2008-2012年上虞市高致病性禽流感免疫抗體水平檢測(cè)結(jié)果分析

， ，

(1.浙江大學(xué)動(dòng)物科學(xué)學(xué)院，浙江杭州 310058；2.上虞市畜牧獸醫(yī)局)

高致病性禽流感曾在世界各地流行，給養(yǎng)禽業(yè)帶來(lái)巨大的經(jīng)濟(jì)損失。目前，我國(guó)普遍采用強(qiáng)制免疫方式防控該病[1]。

為有效評(píng)估高致病性禽流感的免疫效果，筆者自2006年開(kāi)始參加實(shí)驗(yàn)室疫病防疫檢測(cè)工作?，F(xiàn)將2008-2012年上虞市高致病性禽流感免疫抗體水平檢測(cè)結(jié)果報(bào)告如下，以期評(píng)估近5年來(lái)該市高致病性禽流感的免疫防控工作情況，為更好地做好禽流感防控工作提供依據(jù)和參考。

1 材料與方法

1.1待檢血清 2008-2012年每月隨機(jī)采自不同鄉(xiāng)鎮(zhèn)養(yǎng)禽戶家禽血樣，其中養(yǎng)殖場(chǎng)戶(包括規(guī)模養(yǎng)殖場(chǎng)及散養(yǎng)戶)521家、家禽交易市場(chǎng)45批次，共計(jì)血清樣品5744份。其中2008年抽檢養(yǎng)殖場(chǎng)戶65家、家禽交易市場(chǎng)11批次，計(jì)血清樣品992份；2009年抽檢養(yǎng)殖場(chǎng)戶115家、家禽交易市場(chǎng)12批次，計(jì)血清樣品1521份；2010年抽檢養(yǎng)殖場(chǎng)戶104家、家禽交易市場(chǎng)10批次，計(jì)血清樣品1125份；2011年抽檢養(yǎng)殖場(chǎng)戶155家、家禽交易市場(chǎng)6批次，計(jì)血清樣品1302份；2012年抽檢養(yǎng)殖場(chǎng)戶82家、家禽交易市場(chǎng)6批次，計(jì)血清樣品804份(詳見(jiàn)表1)。

1.2檢測(cè)試劑 高致病性禽流感血凝(HA)試驗(yàn)和血凝抑制(HI)試驗(yàn)抗原、陽(yáng)性血清、陰性血清均由哈爾濱維科生物有限公司生產(chǎn)，由浙江省畜牧獸醫(yī)局實(shí)驗(yàn)室提供，樣品稀釋液及紅細(xì)胞懸液自行配制。

1.3檢測(cè)方法 依據(jù)國(guó)家《高致病性禽流感診斷技術(shù)》(GB/T 18936-2003)標(biāo)準(zhǔn)，采用血凝(HA)試驗(yàn)和血凝抑制(HI)試驗(yàn)，對(duì)血清樣品進(jìn)行高致病性禽流感抗體效價(jià)檢測(cè)[2，3]。

表1 2008-2012年上虞市家禽高致病性禽流感免疫抗體檢測(cè)數(shù)

由于高致病性禽流感毒株變異，所以采用疫苗種類也有不斷變化，2009年前多使用高致病性禽流感H5N1亞型Re-5株單苗，2009年開(kāi)始使用H5N1亞型Re-4和Re-5株雙價(jià)苗，2012年6月起，國(guó)家有關(guān)部門(mén)決定又將Re-5株和rLh-5株分別更換為Re-6株和rLh5-6株。上虞市自2012年底開(kāi)始多使用高致病性禽流感H5N1亞型Re-6株單苗進(jìn)行免疫接種。本次2008-2012年的高致病性禽流感免疫抗體檢測(cè)結(jié)果以H5N1亞型Re-5株免疫抗體水平為主。

1.4結(jié)果判定 按照農(nóng)業(yè)部標(biāo)準(zhǔn)，以紅細(xì)胞均勻分散在孔底周圍，傾斜血凝板時(shí)不流淌判為完全凝集，紅細(xì)胞集中在孔底中央呈圓點(diǎn)，傾斜血凝板時(shí)流淌判定為不凝集或血凝抑制。檢查各種對(duì)照，陰性血清滴度≤22(1∶4)，陽(yáng)性血清誤差不超過(guò)1個(gè)滴度，紅細(xì)胞對(duì)照無(wú)自凝現(xiàn)象，試驗(yàn)成立，進(jìn)行結(jié)果判定。能完全抑制4HAU抗原的血清最高稀釋度判為該血清的血凝抑制滴度。血清的血凝抑制滴度≥24(1∶16)，判為免疫合格，否則判為免疫不合格。禽群免疫抗體合格率≥70%判為免疫合格。

2 檢測(cè)結(jié)果

2.1總體檢測(cè)結(jié)果 詳見(jiàn)表2。

表2 2008-2012年家禽高致病性禽流感免疫抗體合格率統(tǒng)計(jì)

由表2可知，2008年檢測(cè)養(yǎng)殖場(chǎng)戶65家，血樣792份，家禽交易市場(chǎng)11家，血樣200份，共992份，免疫合格821份，合格率82.8%。2009年檢測(cè)養(yǎng)殖場(chǎng)戶115家，血樣1274份，家禽交易市場(chǎng)12家，血樣247份，共1521份，免疫合格1289份，合格率84.7%。2010年檢測(cè)養(yǎng)殖場(chǎng)戶104家，血樣943份，家禽交易市場(chǎng)10家，血樣182份，共1125份，免疫合格917份，合格率81.5%。2011年檢測(cè)養(yǎng)殖場(chǎng)戶155家，血樣1198份，家禽交易市場(chǎng)6家，血樣104份，共1302份，免疫合格1141份，合格率87.6%。2012年檢測(cè)養(yǎng)殖場(chǎng)戶82家，血樣755份，家禽交易市場(chǎng)6家，血樣49份，共804份，免疫合格710份，合格率88.3%。

從總體檢測(cè)情況看，2008-2012年上虞市高致病性禽流感免疫抗體水平檢測(cè)合格率達(dá)84.9%，超過(guò)國(guó)家規(guī)定免疫合格率70%的標(biāo)準(zhǔn)，尤以養(yǎng)殖場(chǎng)戶免疫抗體水平合格率較高，達(dá)91.8%。但家禽交易市場(chǎng)合格率較低，僅為41.6%。究其原因，由于外來(lái)交易家禽比例較大，各地免疫水平參差不一，有關(guān)管理部門(mén)應(yīng)加大監(jiān)管力度。

2.2不同疫苗來(lái)源的免疫效果檢測(cè) 詳見(jiàn)表3、表4、表5、表6。

表3 江蘇南京某公司生產(chǎn)疫苗的免疫效果觀察

表4 黑龍江哈爾濱某公司生產(chǎn)疫苗的免疫效果觀察

表5 山東青島某公司生產(chǎn)疫苗的免疫效果觀察

表6 河南鄭州某公司生產(chǎn)疫苗的免疫效果觀察

2008-2012年上虞市家禽養(yǎng)殖場(chǎng)(戶)采用的高致病性禽流感免疫疫苗主要來(lái)自江蘇南京、黑龍江哈爾濱、山東青島和河南鄭州等公司。由表3、表4、表5和表6可知，4家疫苗廠家所生產(chǎn)的高致病性禽流感疫苗的免疫效果均比較理想，合格率都在84%以上，達(dá)到國(guó)家規(guī)定的免疫合格率標(biāo)準(zhǔn)。

3 小結(jié)與討論

2008-2012年上虞市高致病性禽流感H5N1亞型免疫抗體檢測(cè)結(jié)果表明，規(guī)模養(yǎng)殖場(chǎng)戶和散養(yǎng)戶免疫效果較好，合格率均在90%以上，惟家禽交易市場(chǎng)采集樣品檢測(cè)合格率較低，僅為41.6%(合格率最低為33.0%，最高僅55.8%)。有關(guān)管理部門(mén)應(yīng)加強(qiáng)監(jiān)管力度。對(duì)4家不同廠家生產(chǎn)的高致病性禽流感H5亞型疫苗免疫效果檢測(cè)結(jié)果較為理想，免疫合格率均在84.9%以上，超過(guò)國(guó)家規(guī)定的合格率標(biāo)準(zhǔn)。

隨著養(yǎng)禽業(yè)的快速發(fā)展，高致病性禽流感毒株不斷發(fā)生變異，H7N9禽流感病毒危害人畜健康事件已向人們敲響了警鐘：市場(chǎng)流通環(huán)節(jié)必須加強(qiáng)監(jiān)管，消毒工作必須常抓不懈[4，5]。家禽交易市場(chǎng)流通性較大，必須采取綜合防控措施。

一是必須制定較為嚴(yán)格的市場(chǎng)準(zhǔn)入制度，嚴(yán)把交易活禽來(lái)源關(guān)，禁止無(wú)證活禽流入市場(chǎng)。

二是嚴(yán)格做好市場(chǎng)流通家禽的登記工作，真正做到餐桌之上的家禽也能進(jìn)行追溯。

三是畜禽交易場(chǎng)所應(yīng)定期進(jìn)行嚴(yán)格消毒，保持市場(chǎng)環(huán)境整潔。

四是加強(qiáng)市場(chǎng)交易家禽的科學(xué)管理，提高交易市場(chǎng)家禽的健康水平。

五是對(duì)進(jìn)入市場(chǎng)后死亡的家禽應(yīng)嚴(yán)格做好無(wú)害化處理工作，嚴(yán)禁進(jìn)行宰殺買(mǎi)賣(mài)。

六是有關(guān)部門(mén)應(yīng)不定期進(jìn)行免疫抗體檢測(cè)以評(píng)估流通家禽免疫保護(hù)力度等。

生產(chǎn)實(shí)踐表明，只有真正做好綜合防控措施，才能較為安全地進(jìn)行活禽交易。

[1] 甘孟侯.禽流感(第二版)[M].北京:中國(guó)農(nóng)業(yè)出版社,2002:[8].

[2] 張根祥,劉曉瑛,戚一鳴,等.余姚市高致病性禽流感免疫抗體的檢測(cè)與分析[J].浙江畜牧獸醫(yī),2009,34(3):28.

[3] 費(fèi)強(qiáng),韓曉堂.血凝抑制試驗(yàn)的質(zhì)量控制[J].家禽科學(xué),2012(5):41-42.

[4] 劉忠琛,逢金良,劉寶大.非疫苗因素對(duì)雞免疫效果的影響[J].湖北畜牧獸醫(yī),2000(2):32.

[5] 池建峰.影響禽流感免疫效果的因素分析[J].湖北畜牧獸醫(yī),2012(5):35-36.