穴位埋線對慢傳輸型便秘模型大鼠腸道傳輸功能影響的穴位特異性研究※

尹 平 高寧陽 徐世芬 朱博暢 劉 佳

(上海市中醫(yī)醫(yī)院針灸科，上海 200071)

便秘作為多種疾病的病理過程引起的一種復(fù)雜的癥狀，臨床上通常將其分為3類，即慢傳輸型便秘、出口梗阻型便秘及混合型便秘。其中慢傳輸型便秘(slow transit constipation，STC)是一類以結(jié)腸傳輸減慢為特點的頑固性便秘，約占功能性便秘的45.5%，臨床上最為常見[1]。STC作為臨床上比較棘手的疾病，病程往往較長，內(nèi)科各種保守治療措施效果非常有限，大多數(shù)患者需要長期依賴各種刺激性瀉劑排便，但其結(jié)果是瀉劑的服用量越來越大，而效果越來越差，部分患者最終需手術(shù)切除傳輸遲緩的結(jié)腸方能解除癥狀[2]。

穴位埋線是目前在臨床應(yīng)用中得到驗證有效治療STC的方法，并且操作簡便，經(jīng)濟省時，患者易于接受。穴位埋線是在傳統(tǒng)針灸的基礎(chǔ)上，進行的創(chuàng)造性的改良和延伸。其通過羊腸線對穴位的持續(xù)有效刺激，調(diào)節(jié)人體的內(nèi)分泌系統(tǒng)，促進胃腸運動以達到通便作用。在臨床治療STC中，我們經(jīng)常用到的穴位有天樞、大腸俞、上巨虛，而其對大腸功能有著各自的特異性效應(yīng)。因此，本研究擬采用STC模型大鼠，對大腸俞、天樞、上巨虛分別給予相應(yīng)的穴位埋線處理，進而通過活性碳灌胃法及活性碳推進試驗測定大鼠6 h內(nèi)首粒黑便排出時間、大便粒數(shù)、質(zhì)量及碳推進百分率(%)，以明確不同穴位調(diào)節(jié)STC的穴位特異性，進一步為經(jīng)穴臟腑相關(guān)理論及針灸辨證論治規(guī)律提供科學(xué)客觀依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 實驗動物 清潔級SD大鼠62只，體質(zhì)量(150～180) g，雌雄各半，由上海中醫(yī)藥大學(xué)動物實驗中心提供，動物合格證號：SCXK(滬)2008-0016。實驗動物飼養(yǎng)于上海中醫(yī)藥大學(xué)實驗動物中心，給予標(biāo)準(zhǔn)光照周期(14 h光照、10 h黑夜)，室內(nèi)溫度(20±2) ℃，濕度(50±10)%，標(biāo)準(zhǔn)飼料，高壓滅菌墊料和飲水。實驗動物中心許可證號：SYXK(滬) 2004-0005。

1.1.2 主要試劑及器材 大黃顆粒劑(產(chǎn)品批號：1106202，江陰天江藥業(yè)有限公司)，電子天平(JA10002，上海精天電子儀器有限公司)，無菌注射針(規(guī)格：Φ 0.7×32 TWLE，上海米沙瓦醫(yī)科工業(yè)有限公司)，醫(yī)用羊腸線(規(guī)格：3-0，B30，鉻制；上海浦東金環(huán)醫(yī)療用品有限公司)，平頭毫針(規(guī)格：Φ 0.30 mm×50 mm，無錫佳健醫(yī)療器械有限公司)。

1.2 實驗方法

1.2.1 動物分組 將62只SD大鼠隨機分為5組，即正常組(6只)、模型組(14只)、天樞組(14只)、上巨虛組(14只)及大腸俞組(14只)。

1.2.2 模型制備 參照文獻[3]方法，模型組、天樞組、上巨虛組及大腸俞組每只大鼠給予每日灌服大黃粉懸液，首次大黃用量為200 mg/(kg·d)，以此遞增直至出現(xiàn)半數(shù)大鼠糞便變稀，然后保持此劑量至80%的稀便消失，然后再在此基礎(chǔ)上按200 mg/(kg·d)遞增給藥，直到又有近半數(shù)大鼠出現(xiàn)腹瀉，如此循環(huán)3次，待最后1次80%稀便消失，然后停止給藥1周，從而誘導(dǎo)實驗性STC大鼠模型。模型組、上巨虛組及大腸俞組各有1只大鼠死亡。天樞、上巨虛、大腸俞穴位定位參照[4]。天樞組、上巨虛組及大腸俞組每只大鼠，在造模成功的基礎(chǔ)上，分別給予天樞、上巨虛及大腸俞穴位埋線處理，7 d治療1次，4次為1個療程，共計28 d。

1.2.3 穴位埋線操作方法 先將“3-0”醫(yī)用羊腸線剪成長度約為0.5 cm的線段若干，置于消毒彎盤中，然后將羊腸線從注射針的針尖處穿入(此時線頭與針尖內(nèi)緣齊平)。消毒穴位區(qū)相應(yīng)皮膚，然后將無菌注射針刺入相應(yīng)穴位到達預(yù)定深度，先稍稍后退針，隨后用手指抵住毫針針尾做注射狀，緩慢將羊腸線推入穴位內(nèi)，當(dāng)注射針內(nèi)有空虛感時，方可出針，并確認羊腸線已埋入大鼠肌內(nèi)，埋線完畢，大鼠穴位處無需特殊處理。

1.2.4 觀察指標(biāo)及測試方法

1.2.4.1 大鼠6 h內(nèi)首粒黑便排出時間、大便粒數(shù)及質(zhì)量 采用活性碳灌胃法測定：經(jīng)口灌入100 g/L的活性碳懸液2 mL，并將大鼠分別予代謝籠里觀察，從活性碳灌胃完畢開始計時，記錄從灌胃到大鼠首粒黑便排出時間、6 h內(nèi)大便粒數(shù)及質(zhì)量。

1.2.4.2 腸道傳輸功能 活性碳推進試驗公式：碳推進百分率(%)=(碳末前端與幽門的距離/腸道全長)×100%。

1.3 統(tǒng)計學(xué)方法 應(yīng)用SPSS 16.0統(tǒng)計軟件進行數(shù)據(jù)分析。采用One-Way ANOVA單因素方差分析進行統(tǒng)計檢驗，所有統(tǒng)計檢驗均采用雙側(cè)檢驗。所得數(shù)據(jù)均以Means±SD表示。

2 結(jié) 果

2.1 不同時間節(jié)點對大鼠6 h內(nèi)首粒黑便排出時間、大便粒數(shù)及質(zhì)量的影響。

2.1.1 各組大鼠6 h內(nèi)首粒黑便排出時間在第1時間點的比較 見表1。

表1 各組大鼠6 h內(nèi)首粒黑便排出時間在第1時間點的比較

與正常組比較，*P<0.01；與模型組比較，△P<0.01；與天樞組比較，#P<0.01

由表1可見，模型組、上巨虛組及大腸俞組大鼠6 h內(nèi)首粒黑便排出時間均高于正常組(P<0.01)；天樞組、上巨虛組及大腸俞組大鼠6 h內(nèi)首粒黑便排出時間均低于模型組(P<0.01)；上巨虛組、大腸俞組大鼠6 h內(nèi)首粒黑便排出時間均高于天樞組(P<0.01)。

2.1.2 各組大鼠6 h內(nèi)大便粒數(shù)及質(zhì)量在第1時間點的比較 見表2。

表2 各組大鼠6 h內(nèi)大便粒數(shù)及質(zhì)量在第1時間點的比較

與正常組比較，*P<0.05，**P<0.01；與模型組比較，☆P<0.05，☆☆P<0.01

由表2可見，模型組、上巨虛組、大腸俞組6 h內(nèi)大便粒數(shù)均低于正常組(P<0.05)，天樞組與正常組6 h內(nèi)大便粒數(shù)比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)；天樞組6 h內(nèi)大便粒數(shù)高于模型組(P<0.01)，上巨虛組、大腸俞組6 h內(nèi)大便粒數(shù)高于模型組(P<0.05)。模型組6 h內(nèi)大便質(zhì)量低于正常組(P<0.01)，天樞組、上巨虛組、大腸俞組6 h內(nèi)大便質(zhì)量均高于模型組(P<0.01)；天樞組與上巨虛組、大腸俞組6 h內(nèi)大便粒數(shù)及質(zhì)量比較差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。

2.1.3 各組大鼠6 h內(nèi)首粒黑便排出時間在第2時間點的比較 見表3。

表3 各組大鼠6 h內(nèi)首粒黑便排出時間在第2時間點的比較

與正常組比較，*P<0.05，**P<0.01；與模型組比較，△P<0.01；與天樞組比較，#P<0.01

由表3可見，模型組、大腸俞組大鼠6 h內(nèi)首粒黑便排出時間均高于正常組(P<0.01)，上巨虛組大鼠6 h內(nèi)首粒黑便排出時間高于正常組(P<0.05)，天樞組與正常組大鼠6 h內(nèi)首粒黑便排出時間比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)；天樞組、上巨虛組、大腸俞組大鼠6 h內(nèi)首粒黑便排出時間均低于模型組(P<0.01)；上巨虛組、大腸俞組大鼠6 h內(nèi)首粒黑便排出時間均高于天樞組(P<0.01)。

2.1.4 各組大鼠6 h內(nèi)大便粒數(shù)及質(zhì)量在第2時間點的比較 見表4。

表4 各組大鼠6 h內(nèi)大便粒數(shù)及質(zhì)量在第2時間點的比較

與正常組比較，*P<0.05，**P<0.01；與模型組比較，△P<0.01；與天樞組比較，#P<0.05

由表4可見，模型組6 h內(nèi)大便粒數(shù)低于正常組(P<0.01)，上巨虛組、大腸俞組6 h內(nèi)大便粒數(shù)均低于正常組(P<0.05)，天樞組與正常組6 h內(nèi)大便粒數(shù)比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)；天樞組、上巨虛組、大腸俞組6 h內(nèi)大便粒數(shù)均高于模型組(P<0.01)；大腸俞組6 h內(nèi)大便粒數(shù)低于天樞組(P<0.05)。模型組6 h內(nèi)大便質(zhì)量低于正常組(P<0.01)，天樞組、上巨虛組、大腸俞組6 h內(nèi)大便質(zhì)量均高于模型組(P<0.01)，上巨虛組、大腸俞組與天樞組6 h內(nèi)大便質(zhì)量比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。

2.2 不同時間節(jié)點對碳推進百分率(%)變化的影響

2.2.1 各組大鼠碳推進百分率(%)在第1時間點的比較 見表5。

由表5可見，模型組、大腸俞組碳推進百分率(%)均低于正常組(P<0.01)；天樞組碳推進百分率(%)高于模型組(P<0.01)，上巨虛組碳推進百分率(%)高于模型組(P<0.05)；大腸俞組碳推進百分率(%)低于天樞組(P<0.05)，上巨虛組碳推進百分率(%)與天樞組比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。

表5 各組大鼠碳推進百分率(%)在第1時間點的比較

與正常組比較，*P<0.01；與模型組比較，△P<0.05，△△P<0.01；與天樞組比較，#P<0.05

2.2.2 各組大鼠碳推進百分率(%)在第2時間點的比較 見表6。

表6 各組大鼠碳推進百分率(%)在第2時間點的比較

與正常組比較，*P<0.05，**P<0.01；與模型組比較，△P< 0.01；與天樞組比較，#P<0.05

由表6可見，模型組、大腸俞組碳推進百分率(%)均低于正常組(P<0.01)，上巨虛組碳推進百分率(%)低于正常組(P<0.05)；天樞組、上巨虛組、大腸俞組碳推進百分率(%)均高于模型組(P<0.01)；大腸俞組碳推進百分率(%)低于天樞組(P<0.05)。

3 討 論

便秘在我國古代稱之為大便難、后不利、不更衣、陰結(jié)、陽結(jié)及脾約等。中醫(yī)學(xué)認為，便秘病因雖然復(fù)雜，但主要責(zé)之于大腸傳導(dǎo)功能失常。病位在大腸，與脾、胃、肝、腎、肺等臟腑功能失調(diào)有關(guān)?！端貑枴れ`蘭秘典論》曰：“大腸者，傳導(dǎo)之官，變化出焉。”《素問·五臟別論》亦云：“魄門亦為五臟使，水谷不得久藏。”隋·巢元方《諸病源候論》中概括其根本病機在于胃腸燥熱，津液內(nèi)虧，燥屎內(nèi)結(jié)，氣機閉塞致大腸傳導(dǎo)功能失職，而肺、脾、腎、肝四臟的功能失常也會影響大腸傳導(dǎo)功能而致便秘。

針灸治療便秘具有長期的臨床實踐經(jīng)驗，而穴位埋線是在傳統(tǒng)針灸手法的基礎(chǔ)上，在“深納而久留之，以治頑疾”的理論指導(dǎo)下，創(chuàng)造性的利用現(xiàn)代科技手段，以中西醫(yī)結(jié)合的觀點和方法發(fā)展起來的，是針灸的改良和延伸，是一種囊括多種療法(古代針灸淺刺法、留針、植針術(shù)和近代組織埋藏法)、多種效應(yīng)于一體的復(fù)合性治療方法，其機制為多種刺激效應(yīng)(針刺、埋針、持久行針等) 同時發(fā)揮作用。臨床研究發(fā)現(xiàn)，穴位埋線對結(jié)腸的運動有明顯的雙向調(diào)節(jié)作用，對高張力、運動亢進的腸道具有抑制效應(yīng)，可使腸管病理性痙攣獲得解除；而對低張力腸道則有興奮效應(yīng)，可促進腸道的運動，促進結(jié)腸動力，從而達到治療便秘的目的。同時穴位埋線具有神經(jīng)調(diào)節(jié)效應(yīng)，加強中樞對病理刺激傳入興奮的干擾、抑制和替代，能建立良好排便反射，使支配結(jié)腸的大腦神經(jīng)系統(tǒng)活動恢復(fù)，促進結(jié)腸運動，能明顯增加STC患者的排便次數(shù)，能有效地消除患者焦慮緊張情緒[5]。另外，現(xiàn)代醫(yī)學(xué)研究表明穴位埋線能改善大腸運動狀態(tài)，加速對糞便的推進，此作用通過興奮副交感神經(jīng)，同時抑制交感神經(jīng)，增加大腸液分泌，以利于糞便潤滑作用，同時還能糾正胃腸道肌電的紊亂狀況，從而調(diào)節(jié)胃腸蠕動[6]。穴位作用的特異性是臨床配穴及取得療效的關(guān)鍵，也是針灸研究的熱點問題。在臨床治療STC中，我們經(jīng)常用到的穴位有天樞、大腸俞、上巨虛，而它們對大腸功能有著各自的特異性效應(yīng)。天樞乃足陽明胃經(jīng)的腹部要穴、大腸募穴及大腸經(jīng)氣所聚集之處。《靈樞·本輸》曰：“大腸、小腸皆屬于胃?！薄峨y經(jīng)·六十七難》曰：“陰病行陽……陽病行陰?！痹隗w內(nèi)，五臟為陰，六腑為陽；在體表，腹為陰，背為陽?！瓣柌⌒嘘帯闭f的是六腑病多反應(yīng)于腹部的募穴。治療六腑病多取募穴，也即是“從陰引陽”、“陽病治陰”。天樞為大腸之募穴，位于臍旁2寸，腑氣之所通。天樞又緊鄰脾胃，為氣機運行之樞機。大腸俞可補大腸津液而潤腸通便，常與天樞俞募相配，相得益彰。上巨虛為大腸經(jīng)下合穴，根據(jù)《靈樞·邪氣臟腑病形》“合治內(nèi)府”理論，故上巨虛穴能治療大腸疾病，疏導(dǎo)腸腑而治療便秘，同時其又位于足陽明胃經(jīng)上，可使胃與大腸共調(diào)，增強腸蠕動，使腑氣下行，推動腸道內(nèi)糞便下排。

本研究通過觀察碳推進百分率和大鼠6 h內(nèi)首粒黑便排出時間、大便粒數(shù)及質(zhì)量來檢測腸道傳輸功能以驗證不同穴位調(diào)節(jié)STC的特異性，并發(fā)現(xiàn)經(jīng)灌服大黃粉懸液后，成功誘導(dǎo)實驗性STC大鼠模型形成。經(jīng)過穴位埋線治療后，不同穴位、不同治療時間點的腸道傳輸功能測定結(jié)果顯示，(1)對大鼠6 h內(nèi)首粒黑便排出時間、大便粒數(shù)及質(zhì)量的影響，①經(jīng)過2次穴位埋線治療后：天樞、上巨虛、大腸俞對大鼠6 h內(nèi)首粒黑便排出時間均有改善作用，能顯著縮短排便時間，且天樞的作用效果更優(yōu)于上巨虛、大腸俞(P<0.01)；天樞、上巨虛、大腸俞對大鼠6 h內(nèi)大便粒數(shù)及質(zhì)量均有改善作用，能顯著增加大鼠排便粒數(shù)及質(zhì)量；雖然天樞、上巨虛、大腸俞相比差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)，但天樞的作用效果有優(yōu)于上巨虛和大腸俞的趨勢。②經(jīng)過4次穴位埋線治療后：天樞、上巨虛、大腸俞對大鼠6 h內(nèi)首粒黑便排出時間均有改善作用，能顯著縮短排便時間，且天樞的作用效果更優(yōu)于上巨虛和大腸俞(P<0.01)；天樞、上巨虛、大腸俞對大鼠6 h內(nèi)大便粒數(shù)及質(zhì)量均有改善作用，能顯著增加大鼠排便粒數(shù)及質(zhì)量，且在增加大鼠排便粒數(shù)方面，天樞的作用效果要優(yōu)于大腸俞(P<0.05)。(2)對碳推進百分率(%)變化的影響，①經(jīng)過2次穴位埋線治療后：天樞、上巨虛對碳推進百分率(%)有顯著改善作用，能使其得到明顯提高。大腸俞雖也有一定改善，但無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。②經(jīng)過4次穴位埋線治療后：天樞組、上巨虛組及大腸俞組對碳推進百分率(%)均有顯著改善作用，均能使其得到明顯提高(P<0.01)。但天樞組較大腸俞組在改善程度方面更為明顯。上述結(jié)果說明，天樞、上巨虛及大腸俞對大鼠腸道傳輸功能均有不同程度的改善作用，且隨著治療時間的延長，在改善大鼠腸道傳輸功能的程度上有明顯增加的趨勢。同時，天樞在改善大鼠6 h內(nèi)首粒黑便排出時間方面，其作用效果優(yōu)于上巨虛和大腸俞；天樞在增加大鼠排便粒數(shù)方面，其作用效果優(yōu)于大腸俞；天樞在提高碳推進百分率(%)方面，其改善程度更為明顯?？梢?，穴位埋線治療STC效果明確，且不同穴位調(diào)節(jié)STC存在穴位特異性，特別是天樞更具有明確治療STC的臨床選取應(yīng)用意義。

[1] 李乾元，楊關(guān)根.慢傳輸便秘發(fā)病機理的研究[J].光明中醫(yī)，2009，24(12)：2394-2395.

[2] Liu LW，Thuneberg L，Huizinga JD.Seletive lesioning of interstitial cells of Cajal by methylene blue and light leads to loss of slow waves[J].Am JPhysiol，1994，266(3)：485-496.

[3] 張連陽，高峰，童衛(wèi)東，等.大鼠瀉劑結(jié)腸模型的建立[J].華人消化雜志，1998，6(10)：864-866.

[4] 林文注，王佩.實驗針灸學(xué)[M].上海：上?？茖W(xué)技術(shù)出版社，1999：276-282.

[5] 趙亞偉，葛兆希.穴位埋線配合中頻電療治療慢傳輸型便秘的臨床研究[J].臨床醫(yī)學(xué)工程，2009，16(8)：98-99.

[6] 周呂.胃腸生理學(xué)[M].北京：科學(xué)出版社，1998：753.