葉黃素和維生素C對高溫環(huán)境中蛋雞生產(chǎn)性能及蛋品質(zhì)的影響

安立龍，唐攀喜，蔡燕婷，唐會會，尹福泉

(廣東海洋大學(xué)農(nóng)學(xué)院，廣東 湛江 524088)

家禽體表羽毛稠密，皮膚沒有汗腺，在高溫下會受到急性或慢性熱應(yīng)激的影響[1]。一般成年雞的生長適宜溫度為8 ℃～27 ℃，產(chǎn)蛋適宜溫度為13 ℃～23 ℃，溫度超過28 ℃后蛋雞開始出現(xiàn)熱應(yīng)激反應(yīng)[2]。熱應(yīng)激會對動物機(jī)體造成傷害，導(dǎo)致動物采食量下降，代謝紊亂，進(jìn)而降低生產(chǎn)性能[3]。

萬壽菊葉黃素來自于萬壽菊花，是一種天然無毒的色素。葉黃素具有較強(qiáng)的抗氧化能力[4]、著色作用[5]、增強(qiáng)免疫作用[6]、抗癌作用[7]。VC主要通過影響機(jī)體免疫力而提高抗應(yīng)激能力[8]。目前，關(guān)于葉黃素在家禽生產(chǎn)中應(yīng)用的研究均為常溫自然條件，葉黃素主要起到著色的功能，對生產(chǎn)性能和蛋品質(zhì)的影響不大。牛玉竹等[9]、劉國道等[10]和高楊等[11]的試驗都表明葉黃素對常溫下蛋雞的生產(chǎn)性能無顯著影響，但是黃小春等[12]卻發(fā)現(xiàn)52周齡綠殼產(chǎn)蛋雞采食20、40、60、80、100 mg/kg葉黃素后，產(chǎn)蛋率由對照組的68.06%提高到76.19%，蛋重增加了0.1 g，采食量增加7 g/d，但是差異不顯著，推測可能是葉黃素的顏色對蛋雞的采食起到促進(jìn)作用，進(jìn)而促進(jìn)生產(chǎn)性能的提高。在常溫條件下添加葉黃素類物質(zhì)對蛋雞蛋殼厚度、蛋殼相對重、蛋黃比率均無明顯影響，哈氏單位隨著添加量的增加逐漸增加[11,13]。迄今為止，MAR與VC復(fù)合劑對高溫環(huán)境下羅曼粉殼蛋雞的生產(chǎn)性能和蛋品質(zhì)的影響尚未報道。因此，本試驗擬研究不同水平的MAR與VC復(fù)合劑對高溫環(huán)境下羅曼蛋雞的生產(chǎn)性能和蛋品質(zhì)的影響，旨在為其科學(xué)應(yīng)用提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

MAR購自河北美科爾生物科技有限公司(80%)，VC購自天津新鄭藥業(yè)集團(tuán)有限公司。

1.2 試驗設(shè)計與飼糧

試驗采用單因子試驗設(shè)計，選擇216只180日齡的羅曼粉蛋雞，隨機(jī)分為6個組，每組3個重復(fù)，每個重復(fù)12只雞。預(yù)試期14 d，正式期42 d。試驗1組為高溫對照組，飼喂基礎(chǔ)日糧，試驗2組飼喂基礎(chǔ)日糧+200 mg/kg VC，試驗3、4、5、6組在試驗2組的基礎(chǔ)上，分別添加60 mg/kg、120 mg/kg、180 mg/kg、240 mg/kg萬壽菊葉黃素(分別組成復(fù)合劑Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ)。

基礎(chǔ)日糧根據(jù)《中華人民共和國專業(yè)標(biāo)準(zhǔn)》(ZB B 43005-86)蛋雞飼養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)，并結(jié)合相關(guān)文獻(xiàn)報道和本地實(shí)際情況自行設(shè)計(見表1)。

表1 基礎(chǔ)日糧和營養(yǎng)水平Table 1 Composition and nutrient level of the basal diet

注：1.每千克飼料添加VA9 000 IU，VD2 500 IU，VE20 IU，VB1212 μg，VK 2.4 mg；2.每千克飼料添加微量元素Mn100 mg, Zn 60 mg, Fe25 mg, Cu 5 mg, Co 0.1 mg (Mn、Zn、Fe、Cu、Co均以硫酸鹽形式添加)，Se(N2SeO3·5H2O) 0.2 mg, I(KI) 0.5 mg；

Note：1.Per kg of feed provided: vitamin A 9000 IU, vitamin D 2500 IU, vitamin E 20 IU, vitamin B1212 μg, vitamin K 2.4 mg;2.Per kg of feed provided: Mn100 mg, Zn 60 mg, Fe 25 mg, Cu 5 mg, Co 0.1 mg (Mn、Zn、Fe、Cu、Co are provided in the form of sulphate)，Se(N2SeO3·5H2O) 0.2 mg, I(KI) 0.5 mg.

1.3 飼養(yǎng)管理

采用三層階梯式蛋雞籠飼養(yǎng)，每籠3只，自然光照與人工補(bǔ)光相結(jié)合，每天光照時間16 h，光照強(qiáng)度為15 LX，雞舍平均溫度為32.05 ℃，平均濕度為84.69%，雞舍環(huán)境保持高溫高濕(見表2)，通風(fēng)方式采取自然通風(fēng)。飼料采用干粉料，自由采食和飲水，每天飼喂兩次喂料，收蛋。按常規(guī)管理進(jìn)行免疫和驅(qū)蚊蟲。

表2 試驗期高溫雞舍溫度和相對濕度Table 2 Temperature and relative humidity in high temperature chicken house

1.4 指標(biāo)測定與方法

1.4.1 蛋雞生產(chǎn)性能 記錄每天產(chǎn)蛋數(shù)、蛋重、破軟蛋、死淘數(shù)。計算平均日采食量(g/d·只)、平均蛋重(g)、料蛋比、產(chǎn)蛋率(%)。

1.4.2 蛋品質(zhì) 試驗期間每7 d從各重復(fù)抽取4枚雞蛋樣品，第二天測定蛋品質(zhì)。每組12枚用于測定蛋重(電子天平稱重，精確到0.1 g)，蛋形指數(shù)(游標(biāo)卡尺測量法)，蛋殼厚度(游標(biāo)卡尺測量法)，蛋殼相對重(電子天平稱重，精確到0.1 g)，蛋黃相對重(電子天平稱重，精確到0.1 g)，蛋黃顏色(羅氏比色扇)，a*(紅值)、b*(黃值)、L*(亮值)(色差儀測定)，蛋黃直徑(游標(biāo)卡尺測量法)，蛋白高度(游標(biāo)卡尺測量法)，計算蛋黃系數(shù)、哈氏單位。

蛋黃系數(shù)=高度/直徑×100%；

哈氏單位Hu=100 log (H-1.7W0.37+7.6)，H-濃蛋白的高度(mm)，W-蛋重(g)。

2 數(shù)據(jù)處理

采用SPSS17.0軟件對試驗數(shù)據(jù)進(jìn)行單因素方差分析，LSD法多重比較，數(shù)據(jù)采用“平均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差”表示。

3 結(jié)果與分析

3.1 MAR和VC對高溫環(huán)境中蛋雞生產(chǎn)性能影響

3.1.1 MAR和VC對采食量影響 由表3可知，整個試驗期，在高溫環(huán)境中，與高溫對照組相比，VC組的采食量較高溫對照組提高了24.93%(P<0.01)，各復(fù)合劑組均能極顯著提高采食量，其中復(fù)合劑Ⅱ、Ⅳ組分別提高26.79%(P<0.01)、40.76%(P<0.01)；復(fù)合劑組與VC組相比，復(fù)合劑Ⅱ、Ⅳ組分別提高8.54%(P<0.05)、11.25%(P<0.05)。并且，隨著復(fù)合劑組葉黃素含量的增加，采食量也隨之增加。

3.1.2 MAR和VC對平均蛋重影響 與高溫對照組相比，VC組與復(fù)合劑Ⅱ組分別極顯著提高平均蛋重11.13%(P<0.01)、4.1%(P<0.01)，蛋重以VC組的蛋重最大；與VC組相比，各復(fù)合劑組的平均蛋重均小于VC組，差異顯著(P<0.05)。

3.1.3 MAR和VC對料蛋比的影響 與高溫對照組相比，飼料中添加VC對料蛋比的影響差異不顯著(P>0.05)，但同時添加VC和葉黃素，可顯著提高蛋雞料蛋比，其中，復(fù)合劑Ⅲ組提高43.55%(P<0.01)；與VC組相比，復(fù)合劑Ⅲ組提高16.48%(P<0.05)。

3.1.4 MAR和VC對產(chǎn)蛋率的影響 與高溫對照組相比，飼料中添加VC對產(chǎn)蛋率的影響差異不顯著(P>0.05)，但同時添加VC和葉黃素，可顯著提高蛋雞產(chǎn)蛋率，其中，復(fù)合劑Ⅱ組、復(fù)合Ⅳ組的產(chǎn)蛋率分別比高溫對照組提高13.87%(P<0.05)、22.44%(P<0.01)；與VC組相比，復(fù)合劑Ⅱ組、復(fù)合Ⅳ組的產(chǎn)蛋率分別提高14.3%(P<0.05)、20.27%(P<0.01)。

3.1.5 MAR和VC對破殼率的影響 與高溫對照組相比，單獨(dú)添加VC，破殼率低46.51%(P<0.01)，同時添加VC和葉黃素，顯著降低破殼蛋率，其復(fù)合劑Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ組均降低53.49%(P<0.01)、34.89%(P<0.01)、51.16%(P<0.01)。與VC組相比，復(fù)合劑Ⅱ組破殼率低13.04%(P<0.01)。

3.1.6 MAR和VC對死亡率的影響 對照組及各試驗組，沒有出現(xiàn)死亡，死淘率為0。

表3 MAR和VC對高溫環(huán)境中蛋雞生產(chǎn)性能的影響Table 3 The influence of MAR and VC on production performance of laying hens in high temperature

注：同列數(shù)據(jù)肩標(biāo)不同小寫字母表示差異顯著(P<0.05)，不同大寫字母表示差異極顯著(P<0.01)，無字母或者字母相同表示差異不顯著(P>0.05)。下同。

Note： In the same column, values with different lowercase superscripts mean significant difference(P<0.05), values with different capital superscripts mean extreme difference(P<0.01), values with same letter superscripts mean insignificant difference(P<0.05).The same below.

3.2 MAR和VC對高溫環(huán)境中蛋雞蛋品質(zhì)的影響

3.2.1 MAR和VC對蛋形指數(shù)的影響 由表4可知，與高溫對照組相比，VC組的蛋形指數(shù)高于高溫對照組，復(fù)合劑Ⅱ組蛋形指數(shù)低于高溫對照組，差異均顯著(P<0.05)；與VC組相比，復(fù)合劑Ⅱ組蛋形指數(shù)顯著低于VC組。

表4 MAR和VC對高溫環(huán)境中蛋雞蛋品質(zhì)的影響Table 4 The influence of MAR and VC on egg quality of laying hens in high temperature

3.2.2 MAR和VC對蛋殼相對重的影響 與高溫對照組相比，VC組蛋殼相對重較高溫對照組小(P<0.05)，復(fù)合劑組差異不顯著；與VC組相比，復(fù)合劑Ⅲ組顯著高于VC組(P<0.05)。

3.2.3 MAR和VC對蛋殼厚度的影響 試驗過程，與高溫對照組相比，VC組蛋殼厚度較高溫組升高4.92%(P<0.05)，其差異不顯著(P>0.05)；復(fù)合劑Ⅰ組與VC組之間顯著差異，蛋殼厚度升高，其他復(fù)合劑組與VC之間無顯著差異(P>0.05)。

3.2.4 MAR和VC對哈氏單位的影響 各試驗組的哈氏單位均大于高溫對照組，差異不顯著(P>0.05)。

3.2.5 MAR和VC對蛋黃相對重的影響 VC組蛋黃相對極重顯著高于高溫對照組(P<0.01)，復(fù)合劑組與高溫對照組之間的蛋黃相對重?zé)o顯著差異(P>0.05)，VC組與各復(fù)合劑組蛋黃相對重之間差異極顯著(P<0.01)。

3.2.6 MAR和VC對蛋黃系數(shù)的影響 與高溫對照組相比，VC組與復(fù)合劑Ⅱ組的蛋黃系數(shù)較高溫對照組分別降低6.0%(P<0.01)、3.99%(P<0.01)，其他各復(fù)合劑組與高溫對照組差異不顯著(P>0.05)；與VC組相比，復(fù)合劑Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ組蛋黃系數(shù)極顯著高于VC組(P<0.01)。

3.3 MAR和VC對蛋黃色澤的影響

表5 MAR和VC對高溫環(huán)境中蛋雞蛋黃RCF、L、a*、b*的影響Table 5 The influence of MAR and VC on RCF, L, a*,b* of yolk of laying hens in high temperature

圖1 未添加MAR與添加MAR蛋黃顏色比較(左：未添加MAR；右：添加MAR)Fig. 1 Comparison of yolk color with MAR and without MAR (Left: with MAR; Right: without MAR)

圖2 未添加MAR與添加MAR蛋黃煮熟后顏色比較(左：未添加MAR；右：添加MAR)Fig. 2 Comparison of yolk color of cooked egg with MAR and without MAR (Left: with MAR; Right: without MAR)

由表5可知，隨著葉黃素添加量的不斷增加，蛋黃的RCF值逐漸升高(如圖1、圖2所示)。在高溫條件下，與高溫對照組相比，VC組提高蛋黃RCF值1.03個等級，差異不顯著(P>0.05)；各復(fù)合劑組蛋黃RCF值分別提高1.43(P<0.01)、2.12(P<0.01)、2.41(P<0.01)、3.21(P<0.01)個等級。

試驗結(jié)果表明，在高溫條件下，隨著葉黃素添加量的增大，蛋黃L值逐漸減小，蛋黃紅度(a*)隨著葉黃素添加量的增大而升高，黃度(b*)也明顯升高。與高溫對照組相比，VC組紅度(a*)極顯著升高了33.33%(P<0.01)，復(fù)合劑組的紅度(a*)分別提高75.8%(P<0.01)、90.37%(P<0.01)、91.60%(P<0.01)、123.2%(P<0.01)；復(fù)合劑組黃度(b﹡)分別升高7.29%(P<0.01)、11.36%(P<0.01)、11.17%(P<0.01)、11.00%(P<0.01)。

3.4 雞蛋風(fēng)味

試驗期內(nèi)，分別采用蒸、煮、炒等不同方法對1～6各組雞蛋進(jìn)行加工，品嘗結(jié)果表明，無論哪種吃法，與高溫對照組及VC組比較，添加葉黃素的復(fù)合劑組雞蛋均表現(xiàn)口感滑嫩、味道甘甜濃香等特點(diǎn)，且以復(fù)合劑Ⅱ組效果最好。說明飼料中添加葉黃素有明顯改善雞蛋風(fēng)味的作用。

4 討 論

4.1 MAR和VC對生產(chǎn)性能的影響

本研究發(fā)現(xiàn)，在日糧中添加200 mg/kg VC極顯著提高高溫環(huán)境中羅曼蛋雞的采食量和蛋重，降低軟、破殼率。產(chǎn)蛋雞日糧中VC的含量達(dá)到150～200 mg/kg就能表現(xiàn)出有效的抗熱應(yīng)激效果[14-15]，與環(huán)境溫度、VC的純度有關(guān)。

在正常的飼養(yǎng)管理、無應(yīng)激反應(yīng)的條件下進(jìn)行，在日糧中添加色素對生產(chǎn)性能的影響結(jié)果不一。Selevaraj等[16]指出適宜溫度條件下，25、50 mg/kg葉黃素與3%油脂配伍使用對肉雞的日增重及飼料轉(zhuǎn)化率均無顯著影響。王曉艷[17]在海蘭褐產(chǎn)蛋雞飼料中添加加麗素紅(富含辣椒紅素)，其產(chǎn)蛋率和蛋重略有改善，而采食量和料蛋比略有下降，但差異性不顯著(P>0.05)。在高溫環(huán)境中在日糧中添加葉黃素對蛋雞生產(chǎn)性能的影響未見報道。本研究在高溫應(yīng)激下添加MAR-VC合劑對其生產(chǎn)性能有明顯的影響，極顯著提高高溫期間羅曼蛋雞的采食量，合劑中的MAR添加量越高，采食量越大，這提示合劑中的MAR對蛋雞采食起到明顯的促進(jìn)作用，效果比單獨(dú)添加VC更好。這可能與MAR其鮮艷的色澤和香味誘導(dǎo)蛋雞采食，以及復(fù)合劑中的VC是較好的抗應(yīng)激因子有關(guān)。因此，兩者配合添加效果更佳。在高溫環(huán)境中，在日糧中添加葉黃素，各復(fù)合劑組產(chǎn)蛋率也明顯提高，120、240 mg/kg MAR-200 mg/kg VC合劑分別使產(chǎn)蛋率提高13.87%、22.44%(P<0.01)。MAR-VC合劑還可明顯降低破殼率，減少蛋雞生產(chǎn)上的損失。這是因為MAR-VC合劑提高了蛋雞的采食量，從而提高了蛋白質(zhì)和鈣磷的攝入量，增加產(chǎn)蛋率和降低雞蛋的破殼率。

4.2 MAR和VC對蛋品質(zhì)常規(guī)指標(biāo)的影響

雞蛋品質(zhì)的評定包括蛋形指數(shù)、蛋殼相對重、蛋殼厚度、哈氏單位、蛋黃相對重、蛋黃系數(shù)等指標(biāo)。影響蛋品質(zhì)的因素有蛋雞品種、蛋雞年齡、環(huán)境條件、營養(yǎng)狀況、疾病因素等。本試驗是在高溫環(huán)境下進(jìn)行的。

有關(guān)MAR對蛋品質(zhì)的影響的報道不多，劉國道等[18]表明2%、3%、4%、5%黃秋葵莖葉(富含葉黃素)對文昌雞蛋形指數(shù)和蛋重均無影響。本研究得到與劉國道等相一致的結(jié)果，MAR-VC合劑對蛋形指數(shù)和蛋重也無顯著影響。研究表明，常溫下添加萬壽菊花粉末或萬壽菊提取物對蛋殼厚度無任何影響[18]，然而，本研究表明在高溫環(huán)境中，羅曼蛋雞的日糧中添加200 mg/kg VC可使蛋殼厚度顯著增加0.016 mm，復(fù)合Ⅲ組顯著增加0.018 mm。熱應(yīng)激使血液中的鈣與乳酸結(jié)合，組織了形成蛋殼腺的碳酸鈣的形成，影響蛋殼質(zhì)量。VC在高溫環(huán)境中可以顯著提高血液中鈣的含量，進(jìn)而促進(jìn)碳酸鈣的形成，增加蛋殼的厚度。本研究發(fā)現(xiàn)，VC可以增加蛋殼厚度，至于MAR對蛋殼形成、鈣的吸收和代謝是否有一定的影響，需要進(jìn)一步探討。

雞蛋的營養(yǎng)主要集中在蛋黃中，蛋黃的相對重反應(yīng)了蛋黃所占全蛋的比例，數(shù)值越大，營養(yǎng)水平越高。本研究表明，在高溫環(huán)境中，復(fù)合劑Ⅱ、Ⅲ組的蛋黃相對重略高于高溫對照組，差異不顯著；VC組高于高溫對照組7.76%(P<0.01)，差異極顯著。原因可能是熱應(yīng)激環(huán)境下，蛋雞的營養(yǎng)物質(zhì)攝入不足，脂類物質(zhì)在蛋黃中的沉積量減少，使蛋黃相對重減小，而葉黃素和VC都具有較強(qiáng)的抗氧化能力，它們可保護(hù)腸道內(nèi)的不飽和脂肪酸的吸收，進(jìn)而提高了蛋黃相對重。曲湘勇等[19]發(fā)現(xiàn)添加油菜和紅辣椒干粉混合物(富含葉黃素)使蛋黃系數(shù)極顯著提高了0.09。本試驗與這一結(jié)果基本一致，添加VC會極顯著降低蛋黃系數(shù)，添加MAR-VC合劑又使蛋黃系數(shù)有所升高。高溫環(huán)境下添加MAR有提高蛋黃系數(shù)的趨勢。

4.3 MAR和VC對蛋黃色澤的影響

蛋禽本身無法合成色素，蛋黃顏色的深淺主要取決于從飼料中攝取的色素種類和數(shù)量。葉黃素是日糧和蛋黃中的主要色素，葉黃素被家禽吸收后結(jié)構(gòu)不發(fā)生任何改變，可穩(wěn)定的在皮膚、肌肉和蛋黃中沉積著色。

在日糧中適量添加葉黃素可明顯提高蛋黃的色澤，蛋黃的色澤與葉黃素的添加量呈顯著相關(guān)性。李慶德[20]在海蘭褐種雞日糧中100 mg/kg萬壽菊提取物(葉黃素凈含量12 mg/kg)，蛋黃顏色可達(dá)8.6級，顏色呈深黃色。本試驗中蛋黃顏色等級也隨著MAR添加量的增加而升高，顏色等級由7.13升高到8.91，當(dāng)添加量為240 mg/kg時，蛋黃顏色較高溫對照組、VC組分別升高3.21、2.18個等級。

黃小春等[21]研究結(jié)果表明，試驗第28 d開始，100 mg/kg葉黃素試驗組的蛋黃L值較20 mg/kg葉黃素組降低3.82%，而a*值升高14.26%，b*值無變化。本研究得出以上研究相一致的結(jié)果，蛋黃L*有所下降，但差異不顯著；當(dāng)MAR添加量在120～240 mg/kg范圍內(nèi)增加時，a*值由7.12增大到9.04，而b*值無顯著變化。但是與阿倫[22]、Kanda Lokaewmanee,等[23]報道的葉黃素可提高蛋黃b*值的結(jié)果有所不同。蛋黃L值隨著葉黃素添加量增加而降低，因為葉黃素在蛋黃中沉積，顏色加深，蛋黃變暗。本試驗中蛋黃b*值的變化可能與MAR添加量有關(guān)，當(dāng)MAR的添加量達(dá)到一定程度，蛋黃顏色開始由黃色向紅色發(fā)展，使蛋黃色澤呈橙紅色。

Nami Yoshida等[24]研究表明，30 ℃～32 ℃時來航母雞血液中的脂蛋白含量明顯降低，導(dǎo)致血液中葉黃素含量顯著下降。高溫環(huán)境下葉黃素的轉(zhuǎn)運(yùn)載體減少，飼料中適量的葉黃素與脂蛋白結(jié)合飽和后，多余的葉黃素因缺少載體而使葉黃素在蛋黃中的沉積量受到限制。本研究表明，在高溫環(huán)境下，當(dāng)添加量為180、240 mg/kg時，葉黃素在蛋黃中的沉積量不會明顯增加，本試驗中以添加120 mg/kg MAR為宜。

5 結(jié) 論

高溫環(huán)境中添加120 mg/kg MAR-200 mg/kg VC合劑明顯提高蛋雞的采食量和產(chǎn)蛋率，顯著降低破殼率，雞蛋口感風(fēng)味最好。

日糧中添加200 mg/kg VC和180 mg/kg MAR-200 mg/kg VC合劑均能顯著增加高溫環(huán)境中的蛋殼厚度。200 mg/kg VC可顯著提高蛋黃相對重，降低蛋黃系數(shù)。

在高溫環(huán)境中，MAR添加量為180、240 mg/kg時，葉黃素在蛋黃中的沉積量不會明顯增加，本試驗中以添加120 mg/kg MAR為宜。

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