魚腥草種子形態(tài)及萌發(fā)特性初步研究

楊梅，李敏，卿光明，何剛，王興貴，楊行軍，葛亞風(fēng)

魚腥草為三白草科植物蕺菜Houttuynia cordata Thunb.的新鮮全草或干燥地上部分[1]， 原名“蕺”，始載于《名醫(yī)別錄》，列為下品。別名有岑草、俎菜、臭豬巢、臭腥草、側(cè)耳根、豬鼻孔、九節(jié)蓮等。分布于陜西、甘肅及長(zhǎng)江流域以南各地[2]，尤以浙江蓬都、青田、松陽，江西永豐，貴州安順、貴陽，福建沙縣，云南會(huì)澤，河南正陽，湖南長(zhǎng)沙，廣西柳州，四川西昌、雅安、德陽，重慶，安徽績(jī)溪等地最為適宜[3,4]。具有清熱解毒，消癰排膿，利尿通淋的功效，臨床用于肺癰吐膿，痰熱喘咳，熱痢，熱淋，癰腫瘡毒等病癥。

《中華本草》中記載[2]：“魚腥草果實(shí)為蒴果，卵圓形，具宿存花柱；種子多數(shù)，卵形。魚腥草種子發(fā)芽率不高，發(fā)芽適宜溫度為17～25℃變溫，發(fā)芽率為20%左右?！蹦壳皩?duì)魚腥草藥材的研究主要集中在化學(xué)成分、藥理作用、種質(zhì)資源及栽培技術(shù)等方面，而對(duì)魚腥草種子的形態(tài)及萌發(fā)特性的研究未見報(bào)道。

1 材料與儀器

1.1 實(shí)驗(yàn)材料

從四川、貴州、云南等5省收集魚腥草種子樣品共計(jì)10份。詳見表1。

表1 魚腥草種子樣品來源

1.2 實(shí)驗(yàn)儀器

微型生化培養(yǎng)箱SPX-250B(上海悅豐儀器表有限公司）；解剖顯微鏡(ZEISS Stemi 2000-C）；電子分析天平BP121S(北京Sartorius天平有限公司）；鑷子；培養(yǎng)皿；濾紙等。

2 實(shí)驗(yàn)方法與結(jié)果

2.1 種子形態(tài)觀察

采用肉眼和解剖顯微鏡觀察果實(shí)、種子外觀形態(tài)。魚腥草果實(shí)為蒴果，卵圓形，黃綠色，頂端開裂，具宿存花柱；種子多數(shù)，卵形，表面具方格網(wǎng)紋，黃棕色至紅棕色，具特異芳香氣。如圖1～4。

圖1 魚腥草果穗

圖2 魚腥草果實(shí)

圖3 ～4 魚腥草種子

2.2 種子千粒重測(cè)定

選擇千粒法測(cè)定。先將樣品充分混合，從中隨機(jī)取3份，每份1000粒，稱重，精確到0.00001g，取其平均值，即種子的千粒重[5~6]。采用spss18.0統(tǒng)計(jì)分析軟件，對(duì)種子千粒重進(jìn)行單因素兩兩比較[7]。結(jié)果見表2。結(jié)果：由表2可知，YXC-8的千粒重最重（62.69 mg），YXC-5的千粒重最輕（38.17 mg）。由上可知，魚腥草種子極小，平均千粒重為49.19 mg。

表2 魚腥草種子千粒重比較（n=3）

2.3 種子發(fā)芽實(shí)驗(yàn)

2.3.1 光照條件的考察 取YXC-4魚腥草種子樣品，置于鋪有兩層濾紙直徑為9 cm的培養(yǎng)皿中，分別于25 ℃的黑暗與光照條件下進(jìn)行培養(yǎng)，三次重復(fù)，每次重復(fù)50粒種子，保持濾紙濕潤(rùn)，每天觀察并記錄種子萌發(fā)情況，待種子萌發(fā)達(dá)到最高時(shí)，以后再無萌發(fā)種子出現(xiàn)時(shí)的天數(shù)為末次計(jì)數(shù)時(shí)間，計(jì)算種子發(fā)芽率[8]。結(jié)果見表3。

表3 光照條件初步考察結(jié)果

結(jié)果：魚腥草種子開始萌發(fā)時(shí)所需時(shí)間為8天，光照條件對(duì)魚腥草種子的萌發(fā)具有明顯的影響，黑暗條件下，魚腥草種子不發(fā)芽。

2.3.2 種子萌發(fā)實(shí)驗(yàn) 將魚腥草種子置于鋪有兩層濾紙直徑為9 cm的培養(yǎng)皿中，在25 ℃恒溫光照條件下培養(yǎng)，3次重復(fù)，每次重復(fù)50粒。每天觀察并記錄種子萌發(fā)情況，待種子萌發(fā)達(dá)到最高時(shí)，以后再無萌發(fā)種子出現(xiàn)時(shí)的天數(shù)為末次計(jì)數(shù)時(shí)間[8]，計(jì)算種子發(fā)芽率。結(jié)果見表4。并采用解剖顯微鏡觀察魚腥草種子萌發(fā)不同階段的形態(tài)（如圖5～12）。

發(fā)芽率 = 最終種子發(fā)芽數(shù)/供試種子數(shù)×100%

發(fā)芽勢(shì) = 規(guī)定時(shí)間內(nèi)種子發(fā)芽數(shù)/供試種子數(shù)×100%（本實(shí)驗(yàn)以第17 d作為計(jì)算發(fā)芽勢(shì)的時(shí)間）

發(fā)芽指數(shù)（GI）= ∑（Gt/Dt ）（Gt為在t天的種子發(fā)芽數(shù)，Dt為相對(duì)應(yīng)的種子發(fā)芽天數(shù)）[5]

表4 不同產(chǎn)地魚腥草種子的發(fā)芽情況

圖5 (1-9天，吸脹階段)

圖6 (8-11天，胚根突破種皮)

圖7 （10-13天，根莖迅速生長(zhǎng)）

圖8（12-15天，開始生長(zhǎng)須根，胚芽發(fā)育成兩片嫩葉）

圖9 （14-18天，胚芽發(fā)育成的嫩葉見光變綠）

圖10（17-22天，種皮脫落）

圖11 （21-24天，胚芽逐漸發(fā)育成莖和葉） 圖12（24-25天，根系更發(fā)達(dá)）圖5～12 魚腥草種子不同萌發(fā)階段

3 結(jié)論與討論

3.1 通過本實(shí)驗(yàn)可知，魚腥草種子為光敏感種子，即光照是該種子發(fā)芽的基本條件。這種現(xiàn)象在我國(guó)現(xiàn)知的三白草科（Saururaceae）4種植物中均未見報(bào)道。但究竟光照時(shí)間和光照強(qiáng)度是如何影響魚腥草種子發(fā)芽，何種光照條件最適合魚腥草種子萌發(fā)尚在研究中。

3.2 千粒重表示的是一千粒種子的重量，它是體現(xiàn)種子成熟度及飽滿程度的一項(xiàng)指標(biāo)[9]，千粒重越重，飽滿種子占供試樣品質(zhì)量的百分率越高，種子品質(zhì)越好。魚腥草種子極小，其中YXC-8的千粒重為62.69 mg，YXC-5的千粒重38.17 mg。平均千粒重為49.19 mg。其種子千粒重大小是否與魚腥草的種質(zhì)資源、生長(zhǎng)環(huán)境等不同有關(guān)，尚需更深入的研究。

3.3 YXC-5樣品的千粒重最小，其外觀形態(tài)為卵形，淺黃色，且種子的發(fā)芽率為0，可能是因?yàn)榉N子還未成熟。

3.4 實(shí)驗(yàn)過程中觀察到Y(jié)XC-6樣品霉變較多，對(duì)比其他樣品貯藏方式及試驗(yàn)結(jié)果表明，YXC-6樣品在收集之前已被病菌感染，導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)過程中霉變嚴(yán)重，影響到種子的發(fā)芽率。

3.5 一般而言，某些種子隨著貯藏時(shí)間的延長(zhǎng)，種子的活力降低，種子的發(fā)芽勢(shì)也降低，但種子的發(fā)芽率不一定降低。通過本實(shí)驗(yàn)可知，其中YXC-1、YXC-8、YXC-9的發(fā)芽率高，但其發(fā)芽勢(shì)較低，這可能與種子的貯藏年限有關(guān)。貯藏時(shí)間與貯藏條件對(duì)魚腥草種子活力的影響以及何種條件最適合魚腥草種子的貯藏尚在研究中。

目前，魚腥草的繁殖方式為種莖繁殖，但是魚腥草種子實(shí)驗(yàn)證明其發(fā)芽率高，60%的樣品發(fā)芽率超過70%，遠(yuǎn)遠(yuǎn)超出《中華本草》記載魚腥草種子發(fā)芽率為20%左右的報(bào)道，究竟在生產(chǎn)中能否采用種子繁殖，有待進(jìn)一步通過出苗率等實(shí)驗(yàn)探索魚腥草種子在自然條件下的發(fā)芽能力。通過該研究，不僅可以了解魚腥草的種子特性，還為后續(xù)進(jìn)行魚腥草藥材的種質(zhì)保存、育種等研究奠定基礎(chǔ)。

[1] 國(guó)家藥典委員會(huì).中國(guó)藥典2010年版I部[S].北京:中國(guó)醫(yī)藥科技出版社,2010:208.

[2] 國(guó)家中醫(yī)藥管理局.《中華本草》編委會(huì).中華本草.上海:上海科學(xué)技術(shù)出版社,1999.

[3] 葉榮華,藍(lán)云龍,施林妹,等.魚腥草種源試驗(yàn)初報(bào)[J].浙江林業(yè)科技,2008,2(28):34.

[4] 楊健,郭書臺(tái),楊學(xué)禮,等.不同產(chǎn)地魚腥草質(zhì)量評(píng)價(jià)[J].現(xiàn)代中醫(yī)藥,2007, 6(27):62.

[5] 國(guó)際種子檢驗(yàn)協(xié)會(huì).顏啟傳,畢辛華(譯).國(guó)際種子檢驗(yàn)規(guī)程[S].北京:農(nóng)業(yè)出版社,1985.

[6] 盧魏魏,朱再標(biāo),郭巧生,等.白花蛇舌草種子質(zhì)量分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)研究[J].中國(guó)中藥雜志,2012,37(1):1743.

[7] 郭巧生,張賢秀,王艷茹,等.夏枯草種子品質(zhì)檢驗(yàn)及質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)初步研究[J].中國(guó)中藥雜志,2009,34(7):812.

[8] 李衛(wèi)東.益母草種子發(fā)芽和生活力檢驗(yàn)方法的研究[J].中國(guó)現(xiàn)代中藥,2010,11(12):15.

[9] 賀玉林,李先恩,淡紅梅,等.遠(yuǎn)志種子質(zhì)量分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)研究[J].種子,2007,26(1):106.