半滑舌鰨苗種體外掛牌標(biāo)志技術(shù)研究

柳學(xué)周, 徐永江, 陳學(xué)周, 劉之亮,2, 王妍妍, 李春廣,2

(1. 中國(guó)水產(chǎn)科學(xué)研究院 黃海水產(chǎn)研究所農(nóng)業(yè)部海洋漁業(yè)可持續(xù)發(fā)展重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室, 山東 青島 266071;2.中國(guó)水產(chǎn)科學(xué)研究院 黃海水產(chǎn)研究所青島市海水魚類種子工程與生物技術(shù)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，山東 青島 266071;3.全國(guó)水產(chǎn)技術(shù)推廣總站，北京 100125)

近年來(lái)，隨著人類活動(dòng)的日益頻繁和臨港工業(yè)的快速發(fā)展等問(wèn)題不斷出現(xiàn)，導(dǎo)致了環(huán)境污染的加劇，致使我國(guó)近海海洋生物資源不斷衰退，開展人工增殖放流成為修復(fù)漁業(yè)資源最有效的方式，其中對(duì)放流生物的標(biāo)志技術(shù)成為對(duì)放流生物進(jìn)行追蹤、回捕和效果評(píng)估的重要依據(jù)。自19世紀(jì)80年代以來(lái)，有學(xué)者采用標(biāo)記魚的方法估算封閉水體中魚類種群的大小和死亡率，標(biāo)志放流技術(shù)開始慢慢發(fā)展起來(lái)。在諸多標(biāo)志方法中，體外標(biāo)志因易操作、易識(shí)別和成本低廉而廣為應(yīng)用，其中T型標(biāo)志牌為使用較為廣泛的一種體外標(biāo)志[1]，且標(biāo)志牌一般不易脫落，保持率高，保留時(shí)間長(zhǎng)，能區(qū)分不同的個(gè)體，有易被發(fā)現(xiàn)及回收簡(jiǎn)便等優(yōu)點(diǎn)[2-3]，適宜于長(zhǎng)期的標(biāo)記追蹤試驗(yàn)研究。國(guó)外開展的海水魚類體外掛牌標(biāo)志放流技術(shù)研究較多，如金頭鯛(Sparusaurata)[4]、鮭魚(Salmosalar)[5]、牙鲆(Paralichthysolivaceus)[6]、歐洲無(wú)須鱈(Merlucciusmerluccius)[7]等。我國(guó)自上世紀(jì)90年代以來(lái)也相繼開展了多種魚類的標(biāo)志放流技術(shù)研究，如大黃魚(Pseudosciaenacrocea)[8-9]、牙鲆[10]、鮸魚(Miichthysmiiuy)[11]的標(biāo)志放流等，取得了一定的進(jìn)展，為這些魚類的大規(guī)模增殖放流奠定了基礎(chǔ)。目前，尚未見有關(guān)海水魚類T型牌標(biāo)志放流的報(bào)道。

半滑舌鰨(CynoglossussemilaevisGünther)是我國(guó)本土重要經(jīng)濟(jì)魚種，目前，其自然資源和漁獲量日益減少，加快開展半滑舌鰨增殖放流已成為保護(hù)其自然資源的重要途徑之一。近年來(lái)，我國(guó)黃渤海區(qū)開展了大規(guī)模半滑舌鰨的增殖放流工作，年放流半滑舌鰨苗種數(shù)百萬(wàn)尾。為評(píng)估半滑舌鰨的放流增殖的效果，2010年以來(lái)，筆者開展了半滑舌鰨的體外掛牌標(biāo)志技術(shù)研究，篩選出了適宜半滑舌鰨苗種放流專用的T型標(biāo)志牌，并確定了適宜的標(biāo)志方法，為批量化標(biāo)志放流和增殖效果評(píng)估提供了技術(shù)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 標(biāo)志牌規(guī)格和標(biāo)志槍

T型標(biāo)志牌主要包括錨定端、連接線和標(biāo)志牌3個(gè)部分，各部分量度如圖1所示，T-A、T-B、T-C和T-D等4種標(biāo)志牌的規(guī)格見表1。標(biāo)志牌、連接線加錨定端都是聚乙烯材制制作，安全無(wú)毒。各種標(biāo)志牌總重量與標(biāo)志牌重量與實(shí)驗(yàn)魚體濕重的比值(R)

R=WT/WF×100%

(1)

式中，WT為不同規(guī)格標(biāo)志牌的總重量，WF為實(shí)驗(yàn)魚的體重。4種規(guī)格的標(biāo)志牌與試驗(yàn)魚體重的比值見表2。

本研究中，以標(biāo)記后實(shí)驗(yàn)魚暫養(yǎng)期間脫牌率低于10%，存活率高于90%作為評(píng)價(jià)T型標(biāo)志牌是否適宜于標(biāo)志放流的依據(jù)。

表1試驗(yàn)用T型標(biāo)志牌的規(guī)格特征Table 1 The size and weight of four kinds of T bar tags used in the present study

表2 標(biāo)志牌重量占魚體重量的比值Table 2 The T bar tag weight to fish weight ratio (R) in the present study

圖1 標(biāo)志試驗(yàn)使用的標(biāo)志牌及規(guī)格示意圖Fig.1 Type and size schematic of T bar tags used in the present study

1.2 實(shí)驗(yàn)魚及實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)

2011-07-10本試驗(yàn)在青島忠海水產(chǎn)有限公司進(jìn)行。試驗(yàn)用半滑舌鰨苗種為該公司人工培育的健康苗種，苗種色澤正常，大小規(guī)則整齊，健康活潑，攝食良好。

選用平均全長(zhǎng)5 cm(體重0.8～1.2 g)、8 cm(體重3.2～4.6 g)、12 cm(體重7.2～9.7 g)、16 cm(體重18～22 g)的苗種用于試驗(yàn),利用4種不同規(guī)格的T型標(biāo)志牌(T-A、T-B、T-C、T-D)進(jìn)行了掛牌標(biāo)記。全長(zhǎng)5 cm的苗種僅以T-A標(biāo)志牌標(biāo)記，其它3個(gè)規(guī)格的苗種分別以4種標(biāo)志牌標(biāo)記。共設(shè)置13個(gè)試驗(yàn)組，每組使用試驗(yàn)魚100尾，每個(gè)試驗(yàn)組設(shè)置一個(gè)重復(fù)。試驗(yàn)用苗種先在容積為25 m3的水泥池中暫養(yǎng)3 d后用于試驗(yàn)。

試驗(yàn)用魚的培育條件：水溫20～24 ℃、鹽度28～30、pH 7.8～8.2、溶解氧5 mg/L以上。暫養(yǎng)期間投喂日本產(chǎn)的日清配合飼料，投喂量為魚體重的2%～3%，每日清理培育池一次。

1.3 標(biāo)志操作方法

試驗(yàn)開始前，所有試驗(yàn)魚提前一天停食。標(biāo)志操作前，所有實(shí)驗(yàn)魚都以MS-222進(jìn)行麻醉，麻醉劑量選擇的標(biāo)準(zhǔn)是試驗(yàn)魚入麻時(shí)間快，恢復(fù)時(shí)間短，無(wú)不良反應(yīng)。半滑舌鰨苗種的麻醉劑量參照劉長(zhǎng)琳等[12]的結(jié)果，全長(zhǎng)5～8 cm的苗種設(shè)定為50 mg/L，全長(zhǎng)12 cm以上苗種設(shè)定為80 mg/L。

在掛牌標(biāo)志時(shí)，以專用標(biāo)志槍進(jìn)行背部掛牌標(biāo)記操作。標(biāo)志槍槍頭以70%酒精消毒后使用。掛牌標(biāo)記的部位選擇被標(biāo)記魚背鰭基部下方背部肌肉最厚的部位(一般距頭部約2 cm處)，標(biāo)記槍與魚體呈45°～60°角。標(biāo)記槍頭自鱗下間隙處插入，入肌肉5 mm左右，標(biāo)志槍槍頭不穿透魚體。標(biāo)記完成后以手指輕壓標(biāo)志部位輕輕快速抽出標(biāo)記槍，使得標(biāo)志牌錨定端留在實(shí)驗(yàn)魚體內(nèi)。標(biāo)志后對(duì)標(biāo)志魚用土霉素(5 mg/L)進(jìn)行浸泡消毒處理，以防止傷口感染。

圖2 T型標(biāo)志牌對(duì)半滑舌鰨的標(biāo)記效果Fig.2 Real effect of T bar tagged tongue sole

1.4 標(biāo)志魚的暫養(yǎng)

掛牌標(biāo)記完成后，各個(gè)組別的試驗(yàn)魚分別置于500 L的小型玻璃鋼水槽內(nèi)暫養(yǎng)15 d，暫養(yǎng)條件：水溫22～24 ℃、鹽度28～30、pH 7.8～8.2、溶解氧5 mg/L以上，充氣、流水培育，流水量為7～8個(gè)流程。暫養(yǎng)期間投喂日本產(chǎn)的日清配合飼料，投喂量為魚體重的2～3%，每日清池1次。暫養(yǎng)期間，記錄每個(gè)實(shí)驗(yàn)組的死亡率和脫牌率，觀察實(shí)驗(yàn)魚的游泳行為和攝食情況。

在室內(nèi)玻璃鋼水槽暫養(yǎng)15 d，將存活下來(lái)的實(shí)驗(yàn)魚選擇T-A標(biāo)志的全長(zhǎng)12 cm的半滑舌鰨苗種180尾轉(zhuǎn)移到室外池塘(1畝)進(jìn)行養(yǎng)殖，同時(shí)以180尾同等規(guī)格的非標(biāo)記苗種作為對(duì)照在室外池塘內(nèi)共同培育。入池前測(cè)量實(shí)驗(yàn)魚的體長(zhǎng)和體重，經(jīng)池塘養(yǎng)殖60 d后出池，記錄成活率和脫牌率，隨機(jī)測(cè)量50尾試驗(yàn)魚的體長(zhǎng)、體重等生長(zhǎng)情況，以評(píng)估體外掛牌標(biāo)志的效果。池塘養(yǎng)殖期間，養(yǎng)殖水溫23～26 ℃，溶解氧7 mg/L以上，養(yǎng)殖池塘每天換水約30%。養(yǎng)殖期間，先投喂活鹵蟲進(jìn)行馴化誘導(dǎo)攝食，1周后轉(zhuǎn)為日清牌配合飼料。標(biāo)志后半滑舌鰨苗種在池塘養(yǎng)殖期間的特異生長(zhǎng)率(SGR)

SGR=(eG-1) ×100%

(2)

(3)

式中，W1為起始個(gè)體重量，W2為實(shí)驗(yàn)結(jié)束后個(gè)體體重，Δt為實(shí)驗(yàn)持續(xù)時(shí)間。

1.5 掛牌標(biāo)志放流示范

2011年秋季，在萊州開展半滑舌鰨生產(chǎn)性放流，利用本研究開發(fā)的T-A標(biāo)志牌對(duì)平均全長(zhǎng)12 cm的半滑舌鰨苗種進(jìn)行批量標(biāo)記試驗(yàn)。

1.6 實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析

試驗(yàn)數(shù)據(jù)均表示為每個(gè)試驗(yàn)組兩個(gè)重復(fù)的平均數(shù)。在池塘培育的標(biāo)記魚和未標(biāo)記魚的生長(zhǎng)數(shù)據(jù)表示為Mean ± S.D.，利用單因素方差分析(ANOVA)統(tǒng)計(jì)分析體長(zhǎng)、體重和存活率等的差異顯著性，當(dāng)P<0.05視為差異顯著，反之不顯著。統(tǒng)計(jì)分析使用SPSS(16.0版本)軟件進(jìn)行。

2 結(jié) 果

2.1 掛牌標(biāo)記對(duì)苗種脫牌率、成活率的影響

標(biāo)記后試驗(yàn)魚在室內(nèi)500 L的玻璃剛水槽內(nèi)流水暫養(yǎng)。在掛牌標(biāo)記操作后，試驗(yàn)魚一般靜臥于池底不游動(dòng)，不攝食。全長(zhǎng)8 cm的苗種在第4 d開始逐漸攝食，游泳行為正常；全長(zhǎng)12 cm的苗種在標(biāo)記操作2 d后游泳行為正常;在第3 d開始攝食，攝食量隨時(shí)間推移逐漸與對(duì)照組基本一致;全長(zhǎng)16 cm的苗種在暫養(yǎng)后第2 d恢復(fù)正常游泳行為，并有部分苗種開始攝食，在第3 d攝食正常。

不同規(guī)格的T型標(biāo)志牌對(duì)不同規(guī)格的半滑舌鰨苗種進(jìn)行標(biāo)志后暫養(yǎng)15 d的脫牌率和存活率見表3。平均全長(zhǎng)5 cm的苗種：由于魚體規(guī)格過(guò)小，本研究?jī)H以T-A標(biāo)志牌標(biāo)記，但脫牌率仍高達(dá)47%以上，且實(shí)驗(yàn)魚在標(biāo)記后3 d內(nèi)全部死亡(結(jié)果未在表3列示)。平均全長(zhǎng)16 cm的苗種：以T-A和T-B標(biāo)志牌標(biāo)記后成活率為100%，未出現(xiàn)脫牌的情況；以T-C和T-D標(biāo)志牌標(biāo)記后，脫牌率高于30%，成活率低于18%，T-D標(biāo)記組全部死亡。對(duì)于平均全長(zhǎng)12 cm的苗種：以T-A標(biāo)志牌標(biāo)記后成活率為100%，未發(fā)現(xiàn)脫牌；以T-B標(biāo)志牌標(biāo)記后脫牌率為7%，但成活率僅為80%；以T-C和T-D標(biāo)志牌標(biāo)記后，脫牌率高于30%，成活率低于18%，T-D標(biāo)記組全部死亡。平均全長(zhǎng)8 cm的苗種：以T-A標(biāo)志牌標(biāo)記后成活率為92%，脫牌率為7%；以T-B標(biāo)志牌標(biāo)記后脫牌率為20%，但成活率僅為57%；以T-C和T-D標(biāo)志牌標(biāo)記后，脫牌率高于45%，成活率低于5%，T-D標(biāo)記組實(shí)驗(yàn)魚在標(biāo)記后3 d內(nèi)全部死亡。

由此可見，在本實(shí)驗(yàn)條件下，全長(zhǎng)5 cm以下的苗種不適宜以標(biāo)志牌標(biāo)記放流，對(duì)于全長(zhǎng)8 cm以上的苗種標(biāo)記應(yīng)使用T-A標(biāo)志牌，對(duì)于16 cm以上苗種的標(biāo)志，可使用T-A和T-B標(biāo)志牌。

表3 不同規(guī)格的半滑舌鰨苗種以T型牌標(biāo)記后15 d的脫牌率和成活率Table 3 The tag-shedding rate and survival rate of tongue sole juveniles after tagged with T bar tags in 15 days

2.2 標(biāo)志苗種的生長(zhǎng)

掛牌標(biāo)記后全長(zhǎng)12 cm的半滑舌鰨苗種經(jīng)15 d的室內(nèi)暫養(yǎng),放入室外池塘培育觀察其標(biāo)記效果。共放入標(biāo)記試驗(yàn)苗種180尾，同等規(guī)格未標(biāo)記的試驗(yàn)魚180尾。經(jīng)2個(gè)月池塘養(yǎng)殖，試驗(yàn)魚出池。計(jì)數(shù)出帶標(biāo)記牌試驗(yàn)魚178尾，不帶標(biāo)記牌試驗(yàn)魚182尾，試驗(yàn)池塘養(yǎng)殖成活率達(dá)100%。標(biāo)記試驗(yàn)魚平均全長(zhǎng)17.37±1.97 cm，平均體重達(dá)23.83±3.02 g，未標(biāo)記魚平均全長(zhǎng)達(dá)18.07±2.02 cm，平均體重達(dá)24.59±3.64 g。結(jié)果表明掛牌標(biāo)記魚生長(zhǎng)與未標(biāo)記苗種生長(zhǎng)無(wú)顯著差異(P>0.05)(表4)，標(biāo)記效果良好。

表4半滑舌鰨標(biāo)志苗種在土池飼養(yǎng)60 d后的生長(zhǎng)指標(biāo)Table 4 The growth performance of T bar tagged tongue sole domesticated in the outdoor pond

2.3 半滑舌鰨標(biāo)志放流試驗(yàn)

2011-11在萊州三山島近海進(jìn)行了半滑舌鰨規(guī)?；帕髟囼?yàn)，放流半滑舌鰨苗種52萬(wàn)尾，其中利用T-A標(biāo)志牌標(biāo)記放流平均全長(zhǎng)12 cm的半滑舌鰨苗種1萬(wàn)尾。

標(biāo)志放流流程：根據(jù)上述實(shí)驗(yàn)結(jié)果，使用T-A標(biāo)志牌對(duì)平均全長(zhǎng)12 cm的半滑舌鰨苗種進(jìn)行了標(biāo)記，標(biāo)記后利用3個(gè)室內(nèi)圓形水泥池(規(guī)格為6 m×6 m×1 m)流水暫養(yǎng)48 h，出池打包后裝船放入大海。出池時(shí)計(jì)數(shù)池中苗種死亡個(gè)體數(shù)量及脫落的標(biāo)志牌數(shù)量，統(tǒng)計(jì)出該標(biāo)志牌標(biāo)記暫養(yǎng)成活率達(dá)99.9%，脫牌率為0.15%，表明標(biāo)記效果較好。

3 討 論

本研究首次研制并探討了不同規(guī)格的T型標(biāo)志牌對(duì)半滑舌鰨苗種的標(biāo)記效果，篩選出了適宜于半滑舌鰨苗種標(biāo)記的T型標(biāo)志牌，提出了規(guī)范的標(biāo)記方法，為半滑舌鰨增殖放流及效果評(píng)估提供了重要的手段和工具。

3.1 T型標(biāo)志牌規(guī)格與脫牌率和成活率的關(guān)系

T型標(biāo)志牌的錨定端、連接線和標(biāo)志牌等部分的尺寸,特別是錨定端的長(zhǎng)度和直徑直接影響標(biāo)記效果。半滑舌鰨苗種體細(xì)長(zhǎng)且肌肉厚度較薄，在掛牌標(biāo)記時(shí)，較大規(guī)格的T-D和T-C標(biāo)志牌很容易在魚體的錨定部位造成較大的創(chuàng)口而脫牌或造成死亡。本研究研制的小規(guī)格T-A標(biāo)志牌，大大縮短了錨定端的長(zhǎng)度和直徑，以適合于小規(guī)格苗種的標(biāo)記。對(duì)于半滑舌鰨苗種的標(biāo)志實(shí)驗(yàn)表明，標(biāo)志牌錨定部位的創(chuàng)口較小，且標(biāo)志牌所用材料與魚體連接處有較好的生物相容性，標(biāo)志后15 d傷口已愈合，標(biāo)志魚的脫牌率和死亡率低。在對(duì)條紋鱸(Moronesaxatilis)的標(biāo)志放流研究中，研究者認(rèn)為T型標(biāo)志牌錨定端長(zhǎng)度應(yīng)盡量等于或者小于被標(biāo)志魚的脊椎骨間距[13]。在本研究中，對(duì)于小規(guī)格的苗種，利用T-A標(biāo)志牌取得了較好的標(biāo)記效果，但使用錨定端長(zhǎng)度和直徑都較大的T-C和T-D類型的標(biāo)志牌則造成了較高的脫牌率。因此，對(duì)于鲆鰈魚類小規(guī)格苗種的標(biāo)志研究，首先應(yīng)考慮標(biāo)志牌錨定端直徑的大小，同時(shí)應(yīng)考慮標(biāo)志牌重量和操作方法等因素。

已有研究表明，T型標(biāo)志牌的連接線長(zhǎng)度可能影響標(biāo)記成功率，連接線過(guò)短可能導(dǎo)致較高的脫牌率[14]。但另一方面，較長(zhǎng)的連接線會(huì)增加標(biāo)志牌的整體重量，在水里產(chǎn)生較大的阻力，進(jìn)而對(duì)魚體的游泳行為造成影響，最為主要的是標(biāo)志魚被捕食者發(fā)現(xiàn)的幾率增加。因此，在制作T型標(biāo)志牌時(shí)應(yīng)通過(guò)實(shí)驗(yàn)而確定適宜的連接線長(zhǎng)度。Jolivet等[7]在研究歐洲無(wú)須鱈(Merlucciusmerluccius)標(biāo)志放流時(shí)提出，標(biāo)志牌重量與魚體重的比值(R)>2時(shí)被標(biāo)志魚死亡快且死亡率高，脫牌率升高。在本研究中，對(duì)于平均全長(zhǎng)8 cm的苗種，T-A標(biāo)志牌較為適宜，結(jié)合表2中的R值，認(rèn)為當(dāng)R<0.63時(shí)標(biāo)志牌適宜于標(biāo)志放流。而對(duì)于全長(zhǎng)為12 cm以上的大規(guī)格苗種，考慮到標(biāo)記后的成活率和脫牌率，以R=0.3來(lái)評(píng)價(jià)標(biāo)志牌對(duì)半滑舌鰨的標(biāo)志效果較為適宜，當(dāng)R<0.3時(shí)標(biāo)志牌較適宜于標(biāo)記操作。在本研究條件下，從脫牌率、存活率和實(shí)驗(yàn)魚的標(biāo)志后行為以及生長(zhǎng)等數(shù)據(jù)綜合分析，T-A標(biāo)志牌適宜于全長(zhǎng)8 cm以上半滑舌鰨苗種的標(biāo)志，而T-B標(biāo)志牌適宜于16 cm以上大規(guī)格苗種的標(biāo)志。同時(shí)，該T-A型標(biāo)志牌也可用于其它鲆鰈類苗種掛牌標(biāo)志。

3.2 其它因素對(duì)掛牌標(biāo)記效果的影響

T型標(biāo)志牌的掛牌標(biāo)志多采用標(biāo)志槍操作，Davis等[15]發(fā)現(xiàn)標(biāo)志槍的槍頭過(guò)短也可引起較高的脫牌率。本研究中，根據(jù)4種不同的T型標(biāo)志牌錨定端的直徑制作了不同的標(biāo)志槍，要求槍尖和撞針的直徑與標(biāo)志牌錨定端吻合，槍尖入魚體后不會(huì)產(chǎn)生倒掛而造成額外損傷或者將標(biāo)志牌拖出。另外，在標(biāo)記操作時(shí)，要求槍尖斜向入肌肉深度控制在5 mm左右，以不穿透魚體為好，避免對(duì)魚體造成過(guò)大損傷。

在利用T型標(biāo)志牌標(biāo)記放流魚時(shí)，由于錨定端需鎮(zhèn)入魚體內(nèi)，因此會(huì)在魚體標(biāo)志部位造成創(chuàng)傷。對(duì)鮭魚(Salmosalar)的標(biāo)志技術(shù)研究表明，如若標(biāo)記操作或操作后處理不當(dāng)，或者標(biāo)記后不經(jīng)暫養(yǎng)直接放入野生環(huán)境中，標(biāo)志魚的標(biāo)志部位容易惡化，形成壞死，直接導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)魚的死亡或生長(zhǎng)抑制[14，16]。因此，在標(biāo)志放流過(guò)程中，應(yīng)對(duì)標(biāo)記后的魚體進(jìn)行創(chuàng)口的消毒處理并對(duì)標(biāo)記后的實(shí)驗(yàn)魚進(jìn)行暫養(yǎng)馴化，以提高標(biāo)志魚的成活率。本研究的標(biāo)記操作中，標(biāo)記前對(duì)標(biāo)志槍頭進(jìn)行了消毒處理并在標(biāo)記后對(duì)放流魚進(jìn)行消毒處理，標(biāo)志魚體上的標(biāo)記創(chuàng)口可在較短時(shí)間內(nèi)愈合，對(duì)實(shí)驗(yàn)魚的生長(zhǎng)和存活影響較?。涣硗?，標(biāo)記操作時(shí)，T型標(biāo)志牌標(biāo)記部位選在試驗(yàn)魚頭部后方側(cè)線上方肌肉最厚處，此處遠(yuǎn)離中樞神經(jīng)系統(tǒng)和血液循環(huán)系統(tǒng)，不會(huì)對(duì)標(biāo)志魚產(chǎn)生過(guò)多的生理和代謝脅迫；同時(shí)，標(biāo)記操作時(shí)標(biāo)志槍傾斜并與魚體呈45°～60°角，可使標(biāo)記后標(biāo)志牌向魚體側(cè)后方傾斜并與魚體游泳方向保持一致，減少游泳阻力的影響。

目前，開展的不同類型的標(biāo)志牌的標(biāo)記效果試驗(yàn)多是在實(shí)驗(yàn)室條件下進(jìn)行，在標(biāo)記后暫養(yǎng)周期的長(zhǎng)短可能對(duì)評(píng)價(jià)一種標(biāo)志牌的效果產(chǎn)生影響。前人研究表明，短期內(nèi)(2～5 d)的暫養(yǎng)觀察可能無(wú)法精確評(píng)估一種標(biāo)志牌對(duì)實(shí)驗(yàn)魚的效果，因此一般標(biāo)志后的暫養(yǎng)實(shí)驗(yàn)時(shí)間需5 d以上，暫養(yǎng)時(shí)間越長(zhǎng)，對(duì)于標(biāo)志牌的標(biāo)志效果就越容易評(píng)價(jià)和確定[17]。本研究中，半滑舌鰨標(biāo)記魚的暫養(yǎng)時(shí)間為15 d，同時(shí)在池塘中進(jìn)行暫養(yǎng)時(shí)生長(zhǎng)無(wú)差異，同時(shí)在后續(xù)大批量標(biāo)志放流時(shí)中發(fā)現(xiàn)較高的成活率和較低的脫牌率，表明本研究使用的暫養(yǎng)和標(biāo)志效果評(píng)價(jià)方法是適宜的。

3.3 適宜標(biāo)志苗種的規(guī)格

Nielson等[1]提出掛牌標(biāo)記一般用于個(gè)體較大的魚，如體長(zhǎng)在15 cm以上的魚[13-14]。本研究使用的標(biāo)志用苗種都在16 cm以下，全長(zhǎng)5 cm的苗種由于體型過(guò)于單薄和弱小，不適用于掛牌標(biāo)記操作，其可能原因是小規(guī)格苗種難以忍受固著時(shí)的操作壓力所造成的創(chuàng)傷，從而造成死亡。對(duì)于全長(zhǎng)8 cm以上苗種，雖然其全長(zhǎng)達(dá)到一定規(guī)格，但苗種體重較小，在進(jìn)行苗種標(biāo)志時(shí)，需特別注意標(biāo)志牌的重量不可過(guò)大，重量過(guò)大的標(biāo)志牌可對(duì)苗種游泳和攝食行為造成障礙，且很容易在自然水體被其天敵生物捕食。因此，開發(fā)適宜半滑舌鰨苗種標(biāo)記的標(biāo)志牌時(shí)，應(yīng)盡量制作小規(guī)格標(biāo)志牌。從本研究結(jié)果看，全長(zhǎng)8 cm的苗種在以T-A標(biāo)志牌標(biāo)記后雖成活率達(dá)90%以上，但仍有少量死亡和脫牌，本研究雖未選擇10 cm左右的苗種進(jìn)行標(biāo)記試驗(yàn)，考慮到苗種的規(guī)格、身體厚度以及標(biāo)記操作技術(shù)，建議今后標(biāo)志放流時(shí)，使用T-A標(biāo)志牌，選擇全長(zhǎng)10 cm以上的半滑舌鰨苗種進(jìn)行標(biāo)記放流為宜。

參考文獻(xiàn)(References)：

[1] NIELSEN L A. Methods of marking fish and shellfish [M]. NewYork: American Fisheries Society, 1992.

[2] TAO J T, DAI X J. Current status of fish tagging technology [J]. Journal of Shanghai Fisheries University, 2005, 14(4): 452-456. 陳錦淘, 戴小杰. 魚類標(biāo)志放流技術(shù)的研究現(xiàn)狀 [J]. 上海水產(chǎn)大學(xué)學(xué)報(bào), 2005, 14(4): 452-456.

[3] ZHOU Y D, XU H X, DAI X J, et al. An application effect of several tagged methods in fisheries resource enhancement [J]. Journal of Fujian Fisheries, 2008, 116:7-12. 周永東, 徐漢祥, 戴小杰, 等. 幾種標(biāo)志方法在漁業(yè)資源增殖放流中的應(yīng)用效果[J]. 福建水產(chǎn), 2008, 116:7-12.

[4] S?NCHEZ-LAMADRID A. Effectiveness of four methods for tagging juveniles of farm-reared gilthead sea bream,SparusaurataL. [J]. Fisheries Management and Ecology, 2001, 8(3):271-278.

[5] CROZIER W W， KENNEDY G J A. Impact of tagging with coded wire tags on marine survival of wild Atlantic salmon (Salmosalar, L.) migrating from the R. Bush, Northern Ireland [J]. Fish. Res., 2002,59(1-2): 209-215.

[6] TANAKA M, SEIKAI T, YAMAMOTO E, et al. Significance of larval and juvenile ecophysiology for stock enhancement of the Japanese flounder,Paralichthysolivaceus[J]. Bull. Mar. Sci.,1998, 62: 551-571.

[7] JOLIVET A, PONTUAL H, GARREN F, et al. Effects of T-bar and DST tagging on survival and growth of european hake [J]. Reviews: Methods and Technologies in Fish Biology and Fisheries, 2009, 9:181-193.

[8] LIU J F, WENG Z C, TANG X G, et al. Preliminary Study on Tagging Release and Early Ecological Characteristics of ReleasedPseudosciaenacroceain Guanjing Yang [J]. Marine Science, 1994, (5): 54-59. 劉家富, 翁忠釵, 唐曉剛, 等. 官井洋大黃魚標(biāo)志放流技術(shù)與放流標(biāo)志魚早期生態(tài)習(xí)性的初步研究 [J]. 海洋科學(xué), 1994, (5): 54-59.

[9] DING A X, HE Y E. Test on release and proliferation ofPseudosciaenacroceain Daiquyang sea area [J]. China Fisheries, 2010,(8): 67-68. 丁愛俠, 賀依爾. 舟山岱衢族大黃魚放流增殖試驗(yàn) [J]. 中國(guó)水產(chǎn), 2010,(8): 67-68.

[10] LIU Q. Japanese flounder marking techniques and juveniles released for stock enhancement [D]. Qingdao: Ocean University of China, 2009. 劉奇.褐牙鲆標(biāo)志技術(shù)與增殖放流試驗(yàn)研究[D]. 青島：中國(guó)海洋大學(xué)碩士論文, 2009.

[11] SUN Z, YU F P, WANG Y B. Preliminary study on the tagging techniques for the release and enhancement ofMiichthysmiiuy[J]. Marine Fisheries, 2007, 29(4): 344-348. 孫忠，余方平，王躍斌. 鮸魚增殖放流標(biāo)志技術(shù)的初步研究[J]. 海洋漁業(yè), 2007, 29(4): 344-348.

[12] LIU C L, CHEN S Q, HE L, et al. Effects of MS-222 as an anesthetic on adultCynoglossussemilaevisGünther [J]. Journal of Fishery Science of China, 2008, 28(1):92-100. 劉長(zhǎng)琳, 陳四清, 何力, 等. MS-222 對(duì)半滑舌鰨成魚的麻醉效果研究 [J]. 中國(guó)水產(chǎn)科學(xué), 2008, 28(1):92-100.

[13] WALDMAN J R, DUNNING D J, MATTSON M T. A morphological explanation for size-dependent anchor tag loss from striped bass [J]. Trans. Am. Fish. Soc., 1990, 119: 920-923.

[14] OTTER? H, KRISTIANSEN T S, SV?SAND T. Evaluation of anchor tags used in sea-ranching experiments with atlantic cod (GadusmorhuaL.) [J]. Fisheries Research, 1998, 35:237-246.

[15] DAVIS T L O, REID D D. Estimates of tag-shedding rates for Floy FT-2 dart and FD-67 anchor tags in barramundiLatescalcariferBloch [J]. Aust. J. Freshw. Res., 1982, 33: 1113-1117.

[16] MARTY G D, ROBERTS R J. The histopathology of salmon tagging: IV. The effect of severe exercise on the induced tagging lesion in salmon parr at two temperatures [J]. J. Fish Biol., 1976, 8: 289-292.

[17] BRATTEY J, CADIGAN N. Estimation of short-term tagging mortality of adult Atlantic cod (Gadusmorhua) [J]. Fish. Res., 2004, 66(2-3): 223-233.