黑木耳多糖提取方法比較

摘要：采用正交試驗(yàn)比較研究熱水浸提法、微波輔助提取法和超聲波輔助提取法提取黑木耳（Auricularia auricula）多糖的工藝及效率。熱水浸提法最佳工藝為料水質(zhì)量比1∶40、提取溫度80 ℃、提取時(shí)間4 h，提取率為8.41%；微波輔助提取法最佳工藝為料水質(zhì)量比1∶30、微波功率560 W、微波時(shí)間90 s、提取溫度80 ℃，提取率為14.08%；超聲波輔助提取法最佳工藝為料水質(zhì)量比1∶40、超聲功率80 W、超聲時(shí)間20 min、提取溫度60 ℃，提取率為15.22%。超聲波輔助提取法效率最高，優(yōu)于另兩種方法。

關(guān)鍵詞：黑木耳（Auricularia auricula）；多糖；熱水浸提；微波輔助提取；超聲波輔助提取

中圖分類(lèi)號(hào)：R284.2 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A 文章編號(hào)：0439-8114（2013）10-2386-03

黑木耳（Auricularia auricula）味道鮮美、營(yíng)養(yǎng)豐富，是一種藥食兩用大型真菌。我國(guó)是世界上最主要的黑木耳生產(chǎn)國(guó)，年產(chǎn)量占世界總產(chǎn)量的90%以上[1]，所以對(duì)黑木耳進(jìn)行深入開(kāi)發(fā)具有重要意義。研究表明木耳多糖是黑木耳的主要生物活性物質(zhì)[2]，具有調(diào)節(jié)免疫功能、抗血栓、抑菌、降血糖、抗?jié)?、抗肝炎、抗突變、降血脂和促進(jìn)血清蛋白生物合成等多種功效[3，4]。目前黑木耳多糖的提取方法主要有水提醇沉法、堿液提取法、超聲波輔助提取法、酶解法和微波輔助提取法等，這些方法都有其優(yōu)點(diǎn)，也有其難以克服的不足之處[5-9]。

研究考察了傳統(tǒng)的熱水浸提法、微波輔助提取法和超聲波輔助提取法提取黑木耳多糖的工藝條件及提取效果，比較3種提取方法的效率，為黑木耳的深加工提供參考。

1 材料與方法

1.1 材料

干黑木耳產(chǎn)自吉林省，購(gòu)自撫順市農(nóng)貿(mào)市場(chǎng)。苯酚、濃硫酸、葡萄糖均為分析純。

1.2 方法

1.2.1 多糖的測(cè)定 采用苯酚-硫酸法進(jìn)行黑木耳多糖含量的測(cè)定，以葡萄糖為標(biāo)準(zhǔn)品[10]。

1.2.2 黑木耳多糖的提取方法

1）熱水浸提法。粉碎干黑木耳，用石油醚脫脂，取2.0 g黑木耳粉，加入去離子水，通過(guò)水浴浸提，離心得到上清液，用無(wú)水乙醇沉淀，離心，干燥得到粗多糖。

2）微波輔助提取法。粉碎干黑木耳，用石油醚脫脂，取2.0 g黑木耳粉，加入去離子水，用微波處理，水浴浸提2 h，離心得到上清液，用無(wú)水乙醇沉淀，離心，干燥得到粗多糖。

3）超聲波輔助提取法。粉碎干黑木耳，用石油醚脫脂，取2.0 g黑木耳粉，加入去離子水，用超聲波處理，水浴浸提2 h，離心得到上清液，用無(wú)水乙醇沉淀，離心，干燥得到粗多糖。

1.2.3 正交試驗(yàn) 采用L9（34）正交試驗(yàn)分別研究水浸提法、微波輔助提取法和超聲波輔助提取法的工藝，各試驗(yàn)因素與水平見(jiàn)表1、表2和表3。

2 結(jié)果

2.1 熱水浸提法

通過(guò)L9（34）正交試驗(yàn)確定熱水浸提法提取黑木耳多糖的最佳工藝，直觀分析結(jié)果見(jiàn)表4。熱水浸提法提取黑木耳多糖的最佳工藝條件是A3B3C3，即料水質(zhì)量比1∶40，提取溫度80 ℃、提取時(shí)間4 h。在此最佳條件下黑木耳多糖的提取率為8.41%。極差分析結(jié)果表明，熱水浸提法各因素對(duì)黑木耳多糖提取率的影響為提取溫度>提取時(shí)間>料水質(zhì)量比。

2.2 微波輔助提取法

通過(guò)L9（34）正交試驗(yàn)確定微波輔助提取法提取黑木耳多糖的最佳工藝，直觀分析結(jié)果見(jiàn)表5。微波輔助提取法提取黑木耳多糖的最佳工藝條件是A2B2C3D3，即料水質(zhì)量比1∶30、微波功率560 W、微波時(shí)間90 s、提取溫度80 ℃。在此最佳條件下黑木耳多糖的提取率為14.08%。極差分析結(jié)果表明，微波輔助提取法各因素對(duì)黑木耳多糖提取率的影響為微波時(shí)間>微波功率>料水質(zhì)量比>提取溫度。

2.3 超聲波輔助提取法

通過(guò)L9（34）正交試驗(yàn)確定超聲波輔助提取法提取黑木耳多糖的最佳工藝，直觀分析結(jié)果見(jiàn)表6。超聲波輔助提取法提取黑木耳多糖的最佳工藝條件是A3B3C3D1，即料水質(zhì)量比1∶40、超聲功率80 W、超聲時(shí)間20 min、提取溫度60 ℃。在此最佳條件下黑木耳多糖的提取率為15.22%。極差分析結(jié)果表明，黑木耳多糖提取率的影響為超聲時(shí)間>超聲功率>提取溫度>料水質(zhì)量比。

2.4 3種黑木耳多糖提取方法的比較

由表7可知，從提取效果來(lái)看，提取率最高的是超聲波輔助提取法，其次是微波輔助提取法，熱水浸提法的提取率最低，還不到前兩種方法的2/3，表明微波和超聲波在輔助提取黑木耳多糖中發(fā)揮了重要作用。從料水質(zhì)量比來(lái)看，3種方法相差不大，而且對(duì)于這3種方法來(lái)說(shuō)，料水質(zhì)量比都不是最主要的影響因素。微波輔助提取法提取液用量相對(duì)較少，可能是由于微波時(shí)間較短，太多的提取液可能造成微波處理不充分。從提取時(shí)間來(lái)看，熱水浸提法需要的時(shí)間最長(zhǎng)，而微波輔助和超聲波輔助能大大縮短提取的時(shí)間。而且超聲波輔助提取法中的超聲時(shí)間和微波輔助提取法中的微波時(shí)間都是最主要的影響因素，可能是由于足夠時(shí)間的超聲波和微波作用有助于充分破壞細(xì)胞，促進(jìn)多糖的提取。從提取溫度來(lái)看，超聲波輔助提取法所需的溫度最低，說(shuō)明充分破壞細(xì)胞結(jié)構(gòu)不需要太高的溫度。微波輔助提取法中微波作用的時(shí)間相對(duì)較短，對(duì)細(xì)胞結(jié)構(gòu)的破壞可能不如超聲波輔助提取法充分，所以仍需要較高的提取溫度。熱水浸提法需要的溫度也較高，而且提取溫度是該方法的主要影響因素，說(shuō)明生產(chǎn)中如果提取溫度達(dá)不到一定高度，會(huì)較大程度地影響提取效果?？偟膩?lái)說(shuō)，超聲波輔助提取法提取率最高，提取溫度最低，在黑木耳多糖的提取中具有一定優(yōu)勢(shì)。

3 小結(jié)

熱水浸提法最佳工藝為料水質(zhì)量比1∶40、提取溫度80 ℃、提取時(shí)間4 h，提取率為8.41%；微波輔助提取法最佳工藝為料水質(zhì)量比1∶30、微波功率560 W、微波時(shí)間90 s、提取溫度80 ℃，提取率為14.08%；超聲波輔助提取法最佳工藝為料水質(zhì)量比1∶40、超聲功率80 W、超聲時(shí)間20 min、提取溫度60 ℃，提取率為15.22%。超聲波輔助提取法效率最高，優(yōu)于另兩種方法。

參考文獻(xiàn)：

[1] 郭 平，盧家炯，林海霞.黑木耳多糖功效與提取方法[J].中國(guó)林副特產(chǎn)，2006（6）：72-74.

[2] 吳瑞憲.黑木耳的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)及營(yíng)養(yǎng)成份[J].中國(guó)林副特產(chǎn)，1996（1）：21-22.

[3] 鄭 炯，黃發(fā)明，張 坤.黑木耳多糖生物活性研究進(jìn)展[J].糧食與油脂，2006（10）：45-47.

[4] 樊黎生，龔晨睿，張聲華.黑木耳多糖抗輻射效應(yīng)的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)[J].營(yíng)養(yǎng)學(xué)報(bào)，2005，27（6）：525-526.

[5] 李福利，張麗娟，于國(guó)萍.酶法提取黑木耳多糖的純化與鑒定[J].中國(guó)林副特產(chǎn)，2011（4）：4-6.

[6] 陸 雯，蔡振優(yōu)，鮮 喬，等.黑木耳多糖提取工藝條件的研究[J].中國(guó)食品添加劑，2010（6）：99-102.

[7] 徐秀卉，楊 波.超聲波法提取黑木耳多糖的工藝[J].藥學(xué)與臨床研究，2011，19（2）：189-190.

[8] 曾維才，張 曾，賈利蓉.響應(yīng)面法優(yōu)化微波輔助提取黑木耳多糖工藝的研究[J].食品與發(fā)酵科技，2011，47（5）：45-48.

[9] 王 雪，王振宇.響應(yīng)面法優(yōu)化超聲波輔助提取黑木耳多糖的工藝研究[J].中國(guó)林副特產(chǎn)，2009（3）：1-5.

[10] 姜軍平，唐俊昌.實(shí)用生物化工技術(shù)[M].西安：西安交通大學(xué)出版社，1981.124-125.