獐牙菜苦苷的衍生化研究

黃飛燕，李干鵬，吳健君，唐榮平，張應(yīng)紅

（1.臨滄師范高等?？茖W(xué)校 人事處，云南 臨滄 677000；2.云南民族大學(xué) 化學(xué)與生物技術(shù)學(xué)院 民族藥資源化學(xué)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，云南 昆明 650500；3.臨滄市鎮(zhèn)康縣忙丙中學(xué)，云南 臨滄 677000）

獐牙菜苦苷屬于裂環(huán)烯醚萜類氧糖苷，是龍膽科獐牙菜屬植物中的主要有效成分之一［1］，獐牙菜苦苷為藥物前體，在體內(nèi)并不直接發(fā)揮藥效，其藥效的主體為經(jīng)葡萄糖苷酶水解后生成的苷元的進(jìn)一步代謝產(chǎn)物。經(jīng)研究，該化合物具有抗膽堿、解痙、鎮(zhèn)痛等作用［2］，日本學(xué)者在對(duì)獐牙菜苦苷的藥理研究中證實(shí)該化合物能擴(kuò)張毛細(xì)血管，激活和促進(jìn)皮膚細(xì)胞的酶系統(tǒng)，提高皮膚的生化功能，還可以治療脫發(fā)癥和用于皮膚美容劑，同時(shí)獐牙菜苦苷還具有抗癌作用。常軍，胡娜等［3］以獐牙菜苦苷為前體化合物，利用微生物細(xì)胞對(duì)獐牙菜苦苷進(jìn)行結(jié)構(gòu)修改，轉(zhuǎn)化得到紅百金花內(nèi)酯和（Z）-5-Ethylidene-8-hydroxy-3，4，5，6，7，8-hexahydro-1H—pyrano ［3，4-c］pyridine–1– one。有關(guān)獐芽菜苦苷化學(xué)轉(zhuǎn)化的研究未見報(bào)道，為研究獐牙菜苦苷的化學(xué)活性，對(duì)從西南獐芽菜中分離純化的獐牙菜苦苷進(jìn)行乙?；磻?yīng)，分別以乙酸酐及酰氯為反應(yīng)物在不同條件下對(duì)同獐牙菜苦苷進(jìn)行反應(yīng)，對(duì)反應(yīng)后的產(chǎn)物進(jìn)行分離提純及結(jié)構(gòu)鑒定，確定反應(yīng)主產(chǎn)物為2''，3''，4''，6''-四乙?；啦丝嘬?。

1 實(shí)驗(yàn)部分

1.1 材料與儀器

Agilent 1200型高效液相色譜，艾杰爾半制備 柱［Venusil XBP-C18（10×250 mm）］；VG Autospec-3000型質(zhì)譜儀；Bruker DRX-400型超導(dǎo)核磁共振儀，TMS為內(nèi)標(biāo)；MCI（Merck公司）；甲醇為工業(yè)純，重蒸，娃哈哈純凈水，酰氯、乙酸酐、吡啶等溶劑均為分析純；西南獐牙菜采自云南玉溪新平縣哀牢山，經(jīng)云南中醫(yī)學(xué)院楊禮攀博士鑒定為西南獐牙菜。

1.2 獐芽菜苦苷的分離鑒定

花期采集的西南獐牙菜全草在室內(nèi)陰干，稱重（4.5 kg）后粉碎至80目，用80 %的甲醇（料液比1∶2）加熱超聲提取，共8次，每次4 h，提取液過(guò)濾、濃縮后（甲醇回收）合并得棕色浸膏約880 g，加水至懸浮狀，用二氯甲烷多次萃取。水溶部分過(guò)MCI脫色（甲醇洗脫）后合并，再用打孔樹脂脫糖（甲醇∶水）洗脫，得到水部分156 g、甲醇∶水部分273 g、甲醇部分45 g；水部分及甲醇∶水部分分別用HPLC制備色譜進(jìn)行制備（溶劑為甲醇∶水為2∶3）分離得到的化合物經(jīng)核磁共振波譜分析及質(zhì)譜分析，與參考文獻(xiàn)對(duì)照后為獐芽菜苦苷，純度達(dá)到98%。

1.3 反應(yīng)和產(chǎn)物分離

獐牙菜苦苷與酰氯反應(yīng)：

獐牙菜苦苷與乙酸酐反應(yīng)：

筆者將反應(yīng)后的溶液倒入50 mL分液漏斗，加入10 mL純凈水，以氯仿為溶劑反復(fù)萃取5次，每次15 mL，合并氯仿；濃縮至20 mL，再用10 mL水進(jìn)行反萃??；濃縮得到油狀物，運(yùn)用安捷倫制備色譜，溶劑∶甲醇∶水、乙睛∶水，進(jìn)行純化。

2 結(jié)果與討論

2.1 結(jié)構(gòu)鑒定

產(chǎn)物 無(wú)色油狀，分子式為C25H32O13;1H-NMR（400MHz，CD3OD）：δH：1.68 （1H，d，J=14.0Hz，H-6a），1.80 （1H，dt，J=4.8，14.0Hz，H-6b），2.85 （1H，dd，J=1.2，8.8Hz，H-9），4.62 （1H，d，J=8.0Hz，H-1’），5.60 （1H，s，H-1），7.58 （1H，s，H-3）.13C-NMR（100MHz，CD3OD）：δC：99.1 （C-1），155.0（C-3），108.5（C-4），64.5（C-5），33.2（C-6），66.0 （C-7），133.8 （C-8），51.9 （C-9），122.1（C-10），168.0 （C-11），100.8 （C-1’），74.5 （C-2’），77.8 （C-3’），71.4 （C-4’），78.2 （C-5’），62.8 （C-6’），170.6 （C-2’’），171.0（C-3’’），170.0 （C-4’’），169.4 （C-6’’），20.8 （C-2’’’），20.6（C-3’’’），20.6 （C-4’’’），20.6 （C-6’’’）以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)［4］對(duì)照后，化合物1鑒定為2''，3''，4''，6''-四乙?；啦丝嘬?。

2.2 討論

獐牙菜屬植物種類數(shù)量很多，但列入藥典作為藥用和保健的品種很少，因此很有必要加大利用該屬植物資源的力度。本論文以西南獐牙菜為研究對(duì)象，對(duì)分離得到的獐牙菜苦苷進(jìn)行乙酰衍生化反應(yīng)，研究表明獐牙菜苦苷與乙酸酐、酰氯反應(yīng)均能得到產(chǎn)物2''，3''，4''，6''-四乙酰基-獐牙菜苦苷，反應(yīng)物結(jié)構(gòu)中-D-glc上的4個(gè)羥基上的氫都被乙酰基取代，雖然采用活性較強(qiáng)的酰氯，C-5上的羥基氫仍未被取代，原因可能是空間結(jié)構(gòu)導(dǎo)致C-5上的羥基穩(wěn)定性較好。反應(yīng)產(chǎn)物的活性及藥理作用如何，需要進(jìn)一步的探究。

［1］何廷農(nóng)，劉尚武，吳慶如.中國(guó)植物志（62卷）［M］.北京：科學(xué)出版社，1988：408.

［2］馬麗娜，田成旺，徐曉宏，等.獐牙菜屬植物中環(huán)烯醚萜類成分及其藥理作用研究進(jìn)展［J］.中草藥，2008（5）：790-795.

［3］常軍，胡娜，周斌.獐芽菜苦苷的生物轉(zhuǎn)化研究［J］.化學(xué)與生物工程，2011（1）：33-36.

［4］張建勝，王雪梅，董秀華，楊海英，李干鵬.川西獐牙菜化學(xué)成分研究［J］.中藥材，2009（4）：511-514.