908例急性下呼吸道感染住院兒童病毒病原學(xué)研究

殷熾龍，李海風(fēng)，何苑棉（廣西梧州市紅十字會醫(yī)院兒科，廣西 梧州 543002）

下呼吸道感染（LRTI）是指氣管、支氣管、細(xì)支氣管和肺組織（包括肺泡和肺間質(zhì)）等部位的炎性反應(yīng)，是兒科常見病、多發(fā)病[1]。急性下呼吸道感染（Acute lower respiratory tract infection，ALRTI）占我國住院患兒的24.5%～65.2%，兒科門診的39.0%～65.5%，其中病毒是主要病原，最常見的病毒有呼吸道合胞病毒（Respiratory syncytin virus，RSV）、腺病毒（Adenovirus，ADV）、流感病毒（In fl uenza virus，IV）、副流感病毒（Parainfluenza，PIV）等[2]。桂東地區(qū)ALRTI住院兒童呼吸道病毒的流行特點怎樣，目前尚缺乏相關(guān)研究，因此，此研究收集2011年1月～2011年12月ALRTI住院患兒的血液標(biāo)本908份，用XK2100生物芯片進行檢測篩查4種常見呼吸道病毒的特異性抗體（IgM），包括呼吸道合胞病毒（RSV）、腺病毒（ADV）、流感病毒（IV）及副流感病毒（PIV），對檢測標(biāo)本陽性的病例進行統(tǒng)計分析。

1 資料與方法

1.1 一般資料：以2011年1月～2011年12月因患ALRTI在我院住院的患兒為研究對象。臨床疾病診斷標(biāo)準(zhǔn)均依據(jù)諸福棠《實用兒科學(xué)》第七版[3]?；純耗挲g為出生后1 d～14歲，共分為6組，（0月～）組373例，（1歲～）組160例，（2歲～）組131例，（3歲～）組63例，（4歲～）組50例，≥5歲組131例。季節(jié)：春季（3～5月）280例，夏季（6～8月）260例，秋季（9～11月）205例，冬季（12～2月）163例。符合入選標(biāo)準(zhǔn)患兒的血液樣本908份，男614例，女294例。

1.2 方法

1.2.1 標(biāo)本收集及處理：入選患兒均在入院后留取血液標(biāo)本，送中心實驗室。取待測血清100μl，加稀釋液200μl，稀釋均勻；在送樣模塊窗口內(nèi)加洗滌液4滴（約200μl），均勻濕潤；滲濾時間90～120 s。處理好的待測血清200μl，迅速加于窗口膜面上，待其滲入后，加洗滌液6滴（分兩次加入，3滴/次）。血清滲濾時間90～160 s。待洗滌液滲入后，將顯色劑6滴（約300μl）一次加入窗口膜面內(nèi)（酶結(jié)合物則只加4滴），待顯色劑（酶結(jié)合物）滲入后，加洗滌劑6滴（分兩次加入，3滴/次）。待洗滌劑滲入后，加入300μl混合好的底物。

1.2.2 送樣模塊：在15～30 min內(nèi)送入XK2100生物芯片閱讀儀自動檢測及結(jié)果判定。

1.3 統(tǒng)計學(xué)分析：采用SPSS 17.0進行統(tǒng)計分析，數(shù)據(jù)以率（%）表示，組間陽性率比較采用χ2檢驗，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 患兒血液呼吸道病毒的特異性抗體（IgM）檢出情況：908份血液標(biāo)本中，235份檢出了病毒的抗體（IgM）陽性，總檢出率為25.88%，其中ADV最常見，其次是IV和RSV、PIV，見表1。

表1 患兒血液病毒IgM檢出情況

2.2 病毒檢出的性別分布：614例男性患兒中，病毒IgM檢出陽性162例（26.4%）；女性294例中，病毒IgM陽性73例（24.8%），男女陽性檢出率比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（χ2=0.250，P=0.617）。不同病毒陽性檢出結(jié)果的性別分布及比較見表2。

2.3 病毒檢出的年齡分布：不同年齡組中病毒的檢出率不同，以4～5歲年齡組檢出率最高，見表3。不同年齡組之間的病毒總檢出率差異有統(tǒng)計學(xué)意義（χ2=92.549，P＜0.001）。其中不同年齡組各種病毒病原的檢出率見表4。

表2 不同病毒IgM陽性檢出結(jié)果的性別分布及比較[例（%）]

表3 病毒IgM檢出的年齡分布

表4 不同年齡組各病毒IgM的檢出率[例（%）]

2.4 病毒檢出的季節(jié)分布：病毒每個月均有檢出，全年中病毒總檢出率四季分布差異有統(tǒng)計學(xué)意義（χ2=101.011，P＜0.01），以夏季檢出率最高。不同病毒的四季分布亦有明顯的不同，其中RSV的陽性檢出高峰主要集中在春季和夏季；ADV在夏季檢出率最高；而IV在秋季檢出率最高，PIV沒有明顯的季節(jié)變化。見表5及圖1。

表5 不同季節(jié)各種病毒IgM的陽性率[例（%）]

圖1 下呼吸道感染患兒常見病毒-IgM陽性檢出率的月份分布

3 討論

目前大多數(shù)研究采用對患者鼻咽抽吸物進行呼吸道常見病毒的PCR法檢測，此方法檢測結(jié)果假陽性率較高，未患病者亦可檢測出多種呼吸道病毒。而較多ALRTI患者，雖然檢測出某呼吸道病毒陽性，但這病毒可能并不是導(dǎo)致患者此次患ALRTI的致病病原體。病毒感染后最初的免疫反應(yīng)，主要是針對病毒的特異性IgM首先產(chǎn)生，特異性IgM產(chǎn)生的較早，消失的快，所以能代表現(xiàn)癥感染，檢測病毒的特異性IgM假陽性率低[4]。

本研究采用XK2100生物芯片進行4種常見呼吸道病毒的特異性抗體（IgM）檢測，顯示，908例ALRTI住院兒童中，常見病毒的抗體（IgM）陽性總檢出率達25.88%，表明病毒病原在桂東地區(qū)兒童 ALRTI中占有重要地位，但與文獻報道稍有差別，總檢出率要低，可能與此檢測方法特異性較高，假陽性率低有關(guān)[5]。其中 ADV最為常見，檢出率為20.26 %，其次為IV（9.14%），RSV（3.63%），PIV（1.76%）。表明ADV和IV是桂東地區(qū)ALRTI最主要的病毒病原。研究還提示不同年齡組患兒病毒的總檢出率不同，年齡分布中以4～5歲年齡組兒童檢出率最高，達50%。性別分布中病毒檢出率在男女之間差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）。本研究還發(fā)現(xiàn)，雖然各種病毒感染的高峰期有季節(jié)分布不同，但總體流行高峰是在夏季，可能與桂東地區(qū)夏季氣候溫暖濕潤，有利于呼吸道病毒的傳播有關(guān)。

目前，國內(nèi)不同地區(qū)的病原學(xué)研究結(jié)果均提示RSV是兒童ALRTI中最重要的病毒病原[5-7]。本研究結(jié)果與之并不一致。與上述報道存在的差異，推測可能與本地區(qū)的地理、氣候環(huán)境不同有關(guān)。本研究中RSV檢出率以3～4歲年齡組的為最高，達9.5%。另有研究表明 RSV在冬春季出現(xiàn)高峰[7]。本研究顯示，RSV感染主要集中在春季和夏季， 冬季檢出率較低，與上述報道差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。

從表4和表5各年齡和各季節(jié)段來看基本都是ADV占首位。陽性率隨年齡的增長逐漸上升，4～5歲達高峰，ADV的流行季節(jié)以夏季為主。

IV感染占第二位。以4歲以上兒童感染為主，ADV的流行季節(jié)以秋季為主。PIV感染率較低。

總之，本研究通過對本地區(qū)908例ALRTI住院兒童的血液用XK2100生物芯片進行檢測篩查4種常見呼吸道病毒的特異性抗體（IgM），包括呼吸道合胞病毒（RSV）、腺病毒（ADV）、流感病毒（IV） 及副流感病毒（PIV），對檢測標(biāo)本陽性的病例進行統(tǒng)計分析。首次獲得桂東地區(qū)全年ALRTI住院兒童的常見病毒病原譜，初次認(rèn)識本地區(qū)兒童ALRTI常見病毒病原譜的構(gòu)成，以及與年齡、性別、季節(jié)分布的關(guān)系特點。結(jié)合統(tǒng)計分析，提示桂東地區(qū)醫(yī)師在診治ALRTI患兒時要考慮ADV、IV等相關(guān)病毒的感染，為臨床醫(yī)師在實際工作中針對ALRTI患兒治療提供了科學(xué)依據(jù)，同時也為本地區(qū)患兒預(yù)防接種防治呼吸道疾病積累了參考資料。

[1]中華醫(yī)學(xué)會兒科學(xué)分會呼吸學(xué)組,中華醫(yī)學(xué)會中華兒科雜志編輯委員會.急性呼吸道感染抗生素合理使用指南[J].中華兒科雜志,2001,39(6):379.

[2]Pechere JC.Community acquired pneumonian children[M].West Sussex:Cambridge Medical Publishing House,1995:29.

[3]胡亞美,江載芳,諸福棠.實用兒科學(xué)[M].第7版.北京:人民衛(wèi)生出版社,2002:1174.

[4]胡亞美,江載芳,諸福棠.實用兒科學(xué)[M].第7版.北京:人民衛(wèi)生出版社,2002:1180.

[5]項薔薇,羅運春,陳小芳.溫州育英兒童醫(yī)院急性下呼吸道感染住院患兒病毒病原學(xué)研究[J].中國實用兒科雜志,2005,12(12):738.

[6]李 軍,朱 啟.上海復(fù)旦大學(xué)附屬兒科醫(yī)院急性下呼吸道感染患兒常見病毒的檢測及臨床研究[J].微生物與感染,2006,1(4):217.

[7]Zhang RF,Jin Y,Xie ZP,et al.Human respiratory syncytial virus in children with acute respiratory tract infection in China[J].J Clin Microbiol,2010,48(11):4193.