從過柱與未過柱的鱘魚樣品測定結果可以得出，過柱與否對色譜圖的影響很大，而且過柱后用乙腈沖洗被測物很難完全沖洗下來，導致回收率偏低，所以為了簡化試驗步驟，減少損失，降低成本，本試驗沒有使用固相萃取小柱。方法的回收率為61.24%～105.81%，相對標準偏差為0.2%～6.3%，孔雀石綠的方法檢出限為2 μg/kg，其他3種物質的方法檢出限均為1 μg/kg。

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