新疆野蘋(píng)果花粉生活力的測(cè)定

唐巧紅

(新疆農(nóng)業(yè)廣播電視學(xué)校吐魯番地區(qū)分校，新疆 吐魯番 835000)

為明確不同貯藏天數(shù)對(duì)野蘋(píng)果花粉活力的影響，采用固體培養(yǎng)基法進(jìn)行了測(cè)定，現(xiàn)將有關(guān)測(cè)定結(jié)果總結(jié)如下。

1 材料和方法

1.1 材料

試劑有瓊脂、蔗糖、硼酸、蒸餾水、鹽酸、氫氧化鈉。試驗(yàn)儀器與用具包括雙目電子顯微鏡、電子天平、鑷子、電爐子、載玻片、玻璃棒、白瓷盤(pán)、高壓鍋、三角瓶、量筒、燒杯、膠頭滴管。

1.2 方法

1.2.1 花粉的采集

4月22日 18:00在野蘋(píng)果樹(shù) (43.384 21°N，83.573 62°E，海拔1 291 m)上采取的冠外圍中上部位，采集長(zhǎng)、中果枝上含苞待放的花蕾帶回室內(nèi)，及時(shí)用鑷子捋下花藥，將花藥攤開(kāi)置于室溫下，使花藥充分開(kāi)裂，散出花粉充分混合［1］，待用。

1.2.2 花粉的形態(tài)

掃描電鏡觀察，拍照。

1.2.3 花粉的培養(yǎng)

花粉生活力采用培養(yǎng)基播種法測(cè)定［2］。在不同蔗糖濃度，不同硼酸濃度和相同瓊脂濃度(0.7%)的培養(yǎng)基上進(jìn)行發(fā)芽試驗(yàn)。蔗糖濃度設(shè)0，5%，10%，15%，20%5個(gè)水平;硼酸濃度設(shè)0和0.01%2個(gè)水平。培養(yǎng)基的 pH值為5.8～6.0［3］。培養(yǎng)基經(jīng)高壓滅菌，用膠頭滴管在載玻片的中央滴成厚度約0.2 cm的球面。凝固后用發(fā)絲蘸取花粉，輕輕涂抹在培養(yǎng)基表面。將播有花粉的載玻片放在鋪有濕潤(rùn)濾紙的白瓷盤(pán)中，用塑料膜把白瓷盤(pán)封好，放置室溫 (17～23℃)培養(yǎng)，每種類型的花粉做2個(gè)重復(fù)。3 h后在電子顯微鏡下觀察，每次觀察3個(gè)視野，以花粉管長(zhǎng)度超過(guò)花粉粒直徑作為發(fā)芽標(biāo)準(zhǔn)，計(jì)算其發(fā)芽率。

發(fā)芽率/%=100×已發(fā)芽的花粉粒數(shù)/花粉粒總數(shù)［4］。

2 結(jié)果與分析

2.1 花粉粒的形態(tài)

圖1是野蘋(píng)果花粉粒的外觀形態(tài)電鏡圖。野蘋(píng)果花粉粒是橢圓形的和近球形的，花粉粒有3個(gè)萌發(fā)孔，萌發(fā)孔環(huán)狀排列，萌發(fā)孔是孔溝，孔溝延伸幾乎與花粉粒長(zhǎng)度一致。

花粉粒外壁有許多不規(guī)則的紋飾，每個(gè)花粉粒其條紋的粗細(xì)、方向、附屬物等都不同。

2.2 不同蔗糖濃度對(duì)花粉萌發(fā)的影響

培養(yǎng)基9個(gè)編號(hào):①0.7%瓊脂;②0.7%瓊脂+5%蔗糖;③0.7%瓊脂+10%蔗糖;④0.7%瓊脂+15%蔗糖;⑤0.7%瓊脂+20%蔗糖;⑥0.7%瓊脂+5%蔗糖+0.01%硼酸;⑦0.7%瓊脂+10%蔗糖+0.01%硼酸;⑧0.7%瓊脂+15%蔗糖+0.01%硼酸;⑨0.7%瓊脂+20%蔗糖+0.01%硼酸。

對(duì)4月22日采集的花粉每天進(jìn)行室溫培養(yǎng)，測(cè)定花粉生活力 (表1)。①-⑤是加不同濃度的蔗糖和相同濃度的瓊脂。結(jié)果表明，試驗(yàn)范圍內(nèi)，10%蔗糖每天平均萌發(fā)率最高 (47.4%);5%蔗糖每天平均萌發(fā)率居次 (44.4%);20%蔗糖每天平均萌發(fā)率最低 (9.4%)。說(shuō)明野蘋(píng)果萌發(fā)適宜的濃度為5%～10%，最適濃度為10%。蔗糖濃度對(duì)花粉萌發(fā)有明顯影響。低濃度的蔗糖對(duì)花粉萌發(fā)起促進(jìn)作用，高濃度蔗糖則起抑制作用。瓊脂起凝固、保型、保質(zhì)作用，①僅加瓊脂，其平均萌發(fā)率24.6%。

圖1 野蘋(píng)果花粉粒的形態(tài)

2.3 蔗糖和硼酸對(duì)花粉萌發(fā)的影響

⑥-⑨加不同濃度的蔗糖和相同濃度(0.01%)的硼酸。⑦萌發(fā)率最高 (52.9%)，為最適培養(yǎng)基，說(shuō)明蔗糖和硼酸共同作用促進(jìn)花粉的萌發(fā)。⑥-⑨比②-⑤多加了0.01%的硼酸，則其平均萌發(fā)率大于②-⑤。由此說(shuō)明，0.01%的硼酸對(duì)花粉萌發(fā)有促進(jìn)作用并適合野蘋(píng)果花粉的萌發(fā)。王文舉等［5］認(rèn)為，0.01%的硼酸濃度對(duì)蘋(píng)果花粉萌發(fā)效果最好。

2.4 不同貯藏天數(shù)對(duì)花粉萌發(fā)的影響

表1中⑦為最適培養(yǎng)基。⑦和平均值比較，花粉萌發(fā)率先升后降。因?yàn)?2日采集的是含苞待放的花朵，剝?nèi)セㄋ?4 h后花粉才自動(dòng)散出，此時(shí)花粉囊發(fā)育不成熟，花粉發(fā)育也不成熟。試驗(yàn)樹(shù)在花粉貯藏第4 d正處盛花期。26日采集樹(shù)上的花朵，發(fā)現(xiàn)2 h后即散出花粉。由此可知，22日采的花粉貯藏4 d后花粉達(dá)到成熟，且其花粉生活力最強(qiáng)。王欽麗等［6］認(rèn)為，一般從成熟花蕊中散出的花粉活力最強(qiáng)，隨著時(shí)間延長(zhǎng)活力下降。說(shuō)明含苞待放的花朵散出的花粉在貯藏過(guò)程中存在著后熟作用。

表1 新疆野蘋(píng)果不同貯藏天數(shù)下花粉的生活力

3 小結(jié)與討論

不同貯藏天數(shù)對(duì)花粉萌發(fā)的影響。野蘋(píng)果花粉貯藏31 d后，花粉活力為0。劉存宏等［7］研究表明，蘋(píng)果花粉晾干后在常溫下貯藏的時(shí)間不能超過(guò)1周，超過(guò)1周后發(fā)芽率已明顯下降，到第9天后基本沒(méi)有發(fā)芽力。兩者比較說(shuō)明野蘋(píng)果花粉活力稍強(qiáng)，這個(gè)特點(diǎn)對(duì)野蘋(píng)果的開(kāi)發(fā)利用有極大的價(jià)值。

鏡檢發(fā)現(xiàn)新疆野蘋(píng)果花粉存在破裂和集體效應(yīng)的現(xiàn)象。野蘋(píng)果花粉萌發(fā)適宜的蔗糖濃度為5%～10%，最適濃度為10%，適宜的硼酸濃度為0.01%。野蘋(píng)果最適宜的花粉培養(yǎng)基為10%蔗糖+0.01%硼酸+0.7%瓊脂。發(fā)現(xiàn)蔗糖和硼酸共同作用對(duì)野蘋(píng)果花粉萌發(fā)有促進(jìn)作用。本試驗(yàn)pH值為5.8～6.0，適宜野蘋(píng)果花粉的萌發(fā)。含苞待放的花朵散出的花粉生活力隨著貯藏時(shí)間的增加先升后降，31 d后活力為0。

［1］ Currie A J，Noiton D A，Lawes G S，et al.Preliminary results of differentiating apple by pollen ultrastructure ［J］.Euphytica，1997，98:155-161.

［2］ 王世茹，方麗，李建波.桃品種花粉生活力比較試驗(yàn)初報(bào)［J］.果樹(shù)科學(xué)，1997，15(4):360-363.

［3］ 盛仙永，胡正海.Ca2+、pH在花粉及萌發(fā)花粉管生長(zhǎng)中的作用研究進(jìn)展 ［J］.西北植物學(xué)報(bào)，2005，25(1):194-199.

［4］ 年玉欣，羅鳳霞.測(cè)定百合花粉生命力的液體培養(yǎng)基研究［J］.園藝學(xué)報(bào)，2005，32(5):922-925.

［5］ 王文舉，張軍翔，張寧.花期噴硼對(duì)元帥蘋(píng)果座果率及硼對(duì)蘋(píng)果花粉萌發(fā)的影響 ［J］.寧夏農(nóng)林科技，1996(6):32-33.

［6］ 王欽麗，盧龍斗，吳小琴，等.花粉的保存及生活力測(cè)定［J］.植物學(xué)通報(bào)，2002，19(3):365-ⅡⅡ373.

［7］ 劉存宏，李華.蘋(píng)果花粉貯藏試驗(yàn) ［J］.山西果樹(shù)，1997(4):7.