川楝子不同炮制品鎮(zhèn)痛抗炎作用研究

李迎春，鄭蓓蓓

（河北北方學(xué)院中醫(yī)學(xué)院，河北 張家口 075000）

川楝子性味苦寒，有小毒，具疏肝泄熱、行氣止痛、驅(qū)蟲之功效，是理氣止痛常用的中藥［1－3］。歷代本草及現(xiàn)代研究均表明川楝子有毒，故多用其炮制品［4－5］。川楝子臨床常用的飲片有川楝子、炒川楝子等。川楝子生品長于殺蟲、療癬，兼能止痛。川楝子炒焦后可緩和苦寒之性，降低毒性，減少滑腸之弊，以疏肝理氣止痛力勝［6－8］。2010版 《中國藥典》僅收載有生川楝子和炒川楝子。本實(shí)驗(yàn)擬對川楝子生品和炒品的鎮(zhèn)痛、抗炎作用進(jìn)行探討，以期為川楝子臨床應(yīng)用提供科學(xué)理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)動物

昆明種小鼠260只，體質(zhì)量18～22g，由天津市山川紅實(shí)驗(yàn)動物科技有限公司提供，實(shí)驗(yàn)動物使用許可證號：SCXK （津）2009-0004。

1.2 藥物、試劑與儀器

川楝子：產(chǎn)自四川，購于天津市中藥飲片廠，經(jīng)本校中藥鑒定教研室趙恒成老師鑒定為楝科植物川楝（MeliatoosendanSied.Et Zucc）的成熟果實(shí)。阿司匹林：廣東百澳藥業(yè)有限公司 （批號20070305）；冰醋酸：天津市凱通化學(xué)試劑有限公司；生理鹽水：山東華魯制藥有限公司 （批號0100330）。直徑7mm的打孔器；YLS-6B智能熱板儀。

1.3 方法

1.3.1 炮制品的制備 炒川楝子：取凈川楝子，置熱鍋中，用中火炒至表面焦黃色，斷面色加深為度，取出，放涼。

1.3.2 藥液的制備 分別稱取川楝子生品及炒品適量，分別加水煎煮兩次，合并濾液，濃縮至所需濃度，備用。

1.3.3 生川楝子及炒川楝子對熱板所致小鼠疼痛反應(yīng)的影響 先用智能熱板測痛儀加熱到 （55±0.5）℃分別測定每只小鼠的正常痛閾值：從小鼠放于熱板上至出現(xiàn)舔后足的所需時(shí)間作為痛閾值 （s），連續(xù)2次，間隔30min，以2次痛閾值的平均值作為該小鼠給藥前的正常痛閾值。將舔后足時(shí)間小于5s或大于30s，或跳躍者棄之不用。取痛閾值篩選合格的雌性小鼠80只，（由100只小鼠篩選出合格動物80只，全部雌性），隨機(jī)分為8組，每組10只，分別灌胃生理鹽水 （20mL·kg－1）、阿司匹林 （0.1g·kg－1）、生川楝子和炒川楝子。每天1次，連續(xù)給藥5d，末次給藥后0.5、1、1.5、2h開始測定小鼠痛閾值。

1.3.4 生川楝子及炒川楝子對醋酸所致小鼠扭體反應(yīng)的影響 取昆明種小鼠80只，體質(zhì)量18～22g，雌雄各半，隨機(jī)分為8組，每組10只，分組及給藥方法同上。均于末次給藥后1h，各鼠腹腔注射1%冰醋酸溶液0.2mL／只，觀察并記錄注射冰醋酸溶液后5至15min內(nèi)出現(xiàn)扭體反應(yīng)的次數(shù)，計(jì)算鎮(zhèn)痛百分率。1.3.5 生川楝子及炒川楝子對二甲苯所致小鼠耳廓腫脹的影響 取昆明種小鼠小鼠80只，體質(zhì)量18～22g，雌雄各半，隨機(jī)分為8組，每組10只，分組及給藥方法同上。末次給藥后1.5h，于小鼠右耳兩面均勻涂二甲苯 （0.05mL／只）致腫，左耳不涂為正常耳。30min后脫頸椎處死，用直徑7mm打孔器沖下左耳及右耳同一部位的圓耳片，于電子天平上稱重，以右耳片質(zhì)量減去左耳片質(zhì)量的差值 （mg）作為炎癥腫脹度，計(jì)算炎癥抑制率 （%）。

2 結(jié) 果

2.1 生川楝子及炒川楝子對熱板對熱板所致小鼠疼痛反應(yīng)的影響

表1 川楝子生品及炒品對小鼠熱板法鎮(zhèn)痛作用的影響 （±s）

表1 川楝子生品及炒品對小鼠熱板法鎮(zhèn)痛作用的影響 （±s）

注：與空白對照組比較，＊P＜0.05，＊＊P＜0.01；與阿司匹林組比較＊P＜0.05，★★P＜0.01；炒品與生品比較，▲P＜0.05，▲▲P＜0.01

給藥后痛閾值 （s）0.5h 1h 1.5h 2h空白對照組 10 22.17±5.38 19.63±5.11 21.72±3.98 24.79±5組別 n 劑量（g·kg－1）給藥前痛閾值 （s）.97 29.45±4.87阿司匹林組 10 0.1 17.26±2.21 38.72±3.35＊＊ 38.82±8.32＊＊ 37.52±10.23＊＊ 46.31±5.38＊＊生川楝子10 10 43.16±5.88 48.24±8.12＊＊ 53.41±5.22＊＊ 43.84±9.12＊＊ 42.75±3.36＊＊＊10 20 22.42±2.14 31.32±6.12＊ 30.92±9.22＊ 35.58±4.27＊ 40.22±9.28＊10 40 27.28±5.85 44.42±6.12＊＊★★ 48.52±9.23＊＊★★ 49.48±12.18＊＊ 55.22±6.21＊＊＊＊炒川楝子10 10 21.23±6.62 28.52±11.24＊★★▲▲30.67±2.45＊＊★★▲▲ 33.12±6.23＊＊▲▲ 37.42±4.87＊＊＊10 20 21.56±8.29 33.62±11.62＊＊ 35.92±10.32＊＊ 35.42±9.82＊ 39.72±8.99＊＊＊10 40 26.82±4.87 55.92±6.98＊＊ 49.13±6.22＊＊ 46.82±6.12＊＊ 53.57±3.39＊＊

川楝子生品和炒品的各劑量組及阿司匹林組在給藥0.5～2h后與空白對照組比較差異有顯著性（P＜0.01或P＜0.05），均能明顯延遲小鼠的舔后足時(shí)間，提高小鼠痛閾值，有明顯鎮(zhèn)痛效果。其中川楝子炒品組同等劑量下痛閾值要大于生品組，經(jīng)比較差異有顯著性 （P＜0.05）。結(jié)果提示：川楝子炒品鎮(zhèn)痛作用強(qiáng)于生品，炮制后鎮(zhèn)痛作用增強(qiáng) （表1）。

2.2 生川楝子及炒川楝子對醋酸所致小鼠扭體反應(yīng)的影響

與空白對照組比較，阿司匹林組的鎮(zhèn)痛效果顯著，差異有顯著性 （P＜0.01）；川楝子生品和炒品各劑量均能明顯減少小鼠扭體次數(shù)，且隨劑量增加扭體次數(shù)明顯減少，對照組相比差異有顯著性（P＜0.01）。生品與炒品水提液在劑量相等的條件下比較，炒品的鎮(zhèn)痛作用明顯強(qiáng)于生品。結(jié)果提示：川楝子生品和炒品均有一定的鎮(zhèn)痛作用且炒炙川楝子較強(qiáng) （表2）。

表2 川楝子生品及炒品對醋酸扭體反應(yīng)的影響 （±s）

表2 川楝子生品及炒品對醋酸扭體反應(yīng)的影響 （±s）

注：與空白對照組比較，＊P＜0.05，＊＊P＜0.01；與阿司匹林組比較，＊P＜0.05，★★P＜0.01；炒品與生品組比較，▲P＜0.05，▲▲P＜0.01

組別 n 劑量（g·kg－1）扭體次數(shù)（次）扭體抑制率（%）10 28.85±10.14阿司匹林組10 0.1 3.25±1.75＊＊ 89.23空白對照組生川楝子10 10 20.32±1.68＊＊★★ 32.12 10 20 18.72±7.29＊＊★★ 37.29 10 40 8.72±3.11＊＊★★ 73.63炒川楝子82.63 10 10 19.12±2.66＊＊★★ 35.75 10 20 17.28±2.65＊＊★★ 46.38 10 40 4.62±2.59＊＊▲

2.3 生川楝子及炒川楝子對二甲苯所致小鼠耳廓腫脹的影響

與空白對照組比較，炒川楝子各劑量組和生川楝子中、高劑量組對二甲苯所致小鼠耳廓炎癥模型均具有顯著的抑制作用 （P＜0.05，P＜0.01），表明它們均具有顯著的抗炎作用，炒川楝子高劑量組明顯比較強(qiáng)。

表3 川楝子生品及炒品對小鼠二甲苯致炎的影響（±s）

表3 川楝子生品及炒品對小鼠二甲苯致炎的影響（±s）

注：與空白對照組比較，＊P＜0.05，＊＊P＜0.01；與阿司匹林組比較，＊P＜0.05，★★P＜0.01；炒品與生品組比較，▲P＜0.05，▲▲P＜0.01

組別 n 劑量（g·kg－1）耳腫脹度（mg）腫脹抑制率（%）空白對照組10 17.58±2.98阿司匹林組10 0.1 3.11±3.43＊＊ 80.23生川楝子10 10 13.34±6.21＊★★ 14.16 10 20 9.72±4.34＊★★ 36.45 10 40 9.05±2.90＊＊★★ 43.86炒川楝子10 10 12.03±1.34＊＊★★▲ 22.48 10 20 7.28±3.06＊＊★★ 49.89 10 40 5.62±3.56＊＊★★51.22

3 討 論

本實(shí)驗(yàn)采用熱刺激、化學(xué)刺激兩種實(shí)驗(yàn)方法，對川楝子生品及炒制品的鎮(zhèn)痛作用進(jìn)行研究，結(jié)果顯示川楝子使熱板刺激所致小鼠痛閾值提高，使腹腔注射醋酸所致小鼠扭體次數(shù)明顯減少，且炒制高、中劑量組的作用明顯優(yōu)于其他藥物組，初步表明川楝子有鎮(zhèn)痛作用，且炒制后作用增強(qiáng)，這與傳統(tǒng)的中醫(yī)理論認(rèn)為炒制后增強(qiáng)理氣止痛作用相吻合。同時(shí)，本實(shí)驗(yàn)表明川楝子在一定程度上能抑制二甲苯誘發(fā)的小鼠耳腫脹，表明川楝子對急性炎癥具有一定的抑制作用。

本實(shí)驗(yàn)表明川楝子生品及其炒制品對小鼠有鎮(zhèn)痛抗炎作用，為川楝子臨床應(yīng)用可提供一定藥理學(xué)參考。

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