高效液相色譜技術(shù)在藥品檢驗(yàn)中的應(yīng)用

閆錦鳳

摘要：目前高效液相色譜技術(shù)在藥品檢驗(yàn)中廣泛的應(yīng)用，該技術(shù)對藥品質(zhì)量的檢測起了重要作用。該技術(shù)主要在藥物有效成分鑒別、藥物中相關(guān)物質(zhì)的檢測、藥物中有效成分的含量測定等方面應(yīng)用。作為一名藥品檢驗(yàn)人員，應(yīng)該利用好高效液相色譜技術(shù)，保證檢測準(zhǔn)確度，提高檢測效率，嚴(yán)把藥品質(zhì)量。

關(guān)鍵詞：高效液相色譜;藥品檢測;相關(guān)物質(zhì);靈敏度

隨著我國國民經(jīng)濟(jì)的快速發(fā)展，物質(zhì)生活水平的不斷提高，民眾對醫(yī)療水平要求也在不斷提高，這促使民眾對藥品的質(zhì)量更加嚴(yán)格。高質(zhì)量的藥品離不開先進(jìn)的檢測手段，目前藥品質(zhì)量檢測技術(shù)種類較多，其中應(yīng)用最為廣泛和成熟的檢測技術(shù)就是高效液相色譜技術(shù)（High Performance Liquid Chromatography / HPLC）。該技術(shù)具有高壓、高速、高效、高靈敏度、應(yīng)用范圍廣的特點(diǎn)，被廣泛應(yīng)用藥品質(zhì)量檢測中。具體體現(xiàn)在以下幾方面：

一、藥物有效成分鑒別的應(yīng)用

目前高效液相色譜技術(shù)是較為有效的藥物鑒別技術(shù)。該技術(shù)中，其中一個(gè)很重要的技術(shù)參數(shù)——保留時(shí)間，即在流動(dòng)相和色譜柱確定的條件下，每種物質(zhì)或藥品具有其獨(dú)特的保留時(shí)間，不同的物質(zhì)其保留時(shí)間是不一樣的。根據(jù)保留時(shí)間這一屬性，我們首先可以在藥典中查到某一藥品的保留時(shí)間，或者可以通過標(biāo)準(zhǔn)品來確定該物質(zhì)的保留時(shí)間，然后我們對要鑒別的藥物進(jìn)行液相檢測，根據(jù)檢測得到保留時(shí)間來判斷該物質(zhì)是不是目的物質(zhì)，從而達(dá)到鑒別的目的。[1]

二、藥物中相關(guān)物質(zhì)的檢測

不管在化藥、中藥還是生物藥中均存在相關(guān)物質(zhì)，如何確定相關(guān)物質(zhì)，如何定量，一直是藥品檢測中的一個(gè)難點(diǎn)。但液相色譜可以這一難題，可以根據(jù)相關(guān)物質(zhì)與藥物有效成分的差異性，選擇合適的色譜柱。目前色譜柱有排阻類型的（根據(jù)物質(zhì)大小進(jìn)行分離的），反相性的（根據(jù)物質(zhì)的疏水性強(qiáng)弱進(jìn)行分離的），離子型的（根據(jù)物質(zhì)所帶的陰陽離子電荷和電荷強(qiáng)弱）。色譜柱的上述特點(diǎn)確立了高效液相色譜在相關(guān)物質(zhì)檢測方面的靈活性和優(yōu)勢性。[2]

三、藥物中有效成分含量的測定

高效液相色譜經(jīng)歷了100多年的發(fā)展后，目前在高效液相色譜系統(tǒng)具有可以自動(dòng)上樣，批量處理，處理量大，減少人為的操作，重復(fù)性好，精確度高等特點(diǎn)。眾所周知，中藥在所有藥品中，成分最為復(fù)雜，有效成分較多，各組分之前的比例往往影響著藥效。與一些其他的傳統(tǒng)檢測手段相比，有的技術(shù)不能進(jìn)行多組分檢測，有的技術(shù)不能進(jìn)行定量測定，而高效液相色譜技術(shù)實(shí)現(xiàn)了藥物中多組分的分離和定量。所以在高效液相色譜的協(xié)助下，藥品檢驗(yàn)人員可以對中藥中的有效組分進(jìn)行分離鑒別，并對各組分的含量進(jìn)行確認(rèn)。該技術(shù)在中藥質(zhì)量檢測中的應(yīng)用，不僅保證了中藥的質(zhì)量和藥效，同時(shí)對我國中藥事業(yè)的發(fā)展起到了推動(dòng)作用，使中藥走向世界。[3]

四、生物藥成分的檢測

隨著近幾十年生物技術(shù)的發(fā)展，市場上生物藥種類越來越多，生物藥日益受到患者和醫(yī)生的追捧，究其原因是：生物藥其靶向性強(qiáng)，效果好，尤其是近幾年上市的抗體類藥物。但是生物藥與傳統(tǒng)的化藥相比，其分子量大，高級結(jié)構(gòu)復(fù)雜，易變性失活等特點(diǎn)，這對生物藥的質(zhì)量要求尤為重要。高效液相色譜不僅在傳統(tǒng)的化藥純度檢測中發(fā)揮著重要作用，在生物藥新領(lǐng)域中仍發(fā)揮著不可替代的作用，目前生物藥被放行前，均要經(jīng)過高效液相色譜的檢測，通過查詢相關(guān)藥典，該技術(shù)有在純度方面的檢測要求，也有在相關(guān)雜質(zhì)方面的檢測要求。

五、手性藥物的檢測

高效液相色譜技術(shù)除了在藥品檢測中發(fā)揮著上述作用。還在難度較大的手性藥物檢測中發(fā)揮著作用。眾所周知，手性藥物與其相對應(yīng)的映體在物理和化學(xué)性質(zhì)方面存在著高度的一致性，給分離和鑒別造成很大的挑戰(zhàn)。而目前高效液相色譜技術(shù)由于其高靈敏性，可以無需衍生化就能對手性藥物進(jìn)行分析和檢測。而對于較難分離的手性藥物，可以先進(jìn)行衍生化反應(yīng)，形成一個(gè)非對映異構(gòu)分子，然后再進(jìn)行分離檢測。

六、高效液相色譜新技術(shù)的發(fā)展

隨著近幾十年科學(xué)技術(shù)突飛猛進(jìn)的發(fā)展，藥品檢測領(lǐng)域也出現(xiàn)了一些新技術(shù)，這些技術(shù)與高效液相色譜技術(shù)相結(jié)合，誕生了許多新的綜合技術(shù)。這些新的技術(shù)，不僅使分離檢測更加準(zhǔn)確，靈敏度更高，而且大大的縮短了檢測時(shí)間。目前有：高效液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)、高效液相色譜法-蒸發(fā)光檢測技術(shù)、快速高效液相色譜技術(shù)等。

高效液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)，（liquid Chromatograph Mass Spectrometer），簡稱LC-MS，它結(jié)合了液相色譜儀具有有效分離熱不穩(wěn)性和高沸點(diǎn)化合物的分離能力和質(zhì)譜儀很強(qiáng)的組分鑒定能力，將這兩種能力的完美結(jié)合，實(shí)現(xiàn)了對復(fù)雜有機(jī)混合物的高效分離分析。高效液相色譜法-蒸發(fā)光檢測技術(shù)（High-performance liquid chromatography with evaporative light-scatter），簡稱：HPLC-ELSD，它實(shí)現(xiàn)了液相色譜儀的分離物質(zhì)能力與ELSD在檢測不含發(fā)色團(tuán)的化合物的能力的完美結(jié)合，不再限于檢測含發(fā)色團(tuán)的化合物范圍，拓寬了HPLC-ELSD的應(yīng)用范圍。快速高效液相色譜技術(shù)是在傳統(tǒng)高效液相色譜技術(shù)基礎(chǔ)上進(jìn)行了升級和改造，主要優(yōu)化了色譜參數(shù)，增加了柱效，采用耐高壓的柱子等等，從而提高高效液相色譜分析的效率，降低使用時(shí)間，減少可能潛在污染的風(fēng)險(xiǎn)。

七、結(jié)語

目前高效液相色譜技術(shù)已被廣泛應(yīng)用到藥品檢驗(yàn)工作中，該技術(shù)不僅給醫(yī)藥研發(fā)人員提供了有效的檢測手段，同時(shí)在藥品質(zhì)量放行方面也發(fā)揮著重要作用。作為一名藥品檢測人員，我們應(yīng)該充分利用好高效液相色譜技術(shù)，發(fā)揮它在藥品檢測中的優(yōu)勢，同時(shí)我們要及時(shí)學(xué)習(xí)新的技術(shù)，為藥品的研發(fā)和生產(chǎn)提供保證，為我國的醫(yī)藥事業(yè)發(fā)展做出我們的貢獻(xiàn)。

參考文獻(xiàn)：

[1]張良曉.高效液相色譜在藥物分析中的應(yīng)用研究進(jìn)展[J].內(nèi)蒙古石油化工，2005（7）：3-5.

[2]鄭勤琴，項(xiàng)勛，段綱，等.高效液相色譜和超高效液相色譜在藥物分析中的應(yīng)用研究[J].上海畜牧獸醫(yī)通訊，2017（2）：57-59.

[3]劉瑩，周建良，李萍.快速高效相色譜分離技術(shù)在中藥分析中的應(yīng)用[J].色譜，2009，27（5）：682-689.