均勻設(shè)計試驗篩選阿替洛爾分散片的處方

董曉晨，趙文明（遼寧醫(yī)學(xué)院，遼寧錦州121001）

分散片又稱水分散片，是指在水中能迅速崩解并均勻分散的片劑[1]。這一劑型具有吸收快、生物利用度高、不良反應(yīng)少、制備工藝簡單等性能，且可直接吞服、咀嚼或投入水中分散后服用，特別適用于兒童、老年人及吞服困難的患者，因此得到廣泛關(guān)注。

阿替洛爾（Atenolol）是β1受體阻滯藥，通過減慢心率、降低心輸出量而發(fā)揮降血壓作用，能有效降低心臟收縮期和舒張期的血壓[2]，主要用于治療高血壓、心絞痛及心律失常、青光眼的眼壓控制等。阿替洛爾療效準(zhǔn)確、臨床應(yīng)用廣泛，但為難溶性藥物、生物利用度低[3]，故影響其療效。目前國內(nèi)僅有普通片上市。為提高阿替洛爾的溶出度和生物利用度，筆者將阿替洛爾與適宜的輔料制備成分散片，并采用均勻設(shè)計試驗，以溶出度為指標(biāo)，考察了填充劑、崩解劑、潤滑劑、黏合劑的用量，對阿替洛爾分散片進(jìn)行處方篩選。

1 材料

1.1 儀器

L-2000Elite型高效液相色譜儀（日立高新技術(shù)集團(tuán)，配二極管陣列檢測器）；UV-2550島津紫外分光光度計（日本Shimadzu公司）；RC-6溶出度測試儀（天津市新天光分析儀器技術(shù)有限公司）；BJ-2A智能崩解儀（天津創(chuàng)興電子設(shè)備制造有限公司）；TDP-1.5型單沖壓片機(jī)（上海旺群制藥機(jī)械有限公司）；硬度儀（上海黃海藥檢儀器）；FA1004N電子天平（上海精密科學(xué)儀器有限公司）。

1.2 藥品與試劑

阿替洛爾對照品（中國食品藥品檢定研究院，批號：100117-200504，純度：99.8%）；阿替洛爾片（江蘇方強(qiáng)制藥廠有限責(zé)任公司，批號：20120516，規(guī)格：25 mg/片）；阿替洛爾原料藥（武漢大華偉業(yè)醫(yī)藥化工有限公司，批號：20120620，純度：99.0%）；阿替洛爾分散片樣品（自制，批號：130512、130513、130514，規(guī)格：25 mg/片）；微晶纖微素（MCC）、羧甲基淀粉鈉（CMS-Na）、預(yù)膠化淀粉、硬脂酸鎂均來自安徽山河藥用輔料股份有限公司，無水乙醇為分析純。

2 方法與結(jié)果

2.1 制備工藝

將原料過200目篩，輔料過100目篩，按處方篩選中各處方配比量稱取原、輔料。將阿替洛爾與MCC、預(yù)膠化淀粉、CMS-Na（內(nèi)加部分）混合均勻，以50%乙醇溶液為黏合劑制軟材，過24目篩制濕粒，烘干，整粒。加入CMS-Na（外加部分）、硬脂酸鎂，混合均勻，壓片。

2.2 填充劑的篩選

根據(jù)分散片常規(guī)處方工藝，采用MCC和預(yù)膠化淀粉作為分散片的填充劑，其余組分投料量不變，片劑硬度控制在4～5 kg，崩解劑加入方法為內(nèi)加法。以分散片外觀光潔度和30 min體外累積溶出度為指標(biāo)進(jìn)行考察，分別考察MCC、預(yù)膠化淀粉兩者分別單獨使用及以質(zhì)量比為1∶1、1∶2、2∶1混合作為填充劑時對片劑質(zhì)量的影響。填充劑種類篩選試驗結(jié)果見表1。

表1 填充劑篩選結(jié)果Tab 1 Results of filler selection

表1結(jié)果表明，將MCC和預(yù)膠化淀粉兩種填充劑混合使用，制得的片劑表面光潔，溶出度較二者單獨使用時高。由于MCC具有多孔性，會吸附主藥，導(dǎo)致溶出度偏低，并且具有吸水性，能迅速吸水，因此與預(yù)膠化淀粉混合使用能使片劑迅速崩解[4]。故選用以MCC和預(yù)膠化淀粉質(zhì)量比為1∶1作為填充劑。

2.3 崩解劑的篩選

在處方3的基礎(chǔ)上，以MCC和預(yù)膠化淀粉為填充劑，控制片劑硬度在4～5 kg，崩解劑加入方法為內(nèi)加法。以分散片外觀光潔度和崩解時限為指標(biāo)進(jìn)行考察，對CMS-Na、低取代羥丙基纖維素（L-HPC）、干淀粉3種崩解劑進(jìn)行篩選，篩選結(jié)果見表2。

表2 崩解劑篩選結(jié)果Tab 2 Results of disintegrating agent selection

表2結(jié)果表明，片劑外觀以CMS-Na制得片劑最優(yōu)；3種崩解劑制得片劑崩解時限順序為CMS-Na＜L-HPC＜干淀粉，故選用CMS-Na為崩解劑。

2.4 崩解劑加入方法的選擇

在處方3的基礎(chǔ)上，崩解劑加入方法分別采用內(nèi)加法、外加法、內(nèi)外加法，其余組分投料量不變，分別壓片。對所得分散片以外觀光潔度、硬度、崩解時限、30 min體外累積溶出度為指標(biāo)進(jìn)行考察，結(jié)果見表3。

表3 不同崩解劑加入方法對分散片質(zhì)量的影響Tab 3 Effects of different adding methods with disintegrating agent on dispersible tablets

表3結(jié)果表明，外加法溶出效果最好，但外觀不佳，細(xì)粉較多，并且片子硬度不易控制；內(nèi)加法崩解最快，但溶出較慢；內(nèi)外加法既有利于片劑的崩解，也有利于片劑的溶出，故崩解劑加入方法選擇內(nèi)外加法。

2.5 黏合劑的篩選

由于阿替洛爾與聚乙烯吡咯烷酮有配伍反應(yīng)[5]，并且遇水黏性較大，故擬選用純水、50%乙醇、3%淀粉漿為黏合劑，在確定的填充劑種類、崩解劑種類及其加入方法的基礎(chǔ)上，按“2.1”項下方法制備，觀察所得顆粒形態(tài)并以分散片外觀光潔度、硬度、崩解時限為指標(biāo)對黏合劑進(jìn)行篩選，結(jié)果見表4。

表4 黏合劑篩選結(jié)果Tab 4 Results of adhesive selection

表4結(jié)果表明，用50%乙醇作黏合劑制得顆粒大小均勻，片劑外觀最佳，硬度容易控制并且崩解時限合適，故選用50%乙醇作為黏合劑。

2.6 分散片處方優(yōu)化

由以上單因素試驗結(jié)果可知，對阿替洛爾分散片制備工藝影響較大的因素為填充劑中MCC的用量、崩解劑CMS-Na的用量、乙醇的質(zhì)量分?jǐn)?shù)。通過相關(guān)文獻(xiàn)[6-7]可知，近幾年來大多采用微粉硅膠作潤滑劑，但微粉硅膠與阿替洛爾有配伍反應(yīng)[5]，故選用硬脂酸鎂作潤滑劑。壓片時，硬脂酸鎂的用量可直接影響片劑的彈性形變[8]，因此，硬脂酸鎂的用量對阿替洛爾分散片制備工藝影響較大。

2.6.1 均勻設(shè)計優(yōu)化處方。4個考察因素及其基本范圍[4，8]分別為：MCC用量（A）25%～45%；CMS-Na用量（B）4%～7%；硬脂酸鎂用量（C）0.46%～1.06%；乙醇的質(zhì)量分?jǐn)?shù)（D）10%～60%。用預(yù)膠化淀粉調(diào)節(jié)片重。

選擇U11（1110）表[9]中1，2，5，7列，并以30 min的體外累積溶出度為指標(biāo)對各因素進(jìn)行篩選，結(jié)果見表5（括號內(nèi)為水平編號）。

2.6.2 計算結(jié)果。利用均勻設(shè)計軟件，通過逐步回歸法得回歸方程：溶出度（y）＝43.80+1.873×B+6.35×10－3×AB+1.063×10－2×AC－9.317×10－3×B2（r＝0.9957）；檢驗值F＝172.7，F(xiàn)＞F（0.05，4，6）＝4.534，F(xiàn)驗證通過（α＝0.05）。

表5 均勻設(shè)計試驗方案與結(jié)果（n＝6）Tab 5Uniform design experiment program and result（n＝6）

2.6.3 優(yōu)選處方的選定。均勻設(shè)計計算結(jié)果表明，各因素影響溶出度的主次順序為：A和B的交互作用＞B＞A和C的交互作用，D因素和溶出度關(guān)系不大。經(jīng)均勻設(shè)計軟件自動優(yōu)化可知，當(dāng)取A 45.0%、B 7.0%、C 1.00%時可使y值最大，溶出度最大。綜合考慮制粒過程中黏合劑隨乙醇質(zhì)量分?jǐn)?shù)增加，顆粒細(xì)粉隨之增加，黏性降低，故D取40%。最終確定優(yōu)選處方為A11B11C10D7，即A45.0%、B 7.0%、C 1.00%、D 40%。

2.7 驗證試驗

按最優(yōu)處方制備3批阿替洛爾分散片，檢查質(zhì)量，驗證處方的合理性。

2.7.1 分散均勻度。依據(jù)2010年版《中國藥典》（二部）相關(guān)要求，取供試品6片，置于250 ml燒杯中，加15～25℃的水100 ml，振搖3 min，應(yīng)全部崩解并通過二號篩，結(jié)果詳見表6。

表6 3批阿替洛爾分散片驗證試驗結(jié)果Tab 6 Results of validation test of 3 batches of Atenolol dispersible tablets

2.7.2 混懸液穩(wěn)定性[10]。取3批阿替洛爾分散片各1片，分別加入（20±1）℃水50 ml，充分?jǐn)嚢?，立即?00 nm波長處測其透光率，并記錄0、5、10、15、20、25、30 min時的透光率（T0和Tt）。各批次樣品分別測定6次，取算數(shù)平均值后計算（Tt－T0）/T0，以（Tt－T0）/T0對時間作圖，經(jīng)線性回歸，計算斜率k。k值越小，表明混懸液沉降越慢，越穩(wěn)定。結(jié)果詳見表6。

表6結(jié)果表明，該制備工藝條件下制成的阿替洛爾分散片均符合2010年版《中國藥典》中片劑的相關(guān)規(guī)定，該處方合理，制備工藝穩(wěn)定可行。

2.8 溶出度

2.8.1 方法學(xué)考察。標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制：精密稱取阿替洛爾對照品0.025 g，置于500 ml量瓶中，用鹽酸溶液（9→1000）溶解并稀釋至刻度，精密移取上述溶液10、15、20、25、30、35、40 ml至100 ml量瓶中，用鹽酸溶液定容，搖勻；在224 nm波長處測得吸光度，以質(zhì)量濃度（c）對吸光度（A）進(jìn)行線性回歸；得標(biāo)準(zhǔn)曲線方程A＝0.0357c+0.0093（r＝0.9999），表明阿替洛爾線性范圍為5～20 μg/ml。精密度試驗RSD＝0.87%（n＝6），符合精密度試驗要求。平均回收率為99.8%，RSD＝1.08%（n＝3）。

2.8.2 與普通片劑溶出度比較。取樣品（批號：130512）和市售普通片各6片，溶出度試驗采用槳法[1]，以鹽酸溶液（9→1000）1000 ml為溶出介質(zhì)，轉(zhuǎn)速50 r/min，依法操作，分別于5、10、15、20、30、45 min時取溶液測定并計算其體外累積溶出度。分散片樣品及普通片的溶出度見表7，溶出曲線見圖1。

表7 2種片劑的體外累積溶出度比較（%%，±s，n＝6）Tab 7 Comparison of accumulative dissolution rate between 2 kinds of tablet（s%%，±s，n＝6）

表7 2種片劑的體外累積溶出度比較（%%，±s，n＝6）Tab 7 Comparison of accumulative dissolution rate between 2 kinds of tablet（s%%，±s，n＝6）

劑型普通片分散片時間，min 513.5±1.544.3±2.71032.1±1.777.2±4.51547.7±1.990.3±1.22060.2±3.391.3±0.93077.7±3.492.3±0.94589.0±1.293.4±0.9

圖1 兩種片劑的溶出曲線Fig 1 Dissolution curves of 2 kinds of tablets

由圖1可知，分散片溶出速率明顯高于普通片，達(dá)到溶出平臺期時間較短，最終溶出度高。對兩種劑型參數(shù)進(jìn)行方差分析，結(jié)果差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.01）。分析表明，分散片的溶出速率比普通片快，且各參數(shù)間差異具有顯著性。

3 討論

本處方中阿替洛爾的用量是依據(jù)2010年版《中國藥典》（二部）中阿替洛爾標(biāo)準(zhǔn)制訂的。

在填充劑篩選試驗中，由于MCC在片劑中的用量通常為15%～45%，并且阿替洛爾用量較小，所以筆者考慮用部分預(yù)膠化淀粉代替MCC作為填充劑。此外，MCC除可作為填充劑以外，亦有崩解劑作用[11-12]，并與CMS-Na相容性較好。通過對崩解劑加入方法的進(jìn)一步研究，使分散片的崩解性能和溶出速率大大提高。試驗表明，黏合劑乙醇對分散片的溶出度影響不大。

分散均勻度要求片劑3 min內(nèi)完全崩解并通過二號篩，且主藥溶出度與顆粒大小成反比，故選擇24目篩制粒。片劑的硬度會對片劑的崩解、主藥的溶出度、片劑的生產(chǎn)、運(yùn)輸和貯存帶來直接影響。經(jīng)綜合考慮，本試驗分散片硬度采用4～5 kg。試驗證明，制得的阿替洛爾分散片崩解時限短、溶出速率快、制備工藝簡單可行。因此，阿替洛爾分散片的研制具有良好的應(yīng)用前景。

[1]國家藥典委員會.中華人民共和國藥典：二部[S].2010年版.北京：中國醫(yī)藥科技出版社，2010：附錄ⅠA、附錄74.

[2]Kmap O，Sieswedra GT，Visser CA.Comparison of effects on systolic and diastolic left ventricular function of nebivolol versus atenolol in patients with uncomplicated essential hypertension[J].Am J Cardiol，2003，92（3）：344.

[3]胡國鈞.阿替洛爾的藥理[J].新藥與臨床，1989，8（3）：176.

[4]羅明生，高天惠.藥劑輔料大全[M].成都：四川科學(xué)技術(shù)出版社，2003：742-744.

[5]梁榮財，范本杰，孫考祥.阿替洛爾與片劑輔料相容性的熱分析考察[J].中國藥業(yè)，2009，18（10）：19.

[6]姚夢竹，洪怡.分散片研究進(jìn)展[J].數(shù)理醫(yī)藥學(xué)雜志，2012，25（6）：717.

[7]唐建濤，黃占周，張志剛.分散片研究進(jìn)展[J].臨床合理用藥，2011，4（12A）：180.

[8]郭仁庭，覃忠富，傅長明.硬脂酸鎂的性質(zhì)、應(yīng)用及市場前景綜述[J].企業(yè)科技與發(fā)展，2011（7）：15.

[9]張春華，嚴(yán)云良.醫(yī)藥數(shù)理學(xué)統(tǒng)計[M].北京：科技出版社，2001：270-271.

[10]韓麗梅，王卓，鄧英杰.用透光率評價分散片混懸性的方法[J].藥物分析雜志，1996，16（6）：396.

[11]姚敦武，何清林，肖德華.加替沙星分散片處方及制備工藝研究[J].中國藥房，2006，17（9）：659.

[12]彭禮明.分散片處方、工藝特點及其進(jìn)展[J].藥品評價，2005，2（3）：230.