雌激素受體與孕激素受體在葡萄胎組織中的表達及臨床意義

吳韓梅，蔣志堅，張 淼，李毅光，李 曉，肖寧新 (.廣東省江門市新會婦幼保健院病理科，廣東 江門 5900;.廣東省江門市新會中醫(yī)院病理科，廣東 江門 5900;.廣東省江門市新會人民醫(yī)院病理科，廣東 江門 5900;.廣東省江門市人民醫(yī)院病理科，廣東 江門 5900)

葡萄胎又稱水泡狀胎塊，是一種妊娠滋養(yǎng)細胞疾病。在世界范圍內(nèi)的發(fā)生率為1∶(500～1000)次妊娠［1］，不同民族、不同地區(qū)的發(fā)生率各不相同。我院葡萄胎發(fā)生率為1:600。葡萄胎可分為完全性葡萄胎(完全性水泡狀胎塊complete hydatidiform，CHM)、部分性葡萄胎(部分性水泡狀胎塊partial hydatidiform，PHM)兩種。文獻報道繼發(fā)于兩者的滋養(yǎng)細胞腫瘤的危險度相差懸殊(分別為15%～20%和0.7%～4%)［2］。早期完全性葡萄胎由于缺乏典型病理特征常常漏診或誤診為流產(chǎn)水腫絨毛。因此，葡萄胎診斷和鑒別診斷對臨床治療和疾病預后有重要的意義。國內(nèi)報道葡萄胎的蛋白表達多見于 P57、P16、Ki67［3－4］。近年來，越來越多的研究表明雌激素受體(estrogen receptor，ER)、孕激素受體(progesterone receptor，PR)的低水平表達與多種人類腫瘤的發(fā)生、發(fā)展、侵襲轉(zhuǎn)移密切相關(guān)，雌激素受體、孕激素受體在葡萄胎的表達情況報道較少。本研究采用免疫組織化學(SP)法，檢測ER、PR在葡萄胎組織中的表達情況，探討ER、PR在葡萄胎的診斷及鑒別診斷的臨床意義。

1 資料與方法

1.1 一般資料:選擇2005年1月～2012年5月在本院住院診斷為完全性葡萄胎的患者35例，部分性葡萄胎28例，侵襲性葡萄胎9例，術(shù)前均未接受放療、化療。術(shù)后均有隨訪2年的完整資料，20例流產(chǎn)水腫絨毛。年齡14～39歲，孕周6～14周。同時收集20例人工流產(chǎn)終止妊娠者的絨毛組織(正常組);孕周6～9周，年齡16～42歲。術(shù)前無藥物接觸史，所有標本均經(jīng)病理學檢查確診。

1.2 檢驗方法:取存檔蠟塊，連續(xù)切片4 μm，ER、PE的檢測采用免疫組化鏈霉素蛋白過氧化酶法(strepvavifin－peroxidase，sp)。陰性對照:以PBS代替第一抗體;陽性對照:用北京中杉金橋生物技術(shù)有限公司的ER、PR。所有試劑購自北京中杉金橋生物技術(shù)有限公司，染色步驟按說明書進行。

1.3 結(jié)果判斷:ER、PR定位于胞核和(或)胞質(zhì)和(或)胞膜。隨機選取5個高倍視野，無陽性細胞者為(－)，陽性細胞數(shù)＜25%為弱陽性(+)，陽性細胞數(shù)25% －50%為陽性(++)，陽性細胞數(shù)＞50%為(+++)。

1.4 統(tǒng)計學方法:采用SPSS 13.0統(tǒng)計軟件進行卡方或列聯(lián)表分析處理，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié)果

2.1 ER在葡萄胎組織中的表達情況:ER陽性表達主要位于細胞質(zhì)，有少量細胞核、細胞膜著色。在正常絨毛、流產(chǎn)水腫絨毛、葡萄胎及侵襲性葡萄胎組織中，ER主要表達于絨毛、絨毛外滋養(yǎng)葉細胞及蛻膜組織。正常絨毛、流產(chǎn)水腫絨毛中以強陽性表達為主，葡萄胎組織中以弱陽性及中陽性表達為主，侵襲性葡萄胎以弱陽性表達為主。其陽性表達率分別為90.0%、95.0%、67.9%、65.7%、22.2%。其中正常絨毛組與流產(chǎn)水腫絨毛組陽性表達率差異無統(tǒng)計學意義(χ2=0.36，P＞0.05);正常絨毛組與葡萄胎組陽性表達率差異有統(tǒng)計學意義(χ2=4.13，P＜0.05);流產(chǎn)水腫絨毛組與葡萄胎組陽性表達率差異有統(tǒng)計學意義(χ2=6.26，P＜0.05);葡萄胎組與侵襲性葡萄胎組陽性表達率差異有統(tǒng)計學意義(χ2=6.55，P＜0.05)，提示隨著滋養(yǎng)細胞惡性程度的增加，ER染色陽性細胞數(shù)及染色強度降低且差異有統(tǒng)計學意義(P＞0.05)。詳見表1、圖 1。

2.2 PR在葡萄胎組織中的表達情況:PR陽性表達主要位于細胞核，呈棕黃色顆粒狀著色，同時有少量細胞質(zhì)、細胞膜及細胞間質(zhì)著色。PR在正常絨毛、稽留流產(chǎn)絨毛水腫、葡萄胎中主要表達于絨毛內(nèi)外的細胞滋養(yǎng)葉細胞，為弱陽性表達;在侵襲性葡萄胎組織中無表達。ER在正常絨毛、流產(chǎn)水腫絨毛、葡萄胎及侵襲性葡萄胎組織中，陽性表達率分別為5.00%、10.00%、3.57%、2.86%、0%。正常絨毛組與稽留流產(chǎn)水腫絨毛組陽性表達率差異無統(tǒng)計學意義(χ2=0.18，P＞0.05);正常絨毛組與葡萄胎組陽性表達率差異無統(tǒng)計學意義(χ2=0.15，P＞0.05);流產(chǎn)水腫絨毛組與葡萄胎組陽性表達率差異無統(tǒng)計學意義(χ2=1.54，P＞0.05);葡萄胎組與侵襲性葡萄胎組陽性表達率差異無統(tǒng)計學意義(χ2=0.29，P＞0.05)，提示PR表達與滋養(yǎng)細胞惡性程度無關(guān)。詳見表1、圖1。

表1 ER、PR在葡萄胎組織中的表達情況

圖1 圖A:ER在正常絨毛的表達(HC，×100);圖B:ER在水腫絨毛的表達 (HC，×100);圖C:ER在葡萄胎的表達(HC，×100);圖D:ER在侵襲性葡萄胎的表達 (HC，×100);。圖E:PR在正常絨毛的表達(HC，×100);圖F:PR在水腫絨毛的表達 (HC，×100);圖G:PR在葡萄胎的表達(HC，×100);圖H:PR在侵襲性葡萄胎的表達(HC，×100)

3 討論

葡萄胎是以絨毛水腫、滋養(yǎng)細胞不同程度增生的異常胎盤。根據(jù)形態(tài)學、細胞遺傳學和臨床病理特征不同，葡萄胎是一種異常的人類妊娠，將其分為完全性葡萄胎及部分性葡萄胎。葡萄胎中合體滋養(yǎng)細胞產(chǎn)生多種激素，如絨毛膜促性腺激素、胎盤泌乳素(hPL)、胎盤生長素、雌激素及孕激素等。水泡狀胎塊含有一定量的雌激素與孕激素，這些激素隨水泡狀胎塊的清除而減少或消失。

雌激素受體(estrogen receptor，ER)、孕激素受體(progesterone receptor，PR)是雌、孕激素與靶器官的結(jié)合位點，是一種甾體類激素，是對雌、孕激素有高度親和力的蛋白質(zhì)。雌、孕激素的作用可以通過ER、PR表達出來。雌激素受體、孕激素受體存在于正常乳腺上皮、子宮內(nèi)膜、子宮肌層、宮頸組織和卵巢。Gorski等提出雌激素受體的二步作用機制［5］，甾體激素以弱散方式進入靶細胞內(nèi)與存在于細胞漿內(nèi)的雌激素受體識別并結(jié)合，使雌激素受體被激活;在一定溫度下，激素－受體復合物轉(zhuǎn)位于細胞核，然后發(fā)生一系列反應，和結(jié)直腸癌等雌激素非靶器官腫瘤的發(fā)生、發(fā)展可能存在密切關(guān)系。

目前國內(nèi)外研究女性許多疾病如乳腺癌、子宮內(nèi)膜異位癥、子宮肌瘤、子宮內(nèi)膜癌、絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松、原因不明月經(jīng)過少、復發(fā)性流產(chǎn)等發(fā)病風險都與ER的表達有關(guān)。研究發(fā)現(xiàn)組織中存在的ER、PR隨腫瘤惡性程度的增加其陽性表達減少，且ER、PR的狀態(tài)又與這些器官惡性腫瘤的分化程度、病理類型、臨床分期、預后及對內(nèi)分泌治療的反應有著密切聯(lián)系［6］。目前對ER、PR與葡萄胎的相關(guān)性研究國內(nèi)外文獻研究較少，國內(nèi)張曉華等曾探討雌激素受體(ER)及孕激素受體(PR)在葡萄胎的表達及臨床意義［7］:ER表達與葡萄胎惡變高危因素年齡、葡萄胎惡變度、葡萄胎的惡變傾向負關(guān)聯(lián)，PR表達與葡萄胎惡變傾向未見相關(guān)性，提示ER可能作為提示葡萄胎惡變傾向的重要指標之一。安瑞芳等研究結(jié)果表明:ER表達與GTT惡性程度相關(guān)，提示對ER的監(jiān)測有助于判斷療效及預后，且為GTT的激素治療提供了可行性的依據(jù)［8］。

本實驗結(jié)果表明，ER在正常絨毛、水腫絨毛及葡萄胎中的表達具有顯著差異，進一步研究發(fā)現(xiàn)，葡萄胎與侵襲性葡萄胎中ER的表達也存在統(tǒng)計學差異，提示ER的表達與滋養(yǎng)葉細胞的惡性程度有關(guān)。因此，對ER的監(jiān)測有助于葡萄胎的臨床療效及預后判斷，并可為該病提供內(nèi)分泌治療的思路。本實驗研究成果可以為開發(fā)以ER為作用靶點的抗腫瘤藥物提供有效的理論依據(jù)。

［1］Sebire NJ.Fisher RA，Rees HC.Histopathological diagnosis of partial and complete Hydatidiform mole in the first trim ester of pregnancy［J］.pediatr DeV pathol，2003，6(1):69.

［2］Moconnell TG，Murphy KM，Hafez M，et al.Diagnosis and Sub－classification of hydatidiform mole using p57 immunohistochem is try and moleculargenoty.Ping Validation and practice setting with development of analgorithmic approach［J］.Am J surg pathol，2009，33(6):805.

［3］楊 倩.P57 KiP2在水泡狀胎塊組織中的表達及意義［J］.吉林醫(yī)學，2010，31(6):729.

［4］熱汗古麗.P16、Caspase－3在葡萄胎組織中的表達相關(guān)研究［J］.新疆醫(yī)科大學學報，2011，34(3):158.

［5］袁 瑞，樂愛文，姚珍薇，等.ER.PR.VEGF及其受體在原因不明月經(jīng)過少發(fā)病機機中的作用［J］.重慶醫(yī)學大學學報，2007，32(1):48.

［6］Lee P，Rosen DG，Zhu C，et al.Expression of progesterone receptor is a favorable prognostic marker in ovarian cancer［J］.Gynecol Oncol，2005，96(3):671.

［7］張曉華.雌激素受體和孕激素受體在葡萄胎中的表達和意義［J］.現(xiàn)代腫瘤醫(yī)學 2008，16(9):1595.

［8］安瑞芳.雌激素受體與妊娠滋養(yǎng)細胞腫瘤預后的相關(guān)性［J］.西安交通大學學報·醫(yī)學版，2009，30(2):221.