旨可平軟膠囊工藝改進(jìn)前后調(diào)血脂藥效對(duì)比研究

劉鐵軍，陳 鐘，姜國(guó)志，孫勝斌，張巖巖，屈會(huì)化

(1.神威藥業(yè)有限公司，河北 石家莊 051430; 2.北京中醫(yī)藥大學(xué)，北京 100029)

旨可平軟膠囊是神威藥業(yè)有限公司自主研發(fā)的一種新藥，主要成分為姜黃提取物，有活血行氣、降脂祛濁之效，用于高脂血癥屬血瘀氣滯證者，癥見胸脅脹痛、心前區(qū)刺痛、胸悶、舌尖邊有瘀點(diǎn)或瘀斑、脈弦或澀。為使藥物得到更有效的利用，公司對(duì)工藝進(jìn)行了改進(jìn)。現(xiàn)通過(guò)建立大鼠高脂模型，以總膽固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白(HDL)、低密度脂蛋白(LDL)為指標(biāo)，對(duì)工藝改進(jìn)前后旨可平軟膠囊調(diào)血脂作用進(jìn)行研究。

1 材料與方法

1.1 儀器與試藥、動(dòng)物

Beckman Coulter Synchron Clinical System CX4PRO型全自動(dòng)生化分析儀。膽固醇試劑盒(北京利德曼生化技術(shù)有限公司，京藥監(jiān)械(準(zhǔn))字2009第2400149號(hào)，批號(hào)為905041D);甘油三酯試劑盒(北京利德曼生化技術(shù)有限公司，京藥監(jiān)械(準(zhǔn))字2009第2400137號(hào)，批號(hào)為905081D);低密度脂蛋白試劑盒(北京利德曼生化技術(shù)有限公司，京藥監(jiān)械(準(zhǔn))字2009第2400122號(hào)，批號(hào)為904221C);高密度脂蛋白試劑盒(北京利德曼生化技術(shù)有限公司，京藥監(jiān)械(準(zhǔn))字2009第2400168號(hào)，批號(hào)為906031E)。

清潔級(jí)Sprague－Dawley大鼠88只，雌雄各半，體重(220±20)g，購(gòu)于北京維通利華實(shí)驗(yàn)動(dòng)物技術(shù)有限公司，動(dòng)物購(gòu)回后于北京中醫(yī)藥大學(xué)中心動(dòng)物室處飼養(yǎng)，11只/籠，自由飲水(晝夜比12∶12，室溫22℃，相對(duì)濕度65%)。大鼠基礎(chǔ)飼料飼養(yǎng)1周后開始用大鼠高脂飼料喂養(yǎng)。

1.2 方法[1]

高脂模型制備:高脂飼料配方為基礎(chǔ)飼料粉68.3%(北京維通利華實(shí)驗(yàn)動(dòng)物技術(shù)有限公司)，豬油10%(北京丁丁立科貿(mào)有限公司楓葉牌)，蛋黃粉10%(北京金健力蛋粉廠)，蔗糖10%(北京市糖業(yè)煙酒公司)，膽固醇1%(安徽天啟化工科技有限公司)，膽酸鈉0.5%(上海藍(lán)季科技發(fā)展有限公司)，丙基硫氧嘧啶0.2%(上海藍(lán)季科技發(fā)展有限公司)。將以上原料加水?dāng)嚢柚瞥蓤A柱狀飼料，并微波加熱干燥成形，使其硬度分別滿足大鼠飼養(yǎng)需要。高脂飼料喂養(yǎng)45 d后抽血測(cè)血脂，血脂達(dá)標(biāo)(TC≥10 mmol/L)后隨機(jī)分組進(jìn)行治療給藥，不達(dá)標(biāo)者淘汰。

動(dòng)物分組:陰性對(duì)照組(A組，普通飼料喂養(yǎng));血脂達(dá)標(biāo)模型隨機(jī)分為7組，模型對(duì)照組(B組)、旨可平工藝改進(jìn)前和工藝改進(jìn)后各設(shè)高、中、低3個(gè)劑量組，即旨可平Ⅰ低劑量組(J1－L)，旨可平Ⅰ中劑量組(J1－M)、旨可平Ⅰ高劑量組(J1－H)，旨可平Ⅱ低劑量組(J2－L)，旨可平Ⅱ中劑量組(J2－M)，旨可平Ⅱ高劑量組(J2－H)。

藥品劑量設(shè)置與給藥:旨可平軟膠囊廠家提供的人用量為100 mg，3次/天，人按 60 kg體重計(jì)算，劑量為 5 mg/kg，人 －大鼠劑量換算系數(shù) =6.25。大鼠等效劑量為 5 ×6.25=31.25 mg/kg，將低、中、高劑量分別設(shè)為 30，100，300 mg/kg，以 0.5% 羧甲基維素納(CMC－Na)配制成均勻混懸液備用。采取灌胃給藥，所有受試藥物按照等容積不等濃度配制，容積為5 mL/kg，在檢測(cè)血脂達(dá)標(biāo)后繼續(xù)高脂飼料的同時(shí)開始給藥治療，持續(xù)15 d。

樣本采集:采血前8 h大鼠禁食，大鼠心臟采血1.5 mL，3 000 r/min×10 min離心，取血清測(cè)量用藥前后血脂水平。包括總膽固醇、甘油三酯、高密度脂蛋白、低密度脂蛋白。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

采用雙樣本等方差組間t檢驗(yàn)，用成對(duì)t檢驗(yàn)進(jìn)行治療前后比較。以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

結(jié)果見表1及圖1至圖4。

表1 各組大鼠血脂指標(biāo)的影響(± s，mmol/L)

表1 各組大鼠血脂指標(biāo)的影響(± s，mmol/L)

注:與 B 組比較，▲P ＜0.01，與同劑量旨可平Ⅰ比較，□P ＜0.05，■P ＜0.01。下圖同。

組別A(n=11)B(n=8)J1－L(n=4)J1－M(n=5)J1－H(n=9)J2－L(n=7)J2－M(n=10)J2－H(n=9)TC 1.44 ± 0.22▲12.76 ± 3.50 13.45 ± 7.50 13.27 ± 5.09 10.37 ± 2.63 10.16 ± 2.69 10.76 ± 2.55 7.26 ± 3.12▲□TG 142.06 ± 45.42▲79.80 ± 44.30 111.99 ± 49.76 99.65 ± 37.96 98.65 ± 45.14 85.24 ± 16.19 63.51 ± 24.35□72.25 ± 31.71 LDL 0.70 ± 0.13▲9.30 ± 2.43 9.63 ± 6.12 9.71 ± 3.49 7.51 ± 2.08 7.42 ± 2.21 7.71 ± 1.80 5.19 ± 1.83▲□HDL 1.43 ± 0.48▲3.00 ± 0.60 2.80 ± 0.32 2.57 ± 0.59 2.93 ± 0.50 3.03 ± 0.54 4.01 ± 0.50▲■3.07 ± 0.92

圖1 旨可平Ⅰ與旨可平Ⅱ?qū)Ω咧Ｐ痛笫笱琓C的影響

圖2 旨可平Ⅰ與旨可平Ⅱ?qū)Ω咧Ｐ痛笫笱琓G的影響

圖3 旨可平Ⅰ與旨可平Ⅱ?qū)Ω咧Ｐ痛笫笱琇DL的影響

圖4 旨可平Ⅰ與旨可平Ⅱ?qū)Ω咧Ｐ痛笫笱琀DL的影響

3 討論

SD大鼠經(jīng)高脂飼料喂養(yǎng)45 d后檢測(cè)血脂發(fā)現(xiàn)，和空白對(duì)照組比較模型組血清TC，LDL，HDL水平顯著升高，說(shuō)明造模成功。但模型組TG較空白組顯著降低，說(shuō)明采用高脂飼料制作大鼠高脂模型，并不能使大鼠血清TG水平升高。

造模成功后，繼續(xù)高脂飼料喂養(yǎng)的同時(shí)給予受試藥物連續(xù)治療15 d。結(jié)果顯示旨可平Ⅰ號(hào)低、中2個(gè)劑量對(duì)血清TC與LDL指標(biāo)沒(méi)有降低作用，僅高劑量顯示，出一定的降低作用;對(duì)血清HDL水平，旨可平Ⅰ低、中、高3個(gè)劑量均顯示出一定的降低作用，且體現(xiàn)出較好的量效關(guān)系。旨可平Ⅰ3個(gè)劑量對(duì)血脂指標(biāo)的降低作用經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)檢驗(yàn)均未達(dá)到顯著性差異。旨可平Ⅱ?qū)ρ錞C與LDL顯示出較好的降低作用，且體現(xiàn)出明顯的量效關(guān)系，其中高劑量組與模型組相比具有極顯著性差異。旨可平Ⅱ各劑量組對(duì)血清HDL未顯示出降低作用，且中劑量組與模型組相比具有顯著升高HDL的作用。

通過(guò)對(duì)比分析可知，與旨可平Ⅰ相比，旨可平Ⅱ，在各劑量水平下對(duì)血清TC與LDL的降低作用更加顯著，其中在高劑量水平下，兩受試藥物對(duì)TC與LDL的降低作用經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)檢驗(yàn)具有極顯著性差異。因此，旨可平Ⅱ潤(rùn)腸作用更強(qiáng)。

[1]徐叔云，卞如濂，陳 修.藥理實(shí)驗(yàn)方法學(xué)[M].第3版.北京:人民衛(wèi)生出版社，2002:1 202－1 203.