清瘟敗毒飲的解熱抗炎作用研究

黃 謙，宋曉紅

（1.四川省綿陽市動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心，四川 綿陽 621000；2.重慶布爾動(dòng)物藥業(yè)有限公司，重慶 榮昌 402460）

清瘟敗毒飲是清代著名溫病學(xué)家余師愚所創(chuàng)制的名方，載于其所著的《疫疹一得》一書中，該方綜合了《傷寒論》白虎湯、《千金要方》犀角地黃湯、《肘后備急方》黃連解毒湯三方加減而成，其清熱瀉火、涼血解毒的作用頗強(qiáng)，《疫疹一得》將其稱為“十二經(jīng)瀉火之藥”，《歷代名醫(yī)良方注釋》稱其為“大寒解毒之劑”，是臨床治療溫病的代表性方劑。本試驗(yàn)對清瘟敗毒飲的解熱、抗炎作用進(jìn)行了藥理學(xué)研究，為其進(jìn)一步應(yīng)用于獸醫(yī)臨床提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

1.1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 日本大耳白兔，體重1.8～2.2kg，雌雄均可，雌兔無孕，由西南大學(xué)榮昌校區(qū)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物房提供。用籠子單獨(dú)飼養(yǎng)，自由飲水，采食，飼喂全價(jià)顆粒料，飼養(yǎng)環(huán)境的溫度為22±1℃。

清潔級雄性小白鼠，體重20±2 g，重慶醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供。飼養(yǎng)環(huán)境及實(shí)驗(yàn)環(huán)境為SPF級動(dòng)物實(shí)驗(yàn)室，環(huán)境溫度在22±1℃，濕度為65%。

1.1.2 藥品與試劑 中藥飲片：生石膏、地黃、水牛角、黃連、梔子、牡丹皮、黃芩、赤芍、玄參、知母、連翹、桔梗、甘草、淡竹葉，購自榮昌縣石家藥行；復(fù)方阿司匹林片，北京市永康藥業(yè)有限公司產(chǎn)品，規(guī)格：0.5g/片，批號(hào)：20090318；大腸桿菌 O128∶B8內(nèi)毒素，Sigma 公司產(chǎn)品，貨號(hào)：L3129，用無菌生理鹽水配制成2μg/mL溶液備用；二甲苯和分析純試劑（AR）均為成都東金化學(xué)試劑有限公司生產(chǎn)。

1.1.3 儀器 BP211D電子天平，購自O(shè)rion Research Inc（美國）公司。

1.2 試驗(yàn)方法

1.2.1 供試藥物（清溫?cái)《撅嫓珓┑闹苽?取石膏120g、地黃 30g、水牛角 60g、黃連 20g、梔子 30 g、牡丹皮 20 g、黃芩 25g、赤芍 25g、玄參 25g、知母 30 g、連翹30g、桔梗 25g、甘草 15g、淡竹葉 25g，用適量蒸餾水浸泡2h，加10倍量水煎煮2次，每次1.5h，濾過，合并濾液，濃縮成每1mL相當(dāng)于原生藥2g的溶液，4℃下保存?zhèn)溆谩?/p>

1.2.2 清瘟敗毒飲對內(nèi)毒素所致家兔發(fā)熱的影響

1.2.2.1 供試動(dòng)物選擇。試驗(yàn)前24～48h，預(yù)先測量家兔的體溫3～4次，每次間隔時(shí)間不少于1 h，然后選擇體溫在38.0～39.6℃，且最高體溫與最低體溫相差不超過0.4℃的家兔作為供試動(dòng)物。

1.2.2.2 試驗(yàn)分組。取合格家兔，隨機(jī)分成4組，分別為模型對照組（A組）、清瘟敗毒飲高劑量組（B組）、清瘟敗毒飲低劑量組（C組）、復(fù)方阿司匹林對照組（D組）。

1.2.2.3 建立發(fā)熱模型。攻毒前給試驗(yàn)家兔測3次肛溫，取其平均值作為基礎(chǔ)體溫，除模型對照組外，其余各組在耳緣靜脈注射大腸桿菌內(nèi)毒素溶液2μg/kg，于攻毒后連續(xù)測溫6次，每次間隔1h。

1.2.2.4 給藥方法。各試驗(yàn)組在攻毒后立即開始給藥，模型對照組只給予等量生理鹽水，各組的給藥劑量如表1所示。

表1 動(dòng)物分組及給藥情況

1.2.3 清瘟敗毒飲對二甲苯致小鼠耳廓腫脹的影響 取雄性小白鼠40只，體重18～22g，隨機(jī)分成4組：生理鹽水對照組（A組），復(fù)方阿司匹林對照組（B組），清瘟敗毒飲低劑量組（C組），清瘟敗毒飲高劑量組（D組）。各組每天給藥1次，連續(xù)3d。末次給藥1h后，在小白鼠右耳廓涂0.05mL二甲苯。1h后處死小白鼠，用8mm打孔器在左右耳廓相同部位打孔取材，用分析天平稱重，以耳片重量差值（g）作為腫脹度，算出腫脹抑制率。

腫脹抑制率＝（生理鹽水組腫脹均值－用藥組腫脹均值）÷生理鹽水組腫脹均值×100%

1.2.4 統(tǒng)計(jì)方法 數(shù)據(jù)用x軃±sd表示，采用簡明統(tǒng)計(jì)cs12.0軟件進(jìn)行單因素方差分析，樣本數(shù)據(jù)兩兩比較的q檢驗(yàn)采用Newman-Keuls法。

2 結(jié)果與分析

2.1 清瘟敗毒飲對內(nèi)毒素所致家兔發(fā)熱的影響 由表2結(jié)果可知：清瘟敗毒飲對內(nèi)毒素所致的發(fā)熱家兔，有一定的解熱作用。3h過后的給藥組與模型對照組比較，體溫顯著或極顯著降低（P＜0.05或P＜0.01）。

表2 清瘟敗毒飲對內(nèi)毒素致家兔發(fā)熱的影響

2.2 清瘟敗毒飲對二甲苯致小鼠耳廓腫脹的影響 由表3結(jié)果可知：清瘟敗毒飲對二甲苯所致的小鼠耳廓腫脹有一定的抑制作用，其結(jié)果與生理鹽水對照組比較，差異顯著（P＜0.05）。

表3 清瘟敗毒飲對二甲苯致小鼠耳廓腫脹的影響

3 討論與結(jié)論

炎癥、發(fā)熱是臨床上最為常見的病理過程之一，因此對解熱、抗炎藥物的研究具有重要的臨床意義。半個(gè)世紀(jì)以來，人們主要以糖皮質(zhì)激素為代表的甾體類藥物和以水楊酸為代表的非甾體類藥物治療發(fā)熱及炎癥性疾病，雖然有一定的效果，但由于這兩類藥物均存在明顯的不良反應(yīng)，因而限制了它們的臨床應(yīng)用，這也促進(jìn)了新型、安全的解熱抗炎類藥物的開發(fā)進(jìn)程。

清瘟敗毒飲由石膏、生地、水牛角、黃連等14味中藥組成，是大寒解毒之劑。方中綜合白虎湯、犀角地黃湯、黃連解毒湯三方加減，合為一方。白虎湯清陽明經(jīng)屬大熱，犀角地黃湯清陰涼血，黃連解毒湯瀉火解毒，加上竹葉清心利尿，桔梗、連翹載藥上行，共奏清熱解毒、涼血救陰之功。

4 結(jié)論

本次試驗(yàn)結(jié)果表明，清瘟敗毒飲可以顯著抑制細(xì)菌內(nèi)毒素所致的家兔發(fā)熱反應(yīng)和二甲苯所致的小鼠耳廓腫脹，表現(xiàn)出一定的解熱和抗炎作用。本試驗(yàn)結(jié)果與文獻(xiàn)報(bào)道的一致。

參與文獻(xiàn)：

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[3] 袁宗輝.飼料藥物學(xué)[M].北京：中國農(nóng)業(yè)出版社，2001.

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