• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    博落回提取物在仔豬生產(chǎn)中的應用效果研究

    2013-11-30 04:43:34李美荃張春勇安清聰陳克嶙郭榮富
    家畜生態(tài)學報 2013年9期
    關鍵詞:博落回土霉素沙門氏菌

    李美荃,張春勇,滿 意,安清聰,陳克嶙,郭榮富

    (云南農(nóng)業(yè)大學 云南省動物營養(yǎng)與飼料重點實驗室,云南 昆明 650201)

    在現(xiàn)代仔豬生產(chǎn)中,由于大量使用抗生素導致藥物殘留和耐藥性的問題備受社會關注,研究和使用抗生素替代品是改善仔豬健康和生產(chǎn)性能的有效途徑之一博落回提取物。(MCE)主要成分-生物堿有很強的生物活性,具有抗菌、抗腫瘤、改善肝功能、抗瘧、殺蟲等功效。Pavel Kosina[1]研究表明,含有MCE、血根堿、白屈菜紅堿、原阿片堿等對金黃色葡萄球菌、綠膿桿菌、大腸桿菌、無乳鏈球菌均具有一定的抑制作用。萬學攀[2]用博落回生物堿分離得到的部分物質(zhì)進行了抑菌活性的檢測,以血根堿和白屈菜紅堿為主要成分的混合物抑菌效果最好,除沙門氏菌外,對金黃色葡萄球菌、大腸埃希菌、無乳鏈球菌、多殺性巴氏桿菌、蠟樣芽孢桿菌有很好的抑制效果。MCE中的血根堿有很強的廣譜抑菌作用。何夏陽[3]在斷奶仔豬飼糧中添加0.5 mg/kg血根堿顯著提高了斷奶仔豬平均日增重、降低了料重比和腹瀉率。由于抗生素藥物殘留和耐藥性問題而不能大量使用的情況下,植物提取物作為飼料添加劑使用是目前研究熱點,而MCE作為仔豬抗生素替代品具有研究價值和應用前景。本試驗旨在研究MCE對病原微生物的抑菌效力、細胞應激參數(shù)、斷奶仔豬生產(chǎn)性能、血液免疫和抗氧化參數(shù)的影響,為MCE在斷奶仔豬生產(chǎn)中的應用提供科學依據(jù)。

    1 材料與方法

    1.1 試驗設計

    選用健康PIC五元仔豬60頭,35日齡斷奶,隨機分成5個處理組,每組4個重復,每個重復3頭。A組為對照組,飼喂基礎日糧,B、C和D組分別飼喂添加2.5 mg/kg、5.0 mg/kg、7.5 mg/kg MCE的試驗日糧,E組飼喂添加50 mg/kg土霉素的試驗日糧。試驗期為35~60日齡。

    本研究萃取的MCE經(jīng)高效液相色譜法測定,生物總堿含量為64%,其中血根堿含量為45%,白屈菜紅堿含量為19%。

    選用大腸埃希氏菌、沙門氏菌、金黃色葡萄球菌和枯草芽孢桿菌進行MCE抑菌效力試驗。

    選用豬皮膚成纖維細胞(由本實驗室提供),參照駱雪[4]方法,采用LPS誘導細胞建立應激模型。

    1.2 基礎日糧配制

    以可消化氨基酸為基礎,參照NRC(1998)豬營養(yǎng)需要和PIC五元雜交豬種營養(yǎng)需要量配制基礎日糧,其組成及營養(yǎng)水平見表1。

    1.3 飼養(yǎng)管理

    仔豬自由采食和飲水,按種豬場常規(guī)飼養(yǎng)和免疫規(guī)程進行飼養(yǎng)管理。記錄采食量。

    1.4 測定指標與方法

    試驗開始和結束時,分別空腹稱重和計算60日齡日增重、日采食量和料重比。60日年齡時,前腔靜脈采血5 mL,制備血清備用。細胞培養(yǎng)液IgG、LSZ和血清IgG、LSZ、SOD、MDA、GSH-Px采用全自動生化分析儀測定,試劑盒均由南京建成生物工程研究所提供。參照駱雪等(2012)方法,測定MCE抑菌效力和MCE最小抑菌濃度。

    表1 基礎日糧與營養(yǎng)水平(風干基礎)Table 1 Basal diet and nutrient levels (air-dry basis)

    注:①預混料為每千克飼料提供:鐵 120 mg;銅 200 mg;錳 80 mg;鋅 100 mg;碘 0.3 mg;維生素A 12 000 IU;維生素D 3 000 IU;維生素E 28 IU;維生素K35 mg;維生素B13 mg;維生素B28 mg;維生素B62 mg;維生素B120.04 mg;泛酸 22 mg;膽堿 0.024 g;尼克酸 40 mg;生物素 0.2 mg;葉酸 1 mg。 ②消化能為計算值,其余為實測值。

    Note:①The premix provided the following per kg of diet: Fe 120 mg;Cu 200 mg;Mn 80 mg;Zn 100 mg;I 0.3 mg;VA 12 000 IU;VD 3 000 IU;VE 28 IU;VK35 mg;VB13 mg;VB28 mg;VB62 mg;VB120.04 mg;pantothenic acid 22 mg;choline chloride 0.024 g;nicotinic acid 40 mg;biotin 0.2 mg;folic acid 1 mg;②DE was a calculated value,while the others were measured values.

    1.5 試驗數(shù)據(jù)處理與分析

    試驗數(shù)據(jù)采用SAS 8.2軟件處理和分析,對試驗數(shù)據(jù)進行方差分析,對差異顯著者采用Duncan氏法進行多重比較。所有試驗結果采用“平均值±標準差”表示。

    2 結果與分析

    2.1 MCE的抑菌效力與最小抑菌濃度

    2.1.1 MCE的抑菌效力 由表2可知,隨MCE溶液濃度增大,對大腸桿菌、沙門氏菌、金黃色葡萄球菌、枯草芽孢桿菌的抑制效果增強,抑菌圈直徑也逐漸增大見圖1,MCE對4種細菌的抑制效果分別是:金黃色葡萄球菌>枯草芽孢桿菌>大腸桿菌>沙門氏菌。

    2.1.2 MCE的最小抑菌濃度 將MCE溶液按2 560 μg/mL、1 280 μg/mL、640 μg/mL、320 μg/mL、160 μg/mL、80 μg/mL、40 μg/mL的濃度梯度測定最小抑菌濃度,結果見表3。觀察發(fā)現(xiàn),MCE稀釋度越大,肉湯越渾濁,說明細菌生長越多。MCE對大腸桿菌、沙門氏菌、金黃色葡萄球菌、枯草芽孢桿菌的最小抑菌濃度分別為1 280 μg/mL、1 280 μg/mL、2 560 μg/mL、2 560 μg/mL。

    表2 不同濃度博落回提取物對腸道微生物抑制效果(抑菌圈直徑,mm)Table 2 Different concentrations of Macleaya cordata extract inhibited the intestinal microbiota (diameter of inhibited halo, mm)

    圖1 不同濃度博落回提取物對腸道微生物抑制效果(抑菌圈直徑,mm)Fig.1 Different concentrations of Macleaya cordata extract inhibited the intestinal microbiota (diameter of inhibited halo, mm)

    注:A:大腸桿菌;B:沙門氏菌;C:金黃色葡萄球菌;D枯草芽孢桿菌

    Note:A:Escherichiacoli;B:Salmonella;C:Staphylococcusaureus;D:Bacillussubtilis

    表3 MCE的最小抑菌濃度Table 3 Macleaya cordata extract minimum inhibitory concentration determination

    注:“-”表示沒有長菌,“+”表示少量長菌,“++”表示適度長菌,“+++”表示大量長菌。

    Note:“-”means no bacteria,“+”means a small amount of bacteria,“++”means bacteria modest,“+++”means a large number of long-bacteria.

    2.2 MCE對斷奶仔豬生產(chǎn)性能的影響

    由表4可知,35~60 d,C組日采食量比對照組提高了6.7%(P<0.05),B組與C組日采食量差異不顯著(P>0.05);C組日增重比對照組提高了9.0%(P<0.05),B組與C組日增重差異不顯著(P>0.05);B、C組料重比顯著低于A、D、E組(P<0.05)。

    表4 飼糧添加MCE對斷奶仔豬生長性能的影響Table 4 Effects of Macleaya cordata extract on the growth performance for weanling piglets kg

    注:同行數(shù)據(jù)肩標注不同小寫字母表示差異顯著(P<0.05);相同字母或無字母表示差異不顯著(P>0.05)。不同大寫字母表示差異極顯著(P<0.01)。下同。

    Note:In the same row,values with different small letter superscripts mean significant difference(P<0.05), and those with the same letter superscripts or no letter superscripts mean insignificant difference (P>0.05),and those with different capital letter superscripts mean extreme difference (P<0.01).The same below.

    2.3 MCE對細胞培養(yǎng)液免疫參數(shù)和仔豬血清理化指標的影響

    由圖2(a)可見,60日齡時,三組MCE添加組血清IgG極顯著高于對照組(P<0.01)和土霉素組(P<0.01),C組血清中IgG含量極顯著高于B、D組(P<0.01),E組血清IgG極顯著高于對照組(P<0.01)。但是C組極顯著高于E組(P<0.01)。由圖2(c)可見,C組血清LSZ極顯著高于A組和D組(P<0.01),E組血清LSZ極顯著高于A、B、C、D組(P<0.01),A、B組間差異不顯著(P>0.05)。

    由圖2(b)可見,LPS刺激后,在加入不同濃度MCE提取物之后,細胞培養(yǎng)液中IgG含量極顯著高于對照組(P<0.01),并且極顯著高于土霉素組(P<0.01);土霉素組細胞培養(yǎng)液中IgG高于對照組(P<0.01)。由圖2(d)可見,MCE添加組細胞培養(yǎng)液中LSZ極顯著高于對照組(P<0.01);土霉素組與150 ng/mL MCE添加組LSZ含量差異不顯著(P>0.05),但是150 ng/mL MCE添加組與土霉素組LSZ含量顯著高于50 ng/mL組及100 ng/mL組(P<0.05)。

    圖2 斷奶仔豬血清IgG(a)與LSZ(c)及細胞培養(yǎng)液IgG(b)與LSZ(d)含量變化情況柱狀圖Fig.2 The histogram for IgG (a), LSZ(c) content of weaning piglets serum and IgG (b),LSZ (d) content of cell cultures fluid

    2.4 MCE對斷奶仔豬血清抗氧化參數(shù)的影響

    日糧中添加MCE后血清T-SOD極顯著高于對照組(P<0.01),且與土霉素組相比差異極顯著(P<0.01);對照組血清T-SOD含量極顯著高于土霉素組(P<0.01)。B、C、D組血清MDA含量極顯著低于對照組和土霉素組(P<0.01);MCE添加組間血清MDA含量差異極顯著(P<0.01),C組極顯著低于B和D組(P<0.01);土霉素組MDA含量極顯著高于對照組和MCE添加組(P<0.01)。MCE添加組GSH-Px與空白對照組差異不顯著,但土霉素組都極顯著高于其他四組(P<0.01)。

    3 討 論

    3.1 MCE對腸道病原微生物的抑制作用

    本試驗研究發(fā)現(xiàn),MCE對大腸桿菌、沙門氏菌、枯草芽孢桿菌高度敏感,對沙門氏菌中度敏感;MCE對大腸桿菌、沙門氏菌、金黃色葡萄球菌、枯草芽孢桿菌的最小抑菌濃度分別為1280、1280、2560、2560 μg/mL。有研究報道,MCE中血根堿在pH為6.5時對變形鏈球菌、齲齒鏈球菌、血鏈球菌、粘性鏈球菌及內(nèi)氏放線的最低抑制濃度在4~8 μg/mL之間,并且氫離子濃度影響血根堿的抑菌活性,在抑菌活性方面血根堿與鋅具有協(xié)同作用[5]。除了抑制細菌之外,MCE對真菌也有不同抑制作用,李靜[6]等用MCE制成血根堿酊劑,以維達寧為陽性對照,測定其對4種皮癬真菌抑制效果,結果表明,血根堿酊劑對4種皮癬真菌均具較強的抑制作用,對須癬毛癬菌和許蘭黃癬菌的抑制作用尤為明顯。Vrublova1[7]用糖酐酯誘導大鼠產(chǎn)生大腸炎,結果表明,含有MCE的飼料添加劑組能減小直腸粘膜損傷,降低直腸髓過氧化物酶活性及環(huán)氧化酶2蛋白水平。劉靖[8]研究發(fā)現(xiàn),MCE可以促進黃雞小腸絨毛形態(tài)結構的發(fā)育,改善小腸的消化吸收功能。說明MCE可能是通過抑制腸道有害微生物的生長來促進動物機體腸道內(nèi)健康微生物菌群的形成,降低腸道pH值,從而阻止了病原微生物在腸內(nèi)的生殖,增加了動物機體對外源性病原菌的抵抗作用。上述報道與本實驗結果基本一致,其影響程度與作用機理尚待進一步研究。

    表5 MCE對血清 T-SOD,MDA 和GSH-Px含量的影響Table 5 Effect of Macleaya cordata extract on blood T-SOD,MDA and GSH-Px for weaned piglets

    3.2 MCE改善斷奶仔豬生產(chǎn)性能

    本試驗研究發(fā)現(xiàn),適宜水平的MCE添加于基礎飼料中,對斷奶仔豬的生產(chǎn)性能有不同程度的改善。在35~60日齡,基礎日糧中添加2.5、5、7.5 mg/kg MCE,對仔豬的平均日增重,平均日采食量及料重比的改善效果明顯優(yōu)于土霉素。這一結果與蔡鵬[9]等報道的,三元仔豬日糧中苯并啡啶類生物堿的添加量0.675 mg/kg(以血根堿+白屈菜紅堿總生物堿計)為理想劑量不一致。但是MCE能提高日增重,降低料重比,這一結果與饒華[10]等研究結果一致,結果提示我們,MCE適宜添加量可能與豬品種和日糧組成及有效成分含量有關。其適宜添加水平有待于進一步研究。

    3.3 MCE對仔豬血清及細胞培養(yǎng)液免疫應激參數(shù)的影響

    IgG是動物自然感染和人工主動免疫后機體產(chǎn)生的主要抗體,是動物機體抗感染的主力,在體內(nèi)發(fā)揮抗菌、抗病毒、抗毒素等免疫學活性。本實驗中,隨日糧MCE添加水平提高,仔豬血清中IgG含量也升高,日糧中添加5 mg/kg MCE與空白對照組相比顯著提高了血清中IgG含量(P<0.01)且與土霉素組相比也有顯著提高(P<0.01),說明MCE能顯著提高仔豬血清中IgG含量,從而達到提高斷奶仔豬自身免疫能力,抵御外界微生物入侵,增強斷奶抗病能力。仔豬在斷奶時會有斷奶應激出現(xiàn),此時,斷奶應激可降低仔豬體循環(huán)抗體水平,抑制細胞免疫能力。MCE提高血清IgG則有利于減小斷奶應激對仔豬的影響,提高成活率。另外,細胞培養(yǎng)試驗中,MCE添加組IgG含量高于對照組和土霉素組(P<0.01),土霉素組也顯著高于對照組(P<0.01),說明MCE和土霉素均能誘導細胞產(chǎn)生IgG。其作用機制有待于進一步研究。

    LSZ有較寬的抑菌譜,對革蘭氏陽性細菌有滅殺作用,另外,并能改善細胞抑制劑所導致的白細胞減少,結合細菌LPS,減輕內(nèi)毒素作用,從而增強機體的抵抗力,提高動物的健康水平。在畜禽養(yǎng)殖中,溶菌酶可以提高仔豬生產(chǎn)性能、降低腹瀉率,增強免疫力[11]。本試驗中,添加5 mg/kg MCE和土霉素組相較于不添加組,血清中LSZ分別提高了20.7%和47.9%,說明MCE和土霉素都能提高機體LSZ活力,增強機體的非特異性免疫能力,但與土霉素相比,MCE為天然植物產(chǎn)物,不存在使用過后耐藥性、藥物殘留等問題,對于解決抗生素使用帶來的問題具有積極意義。另外,細胞培養(yǎng)試驗中,適宜MCE添加組LSZ含量高于對照組和土霉素組,但差異不顯著。

    3.4 MCE對仔豬血清抗氧化參數(shù)的影響

    機體抗氧化防御體系中,T-SOD和GSH-Px對氧化與抗氧化平衡起著至關重要作用。本試驗中,添加MCE組仔豬血清中總SOD顯著高于對照組和土霉素組(P<0.01),而血清中GSH-Px含量與對照組持平,卻低于土霉素組(P<0.05),說明GSH-Px可能處于被抑制狀態(tài)。有研究表明,在機體的抗氧化系統(tǒng)內(nèi)可能存在著某種動態(tài)平衡機制,作為抗氧化系統(tǒng)的SOD和GSH-Px在某種狀況下并非同時增加,而是一種機制激活時,另一種可能處于被抑制狀態(tài)[12]。其作用機理有待于進一步研究。

    MDA是脂質(zhì)過氧化作用的終產(chǎn)物,其含量的高低間接反映機體受氧自由基攻擊的嚴重程度。本試驗MCE添加組仔豬血清中MDA極顯著低于對照組和土霉素組(P<0.01),說明MCE提取物能夠保護動物機體細胞,降低氧自由基對機體的損害。

    4 結 論

    MCE對腸道致病菌大腸桿菌、沙門氏菌、金黃色葡萄球菌、枯草芽孢桿菌都有抑制作用;MCE能顯著改善斷奶仔豬生產(chǎn)性能,提高血清IgG、T-SOD,降低血清MDA含量,增強仔豬抗病力及抗氧化能力;并能緩解細胞應激的損傷。提示MCE可以替代抗生素應用于仔豬生產(chǎn)。

    參考文獻:

    [1] Pavel Kosina,Jana Gregorova. Phytochemical and antimicrobial characterization of Macleaya cordata herb[J]. Fitoterapia,2010,81(8):1 006-1 012.

    [2] 萬學攀.博落回生物堿成分分離及抑菌活性研究[D].陜西楊凌:西北農(nóng)林科技大學,2008.

    [3] 何夏陽.血根堿對斷奶仔豬生長性能和血液生化指標的影響[D].湖南長沙:湖南農(nóng)業(yè)大學,2010.

    [4] 駱 雪.云南特有豬種β-defensin基因表達特點及外源活性物質(zhì)的調(diào)節(jié)作用[D].云南昆明:云南農(nóng)業(yè)大學,2012.

    [5] 郁建生.博落回制劑對禽霍亂、仔豬白痢的對比治療試驗[J].黑龍江畜牧獸醫(yī),2007,2:91-93.

    [6] 李 靜,范家佑,郁建平,等.血根堿酊劑體外抗真菌初步研究[J].山地農(nóng)業(yè)生物學報,2011,30(4):348-351.

    [7] Vrublova E.The phytogenic feed additive Sangrovit modulates dextran sulfate sodium-induced colitis in rats[J]. Veterinarni Medicina, 55, 2010 (12): 610-618.

    [8] 劉 靖.博落回生物堿對黃羽肉雞生長的影響[D].長沙:湖南農(nóng)業(yè)大學,2010.

    [9] 蔡鵬,孫志良,曾建國,等.不同劑量博落回提取物對斷奶仔豬生長性能的影響[J].中國畜牧獸醫(yī),2010,37(5):41-43.

    [10] 饒 華,蔡 鵬,周錫紅,等.博落回提取物對斷奶仔豬生長性能的影響[J].中國獸藥雜志. 2009,43(11):42-43.

    [11] 盧亞萍,潘宏濤,紀孫瑞,等.溶菌酶對仔豬生長性能及血清生化指標的影響[J].養(yǎng)豬,2010,(4):30-31.

    [12] 張軍民.谷氨酰胺對早期斷奶仔豬腸道的保護作用及其機理研究[D] .北京:中國農(nóng)業(yè)科學院,2000.

    猜你喜歡
    博落回土霉素沙門氏菌
    復合改良劑強化博落回修復錳礦渣的機理
    博落回注射液中博落回生物堿的顯色鑒別探討
    云南化工(2021年8期)2021-12-21 06:37:20
    高效液相色譜法對畜禽肉中土霉素、四環(huán)素、金霉素的殘留檢測研究
    歐盟擬制定與爬行動物肉中沙門氏菌相關
    食品與機械(2019年1期)2019-03-30 01:14:36
    博落回和小果博落回不同部位中生物堿類成分的比較△
    兔沙門氏菌病的診斷報告
    間接競爭酶聯(lián)適配體檢測食品中土霉素
    土霉素高產(chǎn)菌株N56育種及工業(yè)發(fā)酵條件優(yōu)化
    MSL抗菌肽對鼠傷寒沙門氏菌感染的預防作用
    商品肉鴨沙門氏菌分離鑒定及藥敏試驗
    亚洲内射少妇av| 午夜久久久久精精品| 久久久成人免费电影| 免费看a级黄色片| 成人高潮视频无遮挡免费网站| 国产人妻一区二区三区在| 亚洲精品乱码久久久久久按摩| 国产亚洲av片在线观看秒播厂 | 日韩三级伦理在线观看| 欧美日韩综合久久久久久| 精品一区二区三区人妻视频| 变态另类丝袜制服| 亚洲欧美精品综合久久99| 亚洲中文字幕日韩| 亚洲av一区综合| 天堂网av新在线| 黄片wwwwww| 久久久久九九精品影院| 国产又色又爽无遮挡免| 久久午夜福利片| 中文欧美无线码| 国产欧美日韩精品一区二区| 亚洲人与动物交配视频| 我要搜黄色片| 汤姆久久久久久久影院中文字幕 | 国内精品美女久久久久久| 国产成人a区在线观看| 亚洲成人久久爱视频| 中文字幕熟女人妻在线| 国产三级在线视频| 在线播放无遮挡| 日韩 亚洲 欧美在线| 国产精品久久久久久精品电影| 国产老妇女一区| 久久久久久久国产电影| 搡老妇女老女人老熟妇| 亚洲精品日韩av片在线观看| 国产毛片a区久久久久| 亚洲久久久久久中文字幕| 国产在视频线精品| 亚洲精品国产成人久久av| 激情 狠狠 欧美| 国产精品国产三级国产av玫瑰| 亚洲第一区二区三区不卡| 精品人妻一区二区三区麻豆| 精品欧美国产一区二区三| 成人特级av手机在线观看| 精品久久久久久久久亚洲| 欧美日韩一区二区视频在线观看视频在线 | 日韩国内少妇激情av| 国产单亲对白刺激| 91久久精品国产一区二区成人| 菩萨蛮人人尽说江南好唐韦庄 | 午夜福利在线观看免费完整高清在| 国产免费又黄又爽又色| 免费黄色在线免费观看| 日韩成人av中文字幕在线观看| 久久亚洲精品不卡| 国产黄片美女视频| av在线老鸭窝| 久久国内精品自在自线图片| 一级毛片电影观看 | 免费观看a级毛片全部| 九草在线视频观看| 午夜福利成人在线免费观看| 禁无遮挡网站| ponron亚洲| 狂野欧美白嫩少妇大欣赏| 在线观看66精品国产| 午夜日本视频在线| 国模一区二区三区四区视频| 三级国产精品欧美在线观看| 亚洲性久久影院| 在线免费观看的www视频| 欧美三级亚洲精品| www.av在线官网国产| 免费人成在线观看视频色| 亚洲精品一区蜜桃| 成人鲁丝片一二三区免费| 国产片特级美女逼逼视频| 国产成人a∨麻豆精品| 国产一区二区亚洲精品在线观看| 欧美日韩精品成人综合77777| 纵有疾风起免费观看全集完整版 | 18禁在线无遮挡免费观看视频| 欧美性猛交黑人性爽| 国产精品一区二区三区四区久久| 国产三级在线视频| 日本免费在线观看一区| 国产精品一区二区在线观看99 | 嫩草影院精品99| 黄片wwwwww| 精品人妻偷拍中文字幕| av天堂中文字幕网| 亚洲欧美成人精品一区二区| 久久久久久久久久久丰满| 狂野欧美白嫩少妇大欣赏| 一边摸一边抽搐一进一小说| 久久久精品94久久精品| 日韩精品有码人妻一区| 亚洲精品,欧美精品| 日本-黄色视频高清免费观看| 久久久久免费精品人妻一区二区| 99热这里只有是精品50| 91精品国产九色| 国产人妻一区二区三区在| 国模一区二区三区四区视频| 免费看美女性在线毛片视频| 日本猛色少妇xxxxx猛交久久| 婷婷色综合大香蕉| 91久久精品电影网| 波野结衣二区三区在线| 小蜜桃在线观看免费完整版高清| 国产伦一二天堂av在线观看| 久久草成人影院| 欧美成人一区二区免费高清观看| 一个人免费在线观看电影| 日韩欧美三级三区| 日本wwww免费看| 中文欧美无线码| 日韩av在线免费看完整版不卡| 美女脱内裤让男人舔精品视频| 国产精品99久久久久久久久| 干丝袜人妻中文字幕| 亚洲综合精品二区| 两个人视频免费观看高清| 麻豆国产97在线/欧美| 一本—道久久a久久精品蜜桃钙片 精品乱码久久久久久99久播 | 日本黄大片高清| 久久久欧美国产精品| 国产伦精品一区二区三区四那| 级片在线观看| 三级国产精品片| 午夜福利视频1000在线观看| 嫩草影院入口| 欧美zozozo另类| 久久综合国产亚洲精品| 国产国拍精品亚洲av在线观看| 在线免费观看的www视频| 日韩制服骚丝袜av| 国产午夜精品久久久久久一区二区三区| 精品熟女少妇av免费看| 伦理电影大哥的女人| 色5月婷婷丁香| 精品久久久噜噜| 国产综合懂色| 高清毛片免费看| 麻豆精品久久久久久蜜桃| 午夜激情欧美在线| 国产麻豆成人av免费视频| 禁无遮挡网站| 91精品伊人久久大香线蕉| 视频中文字幕在线观看| 久久人人爽人人爽人人片va| 国产伦精品一区二区三区视频9| 又粗又爽又猛毛片免费看| 欧美精品一区二区大全| 免费观看在线日韩| 老司机影院毛片| 99视频精品全部免费 在线| 精品酒店卫生间| 国产高清国产精品国产三级 | 久久热精品热| av.在线天堂| 三级经典国产精品| 久久鲁丝午夜福利片| 尾随美女入室| 日韩欧美在线乱码| 国产色婷婷99| 久久精品熟女亚洲av麻豆精品 | 男女视频在线观看网站免费| 嫩草影院新地址| 久久综合国产亚洲精品| 中文字幕熟女人妻在线| 国产精品爽爽va在线观看网站| 亚洲国产欧美人成| 日韩三级伦理在线观看| 久久久久久久久久黄片| 亚洲伊人久久精品综合 | 97在线视频观看| 国产男人的电影天堂91| 亚洲内射少妇av| 国国产精品蜜臀av免费| 精品一区二区免费观看| 26uuu在线亚洲综合色| 国产 一区精品| 男人舔奶头视频| 特级一级黄色大片| 中文字幕久久专区| videossex国产| 观看美女的网站| 网址你懂的国产日韩在线| a级一级毛片免费在线观看| 国产大屁股一区二区在线视频| 亚洲国产成人一精品久久久| 久热久热在线精品观看| 免费看日本二区| 99久久人妻综合| 伊人久久精品亚洲午夜| 永久免费av网站大全| .国产精品久久| 国产熟女欧美一区二区| 国产极品精品免费视频能看的| 亚洲成人av在线免费| 国产一级毛片七仙女欲春2| 美女脱内裤让男人舔精品视频| 亚洲成人av在线免费| 免费观看在线日韩| 国产老妇女一区| 精品一区二区三区人妻视频| 1000部很黄的大片| 午夜日本视频在线| 又粗又爽又猛毛片免费看| 波多野结衣高清无吗| 日本黄大片高清| av在线蜜桃| 永久免费av网站大全| 边亲边吃奶的免费视频| 国产一级毛片七仙女欲春2| 日韩欧美精品v在线| 国产成人免费观看mmmm| 亚洲av成人av| 国产成人精品婷婷| 舔av片在线| 欧美zozozo另类| 亚洲四区av| 人妻少妇偷人精品九色| 免费看日本二区| 国产免费又黄又爽又色| 少妇的逼水好多| 成人高潮视频无遮挡免费网站| 全区人妻精品视频| 久久99精品国语久久久| 亚洲欧美成人综合另类久久久 | 啦啦啦啦在线视频资源| 精品99又大又爽又粗少妇毛片| 午夜久久久久精精品| 国产免费又黄又爽又色| 精品少妇黑人巨大在线播放 | 一级二级三级毛片免费看| 丝袜美腿在线中文| 国产老妇伦熟女老妇高清| 日韩一区二区三区影片| 亚洲精品乱码久久久v下载方式| 大又大粗又爽又黄少妇毛片口| 国产伦在线观看视频一区| 在线天堂最新版资源| 亚洲自拍偷在线| 亚洲怡红院男人天堂| 亚洲av男天堂| 最近最新中文字幕免费大全7| 久久人人爽人人爽人人片va| 久久婷婷人人爽人人干人人爱| 99久久中文字幕三级久久日本| 村上凉子中文字幕在线| 亚洲欧美日韩无卡精品| 亚洲综合色惰| 一级毛片电影观看 | 日韩欧美精品免费久久| 在现免费观看毛片| 人妻系列 视频| 99久国产av精品| 老师上课跳d突然被开到最大视频| 亚洲在线观看片| 91精品一卡2卡3卡4卡| 国产精品乱码一区二三区的特点| 你懂的网址亚洲精品在线观看 | 69av精品久久久久久| 国模一区二区三区四区视频| av女优亚洲男人天堂| 一级av片app| 麻豆av噜噜一区二区三区| 精品人妻一区二区三区麻豆| 国产成人午夜福利电影在线观看| 精品少妇黑人巨大在线播放 | 有码 亚洲区| 舔av片在线| 91精品伊人久久大香线蕉| av女优亚洲男人天堂| 免费看日本二区| 国产免费又黄又爽又色| 国产伦一二天堂av在线观看| 国产成人freesex在线| 亚洲中文字幕日韩| 欧美日韩精品成人综合77777| 五月玫瑰六月丁香| 嫩草影院新地址| 国产亚洲精品久久久com| 精品人妻熟女av久视频| 亚洲av不卡在线观看| 国产精品野战在线观看| 国产精品1区2区在线观看.| 久久热精品热| 久久这里只有精品中国| 欧美性猛交黑人性爽| 国产精品久久视频播放| 少妇熟女欧美另类| 亚洲av成人精品一区久久| 两性午夜刺激爽爽歪歪视频在线观看| 天堂中文最新版在线下载 | 少妇人妻精品综合一区二区| 床上黄色一级片| 亚洲激情五月婷婷啪啪| 看非洲黑人一级黄片| 欧美日韩精品成人综合77777| 一边亲一边摸免费视频| 亚洲精品国产成人久久av| 免费大片18禁| 能在线免费观看的黄片| 尤物成人国产欧美一区二区三区| 免费观看精品视频网站| 中文资源天堂在线| 欧美又色又爽又黄视频| av免费观看日本| 麻豆国产97在线/欧美| 国产精品精品国产色婷婷| 天天躁日日操中文字幕| 人妻少妇偷人精品九色| 国产黄色视频一区二区在线观看 | 美女内射精品一级片tv| 国产乱来视频区| 成年免费大片在线观看| 久久久久久久亚洲中文字幕| 国产成人午夜福利电影在线观看| 国产免费一级a男人的天堂| 日产精品乱码卡一卡2卡三| 一边亲一边摸免费视频| 69人妻影院| 一区二区三区四区激情视频| 免费大片18禁| 天天躁日日操中文字幕| 51国产日韩欧美| 久久午夜福利片| 国产淫片久久久久久久久| 18禁裸乳无遮挡免费网站照片| 亚洲四区av| 如何舔出高潮| 大话2 男鬼变身卡| 久久99蜜桃精品久久| 亚洲国产精品专区欧美| 色吧在线观看| 亚洲精品国产成人久久av| av在线播放精品| 国产91av在线免费观看| 少妇高潮的动态图| 中文字幕av成人在线电影| www日本黄色视频网| 狂野欧美激情性xxxx在线观看| 一二三四中文在线观看免费高清| 直男gayav资源| 午夜视频国产福利| 亚洲欧美精品自产自拍| 欧美日韩精品成人综合77777| 国产精品精品国产色婷婷| 99热6这里只有精品| 亚洲人成网站高清观看| 少妇高潮的动态图| 亚洲伊人久久精品综合 | 观看美女的网站| 毛片女人毛片| 中文字幕人妻熟人妻熟丝袜美| 美女被艹到高潮喷水动态| 亚洲第一区二区三区不卡| 久久亚洲精品不卡| 天美传媒精品一区二区| 久热久热在线精品观看| 日韩,欧美,国产一区二区三区 | 亚洲av一区综合| 男插女下体视频免费在线播放| 啦啦啦观看免费观看视频高清| 看免费成人av毛片| 成人三级黄色视频| 成人特级av手机在线观看| 水蜜桃什么品种好| 大又大粗又爽又黄少妇毛片口| h日本视频在线播放| 2021天堂中文幕一二区在线观| 综合色av麻豆| 成人av在线播放网站| 看黄色毛片网站| 亚洲国产高清在线一区二区三| 日韩制服骚丝袜av| 欧美一区二区亚洲| 麻豆精品久久久久久蜜桃| 联通29元200g的流量卡| 黄片无遮挡物在线观看| 丰满乱子伦码专区| 成人亚洲精品av一区二区| 亚洲成av人片在线播放无| av.在线天堂| 亚洲精品乱久久久久久| 欧美xxxx黑人xx丫x性爽| 久久草成人影院| 国产伦一二天堂av在线观看| 亚洲中文字幕一区二区三区有码在线看| 亚洲欧洲国产日韩| 国产黄色小视频在线观看| 免费看av在线观看网站| 国产免费男女视频| 亚洲精品成人久久久久久| 一个人观看的视频www高清免费观看| 欧美成人午夜免费资源| 波野结衣二区三区在线| 我的女老师完整版在线观看| 日本欧美国产在线视频| 99久久人妻综合| 国产一级毛片七仙女欲春2| 婷婷六月久久综合丁香| 一个人观看的视频www高清免费观看| 99热这里只有是精品在线观看| 久久久久免费精品人妻一区二区| 久久久久久九九精品二区国产| 亚洲精品国产成人久久av| 亚洲欧美中文字幕日韩二区| 啦啦啦韩国在线观看视频| 人体艺术视频欧美日本| 一边亲一边摸免费视频| 午夜福利视频1000在线观看| 日韩视频在线欧美| 高清视频免费观看一区二区 | 久久草成人影院| www.av在线官网国产| 免费看a级黄色片| 精品免费久久久久久久清纯| 免费看av在线观看网站| 看免费成人av毛片| 少妇人妻一区二区三区视频| 久久韩国三级中文字幕| 欧美高清性xxxxhd video| 欧美日韩综合久久久久久| 亚洲伊人久久精品综合 | 国产人妻一区二区三区在| 国产午夜精品一二区理论片| 成人毛片60女人毛片免费| 免费观看人在逋| a级毛色黄片| 久久久久国产网址| 亚洲欧洲国产日韩| 免费观看的影片在线观看| av在线老鸭窝| 2021天堂中文幕一二区在线观| 国产视频首页在线观看| 晚上一个人看的免费电影| 波野结衣二区三区在线| 久久久成人免费电影| 亚洲最大成人手机在线| 欧美成人精品欧美一级黄| 搞女人的毛片| 欧美日韩精品成人综合77777| 亚洲av一区综合| 蜜桃亚洲精品一区二区三区| av天堂中文字幕网| 亚洲国产欧洲综合997久久,| 免费在线观看成人毛片| 少妇熟女aⅴ在线视频| 久久国产乱子免费精品| 丰满少妇做爰视频| 小蜜桃在线观看免费完整版高清| 草草在线视频免费看| 亚洲高清免费不卡视频| av在线蜜桃| 国产真实伦视频高清在线观看| 18禁在线无遮挡免费观看视频| 老师上课跳d突然被开到最大视频| 国产av码专区亚洲av| 久久久久久国产a免费观看| 男人狂女人下面高潮的视频| av.在线天堂| 亚洲国产欧洲综合997久久,| 干丝袜人妻中文字幕| 99久久精品一区二区三区| 免费观看a级毛片全部| 免费观看性生交大片5| av线在线观看网站| 欧美人与善性xxx| 天堂√8在线中文| 熟女人妻精品中文字幕| 不卡视频在线观看欧美| 国产不卡一卡二| 美女cb高潮喷水在线观看| 大又大粗又爽又黄少妇毛片口| 国产精品综合久久久久久久免费| 一级毛片久久久久久久久女| 色尼玛亚洲综合影院| 又粗又爽又猛毛片免费看| 久久久精品欧美日韩精品| 亚洲精品一区蜜桃| 最近中文字幕2019免费版| 国产精品爽爽va在线观看网站| 尤物成人国产欧美一区二区三区| 亚洲国产高清在线一区二区三| 国产精品女同一区二区软件| 精品久久久久久成人av| 午夜福利网站1000一区二区三区| 国产精品久久久久久精品电影| 国产亚洲最大av| 91精品国产九色| 亚洲av日韩在线播放| 成人漫画全彩无遮挡| 直男gayav资源| 午夜福利网站1000一区二区三区| 日韩高清综合在线| 高清视频免费观看一区二区 | 亚洲av二区三区四区| 久久久久久国产a免费观看| 欧美极品一区二区三区四区| 欧美一区二区精品小视频在线| 中文精品一卡2卡3卡4更新| 欧美丝袜亚洲另类| 麻豆一二三区av精品| 亚洲av成人精品一二三区| 亚洲五月天丁香| 99热精品在线国产| www.色视频.com| 精品欧美国产一区二区三| 人人妻人人澡人人爽人人夜夜 | 99热这里只有精品一区| 亚洲精品日韩在线中文字幕| 精品人妻熟女av久视频| 国产老妇女一区| 亚洲五月天丁香| 国产色婷婷99| 亚洲欧美日韩无卡精品| 国产精华一区二区三区| 两性午夜刺激爽爽歪歪视频在线观看| 久久精品综合一区二区三区| 精品久久久久久久久久久久久| 在线观看一区二区三区| 麻豆乱淫一区二区| 九九在线视频观看精品| 亚洲精品影视一区二区三区av| 国产午夜精品一二区理论片| 欧美精品国产亚洲| 麻豆av噜噜一区二区三区| 欧美区成人在线视频| videossex国产| 中文资源天堂在线| 国产亚洲午夜精品一区二区久久 | 少妇熟女欧美另类| 国产免费一级a男人的天堂| 男女视频在线观看网站免费| 波多野结衣巨乳人妻| 亚洲av福利一区| 亚洲av不卡在线观看| 国产精品无大码| av卡一久久| 亚洲人成网站在线观看播放| 亚洲av成人av| 午夜福利成人在线免费观看| 亚洲精品aⅴ在线观看| 日韩成人av中文字幕在线观看| 国产精品麻豆人妻色哟哟久久 | 精品国产一区二区三区久久久樱花 | 综合色丁香网| 国产精品麻豆人妻色哟哟久久 | 十八禁国产超污无遮挡网站| 免费av毛片视频| 国产精品一区www在线观看| 麻豆久久精品国产亚洲av| 免费观看的影片在线观看| 大香蕉久久网| 成人午夜高清在线视频| 天堂网av新在线| 国产亚洲91精品色在线| 乱码一卡2卡4卡精品| 国产 一区精品| 热99re8久久精品国产| 插逼视频在线观看| 成人无遮挡网站| 九草在线视频观看| 一级毛片电影观看 | 青春草视频在线免费观看| 亚洲自偷自拍三级| 成人二区视频| 日韩人妻高清精品专区| 欧美成人一区二区免费高清观看| av在线亚洲专区| 最近视频中文字幕2019在线8| 成人欧美大片| 亚洲综合色惰| 老师上课跳d突然被开到最大视频| 自拍偷自拍亚洲精品老妇| 欧美丝袜亚洲另类| 久久久亚洲精品成人影院| 亚洲精品国产av成人精品| 精品一区二区三区人妻视频| 国产精品一二三区在线看| 黄色日韩在线| 性色avwww在线观看| 熟女电影av网| 日日干狠狠操夜夜爽| 九草在线视频观看| 一夜夜www| 国产又色又爽无遮挡免| 九九热线精品视视频播放| 十八禁国产超污无遮挡网站| 亚洲精品自拍成人| 人妻少妇偷人精品九色| 成人亚洲欧美一区二区av| 一本久久精品| 美女脱内裤让男人舔精品视频| 欧美精品国产亚洲| 亚洲精品456在线播放app| 2021天堂中文幕一二区在线观| 好男人在线观看高清免费视频| 看免费成人av毛片| 男女边吃奶边做爰视频| 国产欧美日韩精品一区二区| 国产黄a三级三级三级人| 亚洲丝袜综合中文字幕| 国产一区二区亚洲精品在线观看| 国产成人精品一,二区| 国产国拍精品亚洲av在线观看| 一级毛片aaaaaa免费看小| 色吧在线观看|