江團(tuán)吉氏檸檬酸桿菌的鑒定及藥敏試驗(yàn)

向元容，王 平

（四川省沐川縣畜牧食品局，四川 沐川 614500）

沐川烏骨雞屬四川山地烏骨雞的特優(yōu)品種，與石棉烏骨雞、興文烏骨雞聚為一類，適合放牧飼養(yǎng)喜食昆蟲、野草。它因外形好、野性強(qiáng)、耐粗放、耐青粗飼料、耗料少、肉質(zhì)細(xì)嫩、味獨(dú)特、滋補(bǔ)性強(qiáng)等特點(diǎn)而受到消費(fèi)者的青睞。黃芪味甘，性微溫，歸肝、脾、肺、腎經(jīng)，有益氣固表、斂汗固脫、托瘡生肌、利水消腫之功效，黃芪在養(yǎng)雞業(yè)中的應(yīng)用較為廣泛?，F(xiàn)代研究表明，黃芪的主要化學(xué)成分有黃芪多糖、皂苷類、黃酮類和氨基酸等，其主要有效成分是黃芪多糖。黃芪多糖主要有兩種葡聚糖和兩種雜多糖，可作為免疫促進(jìn)劑或調(diào)節(jié)劑，同時(shí)具有抗病毒、抗腫瘤、抗衰老、抗輻射、抗應(yīng)激、抗氧化等作用。本試驗(yàn)利用黃芪為君藥制備復(fù)方散劑，研究其對沐川山地烏骨雞的屠宰性能和肉品質(zhì)的影響，以期為烏骨雞養(yǎng)殖提供一定的理論研究基礎(chǔ)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)動物 烏骨雞500只，全部為公雞。

1.2 中藥 復(fù)方黃芪散（黃芪、蒼術(shù)、生姜、甘草），購自樂山市中藥材有限公司。

1.3 試驗(yàn)方法

1.3.1 試驗(yàn)雞分組 分成A、B、C、D、E 5組，每組100只公雞。試驗(yàn)組A、B、C在基礎(chǔ)日糧（飼料）中按0.5%（5g/kg）、1%（10g/kg）、1.5%（15g/kg） 的比例添加復(fù)方黃芪散；對照組D在基礎(chǔ)日糧中添加36mg/kg飼用抗生素（含6 mg/kg硫酸粘桿菌素、30 mg/kg桿菌肽鋅）；空白對照組E只飼喂基礎(chǔ)日糧。飼料按常規(guī)配制，日糧組成及營養(yǎng)水平見表1。

表1 基礎(chǔ)日糧組成及營養(yǎng)水平

1.3.2 飼養(yǎng)管理和免疫程序 在相同條件下飼養(yǎng)，各組山地烏骨雞均自由采食、飲水，按常規(guī)飼養(yǎng)管理。各組雞的免疫保健程序相同，具體免疫方法見表2。

1.3.3 復(fù)方黃芪散對烏骨雞屠宰性能的影響 試驗(yàn)結(jié)束當(dāng)日（130日齡）從每個(gè)組中隨機(jī)抽取10只雞，停飼12 h后稱活重（g），再屠宰，測定其屠宰率、半凈膛率、全凈膛率、腿肌率、胸肌率，以及胸肌pH值和剪切力等。

表2 雞的免疫程序

1.3.4 復(fù)方黃芪散對烏骨雞肉食用品質(zhì)的影響

（1）pH值：在雞胸肌上取樣1塊，用勻漿器打碎，然后用酸度計(jì)測定宰后1h肉樣的pH值，記為pH1；將測完pH1值的肉樣在4℃條件下貯藏23后測定pH值，記為pH24。同一個(gè)試樣進(jìn)行3次測定。在測定中，酸度計(jì)的探頭要深入到雞肉內(nèi)直至被包埋，每次測定需穩(wěn)定15s以上。

（2）失水率：采用壓力計(jì)測定。取腿肌肉1塊（約3～5g），先將肉塊橫切為1cm厚的肉片，再用取樣器在肉片中央截取截面積為3cm2的小塊作為測定樣本（截取時(shí)保持1cm的厚度）。先稱重記作W1，然后上下各墊1層脫脂紗布，再各墊15層吸水紙，將肉樣置于儀器平臺上施加35kg壓力，保持5min，撤除壓力后，立即稱取肉樣重量（W2）。失水率（%）（W1-W2）/W1×100%

（3）剪切力值：在雞胸肌的同一部位取樣1塊肉樣無筋腱、肌膜和脂肪，放入水浴鍋中加熱至肉中心溫度達(dá)到70℃，保持5min后取出（即肉塊煮熟）冷卻至室溫，用直徑1cm的空心取樣器鉆取2～3個(gè)肉柱，用C-LM3B型數(shù)顯式肌肉嫩度儀測定并記錄每個(gè)肉塊的剪切力值，每個(gè)樣品測定3次，取平均數(shù)。

（4）系水力：用常壓干燥法測定肌肉的含水率利用公式求得：

系水力（%）=（含水率-失水率）/含水率 ×100

（5）肌纖維直徑：宰后立即沿著雞腿肌肌纖維方向取肌心處橫截面積為1cm2的肉塊，在10%甲醛溶液中固定48h后，于10×40倍顯微鏡下隨機(jī)讀取200根肌纖維的直徑數(shù)，并求平均值（μm）。

（6）熟肉率：取新鮮胸肌肉1塊稱重（W1），將其裝在蒸煮袋中，然后在鍋中蒸煮大約30 min后取出，在室內(nèi)自然條件下放置15min，再稱重（W2），計(jì)算熟肉率。

熟肉率（%）=W2/W1×100%

1.3.5 復(fù)方黃芪散對雞肉營養(yǎng)品質(zhì)的影響

（1）常規(guī)營養(yǎng)測定：水分及干物質(zhì)直接用干燥法測定；粗蛋白質(zhì)用半微量凱氏定氮法測定，粗脂肪采用索氏抽提法測定；粗灰分采用灼燒重量法測定。

（2）氨基酸測定

①水解：稱取100 mg樣品置于水解管中，加入等體積的6mol/L鹽酸溶液，滴加苯酚3～5滴，冰箱冷凍3～5min，再將水解管接到真空泵抽氣管上，抽真空后再充入高純氮?dú)?，封口。將封口的水解管放?10±1℃恒溫干燥箱內(nèi)，水解24h后將水解液全部轉(zhuǎn)移到50mL容量瓶內(nèi)，用pH值為2.2的緩沖溶液定容，吸取1mL供儀器測定使用。

②測定：精確吸取0.2mL混合氨基酸標(biāo)準(zhǔn)液，用pH值為2.2的緩沖溶液溶解，將其稀釋到5mL，使此標(biāo)準(zhǔn)液濃度為5.00nmol/50μL，用氨基酸自動分析儀測定試樣的氨基酸含量，采用外標(biāo)法。

2 結(jié)果與分析

2.1 屠宰性能測定 各組山地烏骨雞的屠宰性能測試結(jié)果見表3。

由表3可以看出，A組山地雞的活重平均為3.41kg，是E組山地雞的1.3倍（P＜0.05）。對于未加任何藥物的山地雞來說，復(fù)方黃芪散高劑量添加組的屠宰率、半凈膛率、全凈膛率、腿肌率和胸肌率都有所提高，且差異顯著（P＜0.05）；而飼用抗生素組的各項(xiàng)屠宰性能指標(biāo)也有不同程度的提高，除了半凈膛率差異不顯著外，其余各項(xiàng)差異顯著（P＜0.05）；復(fù)方黃芪散的中、低劑量組在提高山地烏骨雞屠宰性能方面的作用不大。說明高劑量復(fù)方黃芪散和飼用抗生素均能提高山地烏骨雞的肉用價(jià)值。

2.2 食用品質(zhì)測定 各組山地烏骨雞肉的食用品質(zhì)測試結(jié)果見表4。

由表4可知，不同組山地雞雞肉的pH1值和pH24值在正常范圍內(nèi)無顯著性差異。用復(fù)方黃芪散飼喂山地雞，其肌肉系水力、失水率、熟肉率、剪切力和肌纖維直徑都與未飼喂藥物的山地雞存在差異特別是高劑量組的差異更顯著（P＜0.05）。復(fù)方黃芪散組的雞肉失水率較小，而系水力增大，說明用復(fù)方黃芪散飼喂山地雞，其保水性和嫩度優(yōu)于普通飼養(yǎng)復(fù)方黃芪散組山地雞的熟肉率有所增大，而剪切力和肌纖維直徑變小，說明復(fù)方黃芪散可以使山地雞的嫩度和咀嚼性優(yōu)于普通飼養(yǎng)，這是山地雞作為肉用型雞的一大優(yōu)勢。從表4可知，相對于普通飼養(yǎng)飼用抗生素組的山地雞的失水率、系水力和熟肉率變化不大，但剪切力和肌纖維直徑變大，且差異顯著（P＜0.05），說明飼用抗生素雖然能提高山地雞的生長性能，但其嫩度和咀嚼性變差。

表3各組山地烏骨雞的屠宰性能

表4各組山地烏骨雞雞肉的食用品質(zhì)

表5各組山地烏骨雞雞肉的營養(yǎng)品質(zhì)

2.3 營養(yǎng)品質(zhì)測定 各組山地烏骨雞肉的營養(yǎng)品質(zhì)測定結(jié)果如表5所示。

從表5可以看出，各組山地烏骨雞雞肉的水分差異性較小。復(fù)方黃芪散高劑量組的雞肉蛋白質(zhì)含量變高，脂肪和灰分變少，且差異顯著（P＜0.05）。飼喂抗生素組與空白對照組的雞肉的蛋白質(zhì)含量和脂肪含量差異較小，但抗生素組的灰分增加較明顯（P＜0.05）。說明復(fù)方黃芪散能使山地雞營養(yǎng)更加豐富，而飼喂抗生素則降低了山地雞的營養(yǎng)水平。

2.4 氨基酸測定結(jié)果 各組山地烏骨雞雞肉氨基酸測定結(jié)果如表6所示。

表6 各組雞肉的氨基酸含量 單位：g/100g蛋白質(zhì)

由表6可以看出，飼喂不同劑量復(fù)方黃芪散的山地雞的總氨基酸（TAA）含量分別為86.65、85.94、85.83g/100g蛋白質(zhì)，均高于抗生素組和空白對照組，而飼喂抗生素組的TAA最少，比空白對照組低1.14%，比高劑量復(fù)方黃芪散組低2.03%。各組山地雞均含有人體所需的8種必需氨基酸（EAA），各個(gè)劑量組的復(fù)方黃芪散均使山地雞的EAA增加，且具有劑量效應(yīng)，高劑量組的EAA含量為35.03g/100g蛋白質(zhì)，比空白對照組高出1.05%。通過比較，飼喂抗生素的山地雞的EAA比空白對照組略低，比高劑量復(fù)方黃芪散組低1.51%。一般來說，食物蛋白質(zhì)營養(yǎng)價(jià)值的高低，主要取決于所含必需氨基酸的種類、數(shù)量及組成比例。從表6可以看出，復(fù)方黃芪散增加了山地雞TAA和EAA的含量，使山地雞的營養(yǎng)更加豐富，而飼喂抗生素則降低了山地雞的營養(yǎng)水平。

3 結(jié)論及分析

由試驗(yàn)結(jié)果可以看出，復(fù)方黃芪散能提高草科山地烏骨雞的屠宰率、半凈膛率、全凈膛率、腿肌率和胸肌率，且高劑量組差異顯著（P＜0.05）；用復(fù)方黃芪散飼喂山地烏骨雞，其肌肉的系水力、失水率、熟肉率、剪切力和肌纖維直徑都與未飼喂藥物的山地雞存在差異，特別是高劑量復(fù)方黃芪散組的差異顯著（P＜0.05），說明用復(fù)方黃芪散飼喂山地雞在雞肉保水性和嫩度方面優(yōu)于普通飼養(yǎng)，是山地雞作為肉用型雞的一大優(yōu)勢；高劑量復(fù)方黃芪散使山地雞雞肉的蛋白質(zhì)含量變高，脂肪和灰分變少，且差異顯著（P＜0.05），說明復(fù)方黃芪散能使雞肉的營養(yǎng)更加豐富；用不同劑量復(fù)方黃芪散飼喂山地雞，其肉中的總氨基酸（TAA）含量均高于飼喂抗生素組和普通飼養(yǎng)組，復(fù)方黃芪散增加了山地烏骨雞肉中TAA和EAA的含量，使山地雞的營養(yǎng)更加豐富。

以上試驗(yàn)結(jié)果與其他相關(guān)研究比較吻合，王志祥等在雞的日糧中加入黃芪提取物，結(jié)果表明黃芪提取物能降低雞體內(nèi)膽固醇的含量，減少肝臟膽固醇向肝外組織轉(zhuǎn)運(yùn)，從而降低了肉仔雞肝臟和胸肌中的膽固醇含量，提高了蛋白質(zhì)含量。Yin FG等研究表明，添加有黃芪多糖的膳食飼料可明顯提高回腸氨基酸的轉(zhuǎn)化率。左兆云等研究表明，日糧中添加黃芪粉和黃芪多糖有提高雞蛋蛋白含量的趨勢，同時(shí)可降低蛋黃MDA含量，提高SOD活性，降低膽固醇濃度。王福傳等以黃芪、茯苓、白術(shù)、黨參等組成復(fù)方中草藥免疫增強(qiáng)劑飼喂雞，不僅增強(qiáng)了雞體的免功能，提高了抗病力，而且增強(qiáng)了其繁殖機(jī)能，提高雞的產(chǎn)蛋率。

參與文獻(xiàn)：

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[2] 葛慶連，吳華俊，等．我國藥用價(jià)值地方雞種的遺傳多性研究[J]．石河子大學(xué)學(xué)報(bào)，2007，25（3）：307-311.

[3] 李 拮，王 青，李 杰，等．中藥黃芪有效成分的研究展[J]．醫(yī)學(xué)信息，2012，25（3）：625-626.

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[7] 王福傳，韓一超，張玉換，等.獸用中草藥高效免疫增強(qiáng)研究初報(bào)[J].山西農(nóng)業(yè)科學(xué)，2001，29（2）：74-80.