氣相色譜法測定平菇中16種有機磷農藥殘留量

周長紅

（云南省臨滄市臨翔區(qū)農產品質量安全檢測站，云南 臨滄 677000）

平菇在栽培種植過程中會發(fā)生蟲害，如蚊蠅的幼蟲、蛆、螨害[1]等，一般采用農藥防除這些害蟲。有機磷農藥是最常用的一類農藥，約占全部農藥的70%[2]。施用有機磷農藥雖然可以防除這些害蟲，但如果施藥方法不當，會在平菇上留下農藥殘留，一旦這些農藥殘留進入人體，會對人體健康造成影響。因此，建立平菇中多種有機磷農藥殘留的測定方法，在指導平菇栽培種植上正確使用有機磷農藥、防止有機磷農藥殘留超標的平菇上市銷售以及保障人體健康等都具有重要的意義。一般測定有機磷農藥殘留量的方法有氣相色譜法[3－5]、液相色譜法[6,7]、氣相色譜質譜聯(lián)用法[8,9]、液相色譜質譜聯(lián)用法等[10,11]。本文在參考以上文獻的基礎上，采用乙腈萃取平菇樣品中的16種有機磷農藥殘留，然后用DB－17中極性石英毛細管柱分離，氣相色譜－火焰光度檢測器（GC－FPD）測定平菇中的16種有機磷農藥殘留量，方法簡單、快捷、準確且有實用價值。

1 材料與方法

1.1 主要儀器與試劑

Agilent 6890N型氣相色譜儀，帶火焰光度檢測器、石英毛細管柱，DB－17型 (30 m×0.53 mm×1.0 μm)；飛利浦HR2864型搗碎機；美國DIAX900型勻漿機（13 500 R·min－1）；美國OA－SYS型氮吹儀；QL－861旋渦混勻器。丙酮（分析純），重蒸后使用；氯化鈉、乙腈均為分析純。150 mL錐形瓶、100 mL具塞量筒、10 mL刻度試管、150 mL燒杯等。

標準溶液敵敵畏、甲胺磷、乙酰甲胺磷、甲拌磷、氧化樂果、二嗪磷、樂果、甲基對硫磷、毒死蜱、對硫磷、水胺硫磷、對硫磷、丙溴磷、三唑磷、伏殺硫磷、亞胺硫磷等，濃度均為1 000 μg·mL－1，購于天津環(huán)境監(jiān)測中心。

1.2 氣相色譜條件

進樣口溫度220℃；檢測器溫度250℃；柱溫為程序升溫，即150℃保留1 min，以8.0℃·min－1升至250℃，保持10 min；載氣為氮氣，純度＞99.999%，流速10 mL·min－1；燃氣為氫氣，純度＞99.999%，流速為75 mL·min－1；助燃氣為空氣，流速為100 mL·min－1；進樣方式為不分流進樣，自動進樣器進樣；進樣量為1.0 μL。

1.3 實驗材料

實驗材料為平菇，2010年7月21日購于昆明市江岸小區(qū)農貿市場。

1.4 標準溶液的配制及標準曲線的繪制

取標準品溶液（濃度為1 000 μg·mL－1）1 mL移入25 mL的容量瓶，用丙酮稀釋后定容至25 mL，配制成濃度為40 μg·mL－1的標準儲備液。氧化樂果、伏殺硫磷、亞胺硫磷各取5 mL，其余13種有機磷標準儲備液各取2.5 mL，移入50 mL容量瓶，用丙酮定容至50 mL，即得濃度為 2.0 μg·mL－1（氧化樂果、伏殺硫磷、亞胺硫磷濃度為4.0 μ·mL－1）的16種有機磷農藥的混合標準溶液，再用丙酮稀釋，配制成 0.05 μg·mL－1、0.1 μg·mL－1、0.2 μg·mL－1、0.4 μg·mL－1、0.6 μg·mL－1、1.0 μg·mL－1等系列濃度，分別測定其對應的峰面積，以濃度為橫坐標，峰面積為縱坐標繪制標準曲線。

1.5 試驗步驟

將平菇樣品放入搗碎機中搗碎，準確稱取25 g樣品放入150 mL錐形瓶中，加入乙腈50 mL，在勻漿機中高速勻漿40 s，過濾到裝有7 g～10 g氯化鈉的具塞量筒中，振搖1 min，靜置約0.5 h，使水相和乙腈相分層，取上層乙腈相液10 mL，置于150 mL燒杯中。

用滴管將量筒中剩余的乙腈相取出，棄掉，留水相層。用移液管取水相10 mL放入25 mL具塞試管中，加入10 mL乙腈，在旋渦混勻器上提取1 min，靜置15 min后取上層乙腈相9 mL并入150 mL燒杯中，將燒杯放到水浴鍋上（水浴溫度80℃）并通入氮氣，使乙腈蒸發(fā)近干，取出燒杯使杯內的溫度降至室溫，加入2 mL的丙酮溶解樣品，蓋上鋁箔，備用。

將上述樣液完全轉移至10 mL的刻度試管中，再用約3 mL丙酮，分3次沖洗燒杯，并轉移至刻度試管中，最后定容至5 mL，在旋渦混勻器上混勻，倒入2 mL進樣瓶中，上機分析。

1.6 方法回收率及檢出限的測定

稱取不含上述16種有機磷農藥的平菇樣品4份，每份25 g，其中1份為對照，其余3份分別加入濃度為2.0 μg·mL－1（氧化樂果、伏殺硫磷、亞胺硫磷濃度為4.0 μg·mL－1）的16種有機磷農藥混合標準工作液1.25 mL，搖勻，放置30 min后按照上述處理方法和儀器條件進行回收率測定，方法檢出限按3倍信噪比計算。

2 結果與討論

2.1 色譜圖

2.1.1 平菇樣品基質色譜圖

平菇樣品基質色譜圖見圖1。

由圖1可以看出，平菇樣品基質色譜圖基線平穩(wěn)，對16種有機磷農藥的測定沒有影響。

2.1.2 平菇樣品中添加16種有機磷標樣色譜圖

在平菇樣品中添加16種有機磷農藥標準，使樣品中氧化樂果、伏殺硫磷、亞胺硫磷的濃度為0.2 mg·kg－1，其余13種有機磷農藥的濃度為0.1 mg·kg－1，然后按1.4處理樣品得到的色譜圖見圖2。

2.2 保留時間和標準曲線

16種有機磷農藥保留時間及標準曲線的線性回歸方程、相關系數(shù)見表1。

表1 16種農有機磷農藥保留時間及線性回歸方程、相關系數(shù)

由表1可以看出，相關系數(shù)為0.9959～0.9999，說明標準曲線線性相關性好，滿足定量分析需要。

2.3 16種有機磷農藥保留時間以及在平菇樣品中的回收率、相對標準偏差及檢出限測定結果

在不含農藥殘留的平菇樣品中添加16種有機磷農藥標準液，使樣品中氧化樂果、伏殺硫磷、亞胺硫磷濃度為0.2 mg·kg－1，其余 13 種有機磷農藥的濃度為 0.1 mg·kg－1，然后按1.4處理樣品，測定16種有機磷農藥在平菇樣品中的回收率、相對標準偏差及檢出限，結果見表2。

表2 16種有機磷農藥在平菇中的回收率、相對標準偏差及檢出限測定結果

由表2可見，在平菇基質樣品中添加16種有機磷農藥，其平均回收率介于75.2%～105%之間，相對標準偏差小于 9.9%，檢出限為 0.004 mg·kg－1～0.03 mg·kg－1。

2.4 討論

本文試驗采用乙腈提取樣品中的16種有機磷農藥殘留，然后用DB－17石英毛細管柱分離，火焰光度檢測器測定。標準曲線線性相關性好，16種有機磷農藥的平均回收率、相對標準偏差和檢出限測定結果表明，方法具有較好的準確度、精密度和靈敏度，滿足測定多農藥殘留時對準確度、精密度和靈敏度的要求[12]。方法同時具有操作簡單、分析速度快等優(yōu)點。采用以上方法，對100余份平菇樣品中的16種有機磷農藥殘留量進行了測定，得到滿意結果。

[1]管道平，胡清秀.食用菌農藥殘留限量與產品質量安全[J].中國食用菌，2008，27(2)：3.

[2]仲維科，郝戩，孫梅心.我國食品的農藥污染問題[J].農藥，2000，39(7)：1－4.

[3]晉玉霞，白紅進，孫紅專.毛細管氣相色譜法快速測定糧食中多種有機磷農藥殘留[J].中國衛(wèi)生檢驗雜志，2006，16(3)：303,379.

[4]林文華，羅惠明，菜穎.氣相色譜法測定蔬菜、水果中多種有機磷農藥殘留[J].中國衛(wèi)生檢驗雜志，2008，18(1)：73－74.

[5]于靜，周正香，朱蕾.GC－NPD標準加入法測定有機磷的實驗室比對方法[J].農藥，2008，47(9)：657－660.

[6]劉錚錚，李麗，王靜，等.高效液相色譜－柱前衍生法測定水中有機磷除草劑[J].中國環(huán)境監(jiān)測，2009，25(5)：35－38.

[7]葉江雷，弓振斌，林芳.茶葉中水胺硫磷、亞胺硫磷、甲基對硫磷和伏殺硫磷農藥殘留的高效液相色譜法測定[J].廈門大學學報，2007，46(3)：441－444.

[8]周爽.用GC－MS法測定食品中11種有機磷農藥的殘留[J].中國衛(wèi)生檢驗雜志，2008，18(3)：442－443.

[9]楊基峰，左慧敏，何旭元.茶葉中有機磷農藥殘留量的GC－MS測定[J].分析實驗室，2006，25(7)：67－70.

[10]張慶斌，張睿，王海濤.高效液相色譜法串聯(lián)質譜法對梔子中11種有機磷農藥殘留的檢測[J].分析測試學報，2010，29(1)：73－76.

[11]劉敏，端裕樹，宋苑苑，等.分散固相萃取－液相色譜－質譜檢測蔬菜水果中氨基甲酸酯和有機磷農藥[J].分析化學研究報告，2006，34(7)：941－945.

[12]農業(yè)部農藥檢定所.農藥殘留量實用檢測方法手冊（第一卷）[M].北京：中國農業(yè)出版社，1995.