劉煥春
現(xiàn)如今血液中膽紅素是臨床上常用檢測項目,也是反應(yīng)黃疸程度的重要指標(biāo)。為了解用肝素抗凝血漿測定總膽紅素與用血清做標(biāo)本測定總膽紅素的區(qū)別,我們通過對150例患者標(biāo)本血漿血清中的總膽紅素做對比得知,血漿測定總膽紅素比血清測總膽紅素偏高。
1.1 儀器 長春迪瑞生化分析儀CS-400A。
1.2 試劑
1.2.1 抗凝劑 肝素鈉采用天津生物化學(xué)制藥有限公司生產(chǎn)的批號為:20091415。
1.2.2 試劑 采用長春迪瑞公司生產(chǎn)的總膽紅素試劑。
1.3 方法原理 本試劑采用表面活性劑作為增溶劑。樣品中結(jié)合膽紅素和經(jīng)增溶的未結(jié)合膽紅素與重氮對氨基苯磺酸反應(yīng),生成酸性的偶氮膽紅素,其在750 nm處光吸收值得增加與樣品中膽紅素的濃度成正比,通過測定570 nm處吸光度值得變化,即可計算出樣品中總膽紅素的濃度。雙光束分析時,空白波長應(yīng)設(shè)定在750 nm。
1.4 操作方法
1.4.1 標(biāo)本采集 選擇150例來院就診的患者,按常規(guī)方法抽取靜脈血5 ml,分別注入兩只試管,一支肝素鈉抗凝,一支不抗凝,分別離心。
1.4.2 操作 采用同一儀器,同一試劑,同一方法,盡可能做到條件一致分別對150例的血漿血清標(biāo)本測定總膽紅素的含量,結(jié)果如下。
150例血漿血清總膽紅素含量(mmmol/L)見表1。
肝素鈉是一種含有硫酸基團(tuán)的粘多糖,分子量為1200。常帶負(fù)電荷,是直接抗凝劑。可加速和增強(qiáng)抗凝血酶原Ⅲ,拮抗凝血酶和其他活化凝血因子的作用,使凝血酶和活化因子滅活,達(dá)到抗凝目的。肝素的抗凝能力為:1 ml全血/0.1 mg肝素。即1 ml全血10.0~12.5 U肝素[2]當(dāng)以此比例抗凝時總膽紅素測定基本無影響,但在實際抽血時,有些患者血管難找,血管細(xì)等等我們很難做到這個比例,為此使得抗凝劑的含量相對增加。由于總膽紅素試劑R1中的表面活性劑的主要成分是十二烷基二甲基液化銨,它是一種季銨鹽,其水溶液形成強(qiáng)堿性季鈉堿,過量的肝素與十二烷基二甲基液化銨在水中反應(yīng),生成不溶于水的鹽類結(jié)晶物,使反應(yīng)液的吸光度增高,造成總膽紅素測定值假性升高[1]。
綜上說述,為確??偰懠t素檢測結(jié)果的準(zhǔn)確可靠,應(yīng)盡量采用血清標(biāo)本,而不宜采用肝素鈉抗凝血漿[3]。
表1
[1]葉應(yīng)嫵.全國臨床檢驗操作規(guī)程.第二版.南京:東南大學(xué)出版社,1997,5.
[2]郝少麗.肝素抗凝血對膽紅素測定結(jié)果的影響.承德醫(yī)學(xué)院,2000,17(3):61-63.
[3]王文賢,張小平,羅云.四川省衛(wèi)生管理干部學(xué)報.2005,24(3):167-168.