四川阿壩產(chǎn)野生大花紅景天不同器官中紅景天苷含量的比較

趙文吉，何正軍，賈國(guó)夫，尼 科，郭 敏

(四川省草原科學(xué)研究院，四川成都611731)

大花紅景天〔Rhodiola crenulata(Hook.f.et Thoms.)H.Ohba〕為藥材紅景天的基原植物，是珍稀的藥食兼用天然植物資源之一［1－2］。紅景天具有益氣活血、通脈平喘、扶正固本的作用［1］，主要含黃酮類(lèi)、有機(jī)酸類(lèi)、多糖類(lèi)、苷類(lèi)、香豆素類(lèi)和揮發(fā)性成分等，其中包含的重要生物活性成分有紅景天苷、紅景天素、酪醇、二苯甲基六氫吡啶和超氧化物歧化酶(SOD)等，還含有維生素及人體必需的多種大量和微量元素，營(yíng)養(yǎng)價(jià)值極高［3－5］。紅景天具有抗疲勞、抗缺氧、強(qiáng)壯機(jī)體、抗心肌缺血、抗腫瘤和保護(hù)神經(jīng)細(xì)胞等作用，紅景天藥材或其提取物已成為多種中成藥、食品、飲料和化妝品的重要原料［6］。

中國(guó)有紅景天屬(Rhodiola Linn.)植物73種2亞種7變種，集中分布在喜馬拉雅山脈、川西高原東緣的滇西北和川西高原地區(qū)［7］，而大花紅景天分布范圍十分狹窄(僅分布于青海、四川、西藏和云南)，生長(zhǎng)于高寒環(huán)境中;其生長(zhǎng)期短、生長(zhǎng)緩慢、生產(chǎn)周期長(zhǎng)，種群更新緩慢。近年來(lái)，隨著紅景天的深度開(kāi)發(fā)，其藥材需求量不斷增加，但依然采取整株刨根的方式獲取野生根莖［8］。因?yàn)E采濫挖和生態(tài)環(huán)境變化等因素使大花紅景天野生資源遭到嚴(yán)重破壞，目前已被列為國(guó)家Ⅱ級(jí)重點(diǎn)保護(hù)野生植物;其蘊(yùn)藏量已逐漸不能滿足市場(chǎng)所需，資源短缺成為亟待解決的問(wèn)題。

作者采用高效液相色譜法(HPLC)測(cè)定了采自四川省阿壩州的野生大花紅景天植株不同器官中紅景天苷的含量，以期為大花紅景天資源的合理開(kāi)發(fā)利用和引種馴化提供參考數(shù)據(jù)。

1 材料和方法

1.1 材料

供試大花紅景天于2012年10月引自四川省阿壩州小金縣，多樣地采樣并栽植于四川省草原科學(xué)研究院阿壩州紅原實(shí)驗(yàn)基地。將全株分為根、根莖、莖和葉4個(gè)部位;依據(jù)根莖的著生方式，將根莖細(xì)分為地上叢生狀根莖和主軸根莖2部分;將根系分為根尖段和根上端2部分。供試樣品混勻后于室內(nèi)陰干，粉碎后過(guò)60目篩，供試。

主要儀器和試劑:Agilent 1100高效液相色譜儀(包括四元泵、在線脫氣機(jī)、自動(dòng)進(jìn)樣器、二極管陣列檢測(cè)器和柱溫箱，美國(guó)安捷倫科技公司)、萬(wàn)分之一電子分析天平(梅特勒－托利多中國(guó)公司)、數(shù)控超聲波清洗器(昆山超聲儀器有限公司)和微型植物試樣粉碎機(jī)(杭州宏達(dá)化工儀器有限公司)。紅景天苷對(duì)照品由中國(guó)藥品生物制品檢定所提供(批號(hào)110818－200404);甲醇為色譜純級(jí)(美國(guó)TEDIA公司)，水為純凈水，其余試劑均為分析純級(jí)。

1.2 方法

1.2.1 色譜條件 Diamonsil C8 色譜柱(4.6 mm×250 mm×5 μm，北京迪科馬科技有限公司);流動(dòng)相V(甲醇)∶V(水)=15 ∶85。柱溫30 ℃;流速1 mL·min－1;檢測(cè)波長(zhǎng)275 nm;進(jìn)樣量 10 μL。理論板數(shù)按紅景天苷峰計(jì)算不低于 2 000［1，9］。

1.2.2 標(biāo)準(zhǔn)品溶液制備及標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制 精密稱(chēng)取紅景天苷對(duì)照品5 mg，用甲醇溶解并定容至10 mL，配制成質(zhì)量濃度0.5 mg·g－1的對(duì)照品溶液。精密吸取紅景天苷對(duì)照品溶液2、4、6、8 和10 μL，按上述色譜條件進(jìn)行 HPLC 分析。以標(biāo)準(zhǔn)品溶液的峰面積分值為縱坐標(biāo)y、進(jìn)樣量為橫坐標(biāo)x繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，紅景天苷標(biāo)準(zhǔn)曲線的回歸方程為y=236.034x+7.200(r=0.998 4)。紅景天苷在 1.024 ～5.120 μg范圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系。

1.2.3 供試樣品溶液制備及HPLC分析 取各器官樣品粉末約0.5 g，精密稱(chēng)定后加入30 mL甲醇，稱(chēng)定質(zhì)量后超聲處理30 min(功率180 W，頻率40 Hz)，冷卻后稱(chēng)定質(zhì)量，用甲醇補(bǔ)足減失的質(zhì)量，搖勻并過(guò)濾;濾液用0.45 μm微孔濾膜過(guò)濾后即為供試樣品溶液。按上述色譜條件，取供試樣品溶液直接進(jìn)樣分析，進(jìn)樣量10 μL。將各樣品中紅景天苷的峰面積分別帶入標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算紅景天苷含量。

1.3 數(shù)據(jù)處理和分析

采用PASW 18.0統(tǒng)計(jì)分析軟件和EXCEL 2010數(shù)據(jù)分析軟件對(duì)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。

2 結(jié)果和分析

2.1 不同器官中紅景天苷平均含量的比較

野生大花紅景天根、根莖、莖和葉片中紅景天苷的平均含量見(jiàn)表1。由表1可見(jiàn):野生大花紅景天不同器官中紅景天苷含量差異顯著(F=24.326，P＜0.05)，其中根莖中紅景天苷平均含量最高，顯著高于莖和葉片，但與根中的紅景天苷平均含量無(wú)顯著差異;葉片中沒(méi)有檢測(cè)出紅景天苷。

表1 大花紅景天不同器官中紅景天苷平均含量的比較(±SD)Table 1 Comparison of average content of salidroside in different organs of Rhodiola crenulata(Hook.f.et Thoms.)H.Ohba(±SD)

表1 大花紅景天不同器官中紅景天苷平均含量的比較(±SD)Table 1 Comparison of average content of salidroside in different organs of Rhodiola crenulata(Hook.f.et Thoms.)H.Ohba(±SD)

1)同列中不同的小寫(xiě)字母表示差異顯著(P＜0.05)Different small letters in the same column indicate the significant difference(P＜0.05).

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2.2 根和根莖不同部位中紅景天苷平均含量的比較

野生大花紅景天根不同部位以及根莖不同部位的紅景天苷平均含量見(jiàn)表2。由表2可見(jiàn):根和根莖的不同部位中紅景天苷的平均含量差異顯著(F=6.445，P＜0.05)。根尖部的紅景天苷平均含量顯著高于木質(zhì)化程度較高的根上部，地上部叢生狀分枝根莖中紅景天苷平均含量(1.828%)顯著高于主根莖，即紅景天苷主要存在于地上部叢生狀分枝根莖中。

表2 大花紅景天根和根莖中紅景天苷平均含量的比較(±SD)Table 2 Comparison of average content of salidroside in root and rhizome of Rhodiola crenulata(Hook.f.et Thoms.)H.Ohba(±SD)

表2 大花紅景天根和根莖中紅景天苷平均含量的比較(±SD)Table 2 Comparison of average content of salidroside in root and rhizome of Rhodiola crenulata(Hook.f.et Thoms.)H.Ohba(±SD)

1)同列中不同的小寫(xiě)字母表示差異顯著(P＜0.05)Different small letters in the same column indicate the significant difference(P＜0.05).

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2.3 生長(zhǎng)期的莖和葉中紅景天苷平均含量的比較

野生大花紅景天不同生長(zhǎng)期的莖以及葉片中紅景天苷的平均含量見(jiàn)表3。由表3可見(jiàn):在大花紅景天植株殘留莖、新生莖和葉片中紅景天苷平均含量顯著差異(F=1 081.286，P＜0.05)。新生莖中紅景天苷平均含量(0.131%)顯著高于殘留莖和葉片，在殘留莖和葉片中均未檢出紅景天苷。

表3 大花紅景天莖和葉中紅景天苷平均含量的比較(±SD)Table 3 Comparison of average content of salidroside in stem and leaf of Rhodiola crenulata(Hook.f.et Thoms.)H.Ohba(±SD)

表3 大花紅景天莖和葉中紅景天苷平均含量的比較(±SD)Table 3 Comparison of average content of salidroside in stem and leaf of Rhodiola crenulata(Hook.f.et Thoms.)H.Ohba(±SD)

1)同列中不同的小寫(xiě)字母表示差異顯著(P＜0.05)Different small letters in the same column indicate the significant difference(P＜0.05).

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3 討論和結(jié)論

上述測(cè)定結(jié)果顯示:在野生大花紅景天植株不同器官中紅景天苷的平均含量有明顯差異，各營(yíng)養(yǎng)器官按紅景天苷含量由高至低依次排序?yàn)楦o、根、莖、葉;根及根莖中紅景天苷平均含量分別為1.281%和1.529%，比文獻(xiàn)［1］規(guī)定的紅景天藥材中紅景天苷質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)分別高1倍和2倍以上;鑒于地上部叢生狀分枝根莖中紅景天苷的含量最高，建議采挖野生大花紅景天時(shí)應(yīng)避免整株刨根式采挖，以收割地上部叢生狀分枝根莖為宜，保留根莖及其根系，以利于植株的再生長(zhǎng)，達(dá)到保護(hù)資源的目的。

大花紅景天為多年生高寒植物，多呈密集的片狀分布，叢生狀分枝較多，主根莖和根系均較大且隨生長(zhǎng)年限的增加呈木質(zhì)化、干枯化且無(wú)法判斷其生命特征，因而，在野生狀態(tài)下大花紅景天的生長(zhǎng)年限難以劃分，因此，應(yīng)對(duì)野生大花紅景天生長(zhǎng)年限與紅景天苷含量的相關(guān)性進(jìn)行深入研究。在野生大花紅景天的新生莖中也檢測(cè)出含有一定量的紅景天苷，為大花紅景天地上部分資源的充分利用奠定了基礎(chǔ)。另外在葉中未能檢測(cè)出紅景天苷，與測(cè)定方法及樣品的生長(zhǎng)年限等因素均有關(guān)，其原因有待深入分析和研究。

［1］國(guó)家藥典委員會(huì).中華人民共和國(guó)藥典:2010年版(一部)［M］.北京:中國(guó)醫(yī)藥科技出版社，2010:144.

［2］陳玉滿，陳 江，毛光明，等.大花紅景天的抗缺氧作用研究［J］.浙江預(yù)防醫(yī)學(xué)，2007，19(1):92－93.

［3］明海泉，夏光成，張瑞釣.紅景天研究進(jìn)展［J］.中草藥，1988，19(5):37－42.

［4］陳少遷，吳少雄，殷建忠.大花紅景天的研究進(jìn)展［J］.農(nóng)產(chǎn)食品科技，2008，2(2):40－44.

［5］德 吉，周生靈，郭小芳，等.紅景天(Rhodiola L.)的研究進(jìn)展［J］.西藏科技，2012(8):70－71.

［6］申佳佳，毛根祥，陳金晶，等.紅景天有效成分的藥理作用及機(jī)制的研究進(jìn)展［J］.國(guó)際老年醫(yī)學(xué)雜志，2012，33(5):206－210.

［7］中國(guó)科學(xué)院中國(guó)植物志編輯委員會(huì).中國(guó)植物志:第三十四卷第一分冊(cè)［M］.北京:科學(xué)出版社，1984:159－220.

［8］王 強(qiáng)，阮 曉，李荷迪，等.珍稀藥用資源植物紅景天研究現(xiàn)狀、問(wèn)題與對(duì)策［J］.自然資源學(xué)報(bào)，2007，22(6):880－889.

［9］崔秀梅，商國(guó)懋，吳建民.不同產(chǎn)地大花紅景天中紅景天苷含量比較［J］.中國(guó)現(xiàn)代中藥，2010，12(9):26－27，57.