Bio-Oss結(jié)合Bio-Gide修復(fù)牙槽臨界骨缺損的效果

李 晉 王秉新 (武警總醫(yī)院臨床教研室，北京 100039)

很多口腔急癥都會造成牙列或牙槽骨局部缺損，或長期牙缺失等造成牙槽嵴吸收變窄變平，使修復(fù)治療及正畸治療難以實施，嚴重影響患者的生活質(zhì)量和心理健康〔1〕。重建缺損牙槽突的方法主要有自體骨移植、引導(dǎo)性骨組織再生、牽引成骨等。近年來，應(yīng)用具有骨誘導(dǎo)性、骨傳導(dǎo)性以及骨生成性的植入材料充填骨缺損，引導(dǎo)骨再生已成為研究的熱點〔2，3〕。Bio-Oss骨粉是一種自體骨替代物質(zhì)及骨組織再生支架，是很好的骨移植材料，而Bio-Gide膜是一種可吸收生物膜，被宿主吸收不需取出，為骨細胞提供附著載體，不僅利于成骨，而且能夠加速骨缺損愈合〔4〕。兩者聯(lián)合應(yīng)用，對骨缺損及再生有積極促進作用。本實驗通過動物自身對照，觀察Bio-Oss/Bio-Gide在兔下頜牙槽骨臨界骨缺損修復(fù)中的成骨效果。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 動物 健康成年新西蘭大白兔8只，雌雄各半，體重2.0～2.7 kg，4～6月齡，由蘭州大學(xué)醫(yī)學(xué)實驗中心提供。

1.1.2 藥品及試劑 Bio-Oss骨粉，Bio-Gide骨膜(北京雅特盛邦科技有限公司);無水CaCl2分析純(北京天然生物有限公司);3.8%枸櫞酸鈉(北京康普匯維科技有限公司);速眠新Ⅱ(北京豐臺區(qū)動物衛(wèi)生監(jiān)督所);利多卡因(山東華魯制藥有限公司)。

1.2 方法

1.2.1 建立兔下頜牙槽骨臨界骨缺損模型 動物稱重，以速眠新Ⅱ按0.30 ml/kg的劑量，肌肉注射麻醉。常規(guī)消毒，鋪巾，于下頜第一磨牙近中牙槽嵴頂及頰舌側(cè)局部麻醉，暴露下頜第一磨牙牙頸部及近中牙槽嵴頂骨質(zhì)，高速渦輪牙鉆機鉆骨，使骨段恰好分離，撬斷骨連續(xù)，大約深6 mm，去骨完成后，消除尖銳骨嵴，使其平整，手術(shù)形成長×寬×高為5 mm×4 mm×6 mm的骨缺損〔5，6〕。整個手術(shù)過程嚴格無菌操作，防止感染。

1.2.2 分組及干預(yù) 采取自身對照，隨機選擇一側(cè)下頜骨，以Bio-Oss/Bio-Gide修復(fù)骨缺損為實驗側(cè);另外一側(cè)只給予生理鹽水不進行修復(fù)設(shè)為對照側(cè)。實驗側(cè):先給予Bio-Oss骨粉混合(約0.05g/術(shù)區(qū))，形成凝膠狀，再覆蓋 Bio-Gide骨膜約6 mm×6 mm，覆蓋范圍超出骨缺損邊緣2 mm以上〔7〕，褥式縫合固定骨膜，間斷縫合牙齦。對照組給予等量的生理鹽水同上方法及步驟植入縫合。

1.2.3 術(shù)后處理 連續(xù)1 w給予青霉素40萬單位，肌肉注射，1次/d預(yù)防感染。觀察感染狀況，因兩側(cè)下頜骨均有創(chuàng)傷，對照觀察創(chuàng)傷恢復(fù)狀況，適量給予流質(zhì)飲食，持續(xù)1～2 w，視其飲食及創(chuàng)傷恢復(fù)情況，再恢復(fù)正常喂食。

1.2.4 標本采集與處理 于分別于1、4、7、10 w處死動物，每個時間點各處死2只，取下頜植骨區(qū)包括周圍牙齒、牙齦，10%甲醛溶液固定，常規(guī)脫鈣，脫水，石蠟包埋，連續(xù)切片，行蘇木精-伊紅染色，光鏡下觀察牙周缺損愈合情況。

1.2.5 觀察指標 定性分析:新骨形成組織學(xué)觀察，植骨材料的吸收降解情況。定量分析:隨機取2張切片選擇3個視野，測定兩組新骨形成面積占視野總面積的百分比。

1.3 統(tǒng)計學(xué)方法 應(yīng)用SPSS13.0軟件進行分析，數(shù)據(jù)資料以±s表示，采用t檢驗。

2 結(jié)果

2.1 大體標本觀察 新西蘭大白兔均存活，直到觀察點處死。缺損區(qū)軟組織愈合均良好，兩側(cè)均未見感染及糜爛。實驗側(cè)2只Ⅰ級愈合，1只Ⅱ級愈合，1只Ⅲ級愈合，對照側(cè)2只Ⅱ級愈合，2只Ⅲ級愈合。

2.2 Bio-Oss、Bio-Gide修復(fù)前后臨界骨缺損模型改變 實驗建立的臨界骨缺損模型，對照組自行修復(fù)11 w后，缺損區(qū)只見短而小的骨小梁，骨髓腔彌散稀薄，甚至局部缺如，未形成骨橋連。見圖1a。Bio-Oss/Bio-Gide修復(fù)術(shù)后1 w，可見復(fù)合材料周圍有一薄層新骨，成骨細胞排列規(guī)則有序，纖維結(jié)締組織包繞的新骨和骨粉顆粒明顯可見，成骨活躍(圖1b);術(shù)后4 w時，較對照側(cè)新骨形成多，成骨細胞多見，成骨活躍(圖1c)。術(shù)后7 w時，新骨形成逐漸增多，骨邊緣規(guī)則，骨小梁連接成網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)，植骨材料逐漸減少，吸收邊緣可見(圖1d);術(shù)后10 w時，大片的骨組織形成，骨板排列更加規(guī)則，且血供豐富，植骨材料可見更少，吸收更多(圖1e)。

2.3 缺損區(qū)組織形態(tài)學(xué)計量結(jié)果 實驗側(cè)每個時間的新生骨面積百分比均大于對照側(cè)(P＜0.01)，且隨時間延長，新骨生成逐漸增多。見表1。

圖1 Bio-Oss、Bio-Gide修復(fù)前后臨界骨缺損模型

表1 實驗側(cè)和對照側(cè)新生骨面積百分比(%，±s)

表1 實驗側(cè)和對照側(cè)新生骨面積百分比(%，±s)

修復(fù)時間 實驗側(cè) 對照側(cè) P值1 w 10.23±1.46 7.17±0.94 ＜0.01 4 w 16.28±1.31 12.43±0.98 ＜0.01 7 w 21.45±1.27 16.01±1.03 ＜0.01 10 w 26.33±1.64 20.35±1.12 ＜0.01

3 討論

骨量充足不僅能滿足口腔美學(xué)的要求，還為種植體提供了生物力學(xué)方面的支持。為解決種植區(qū)骨量不足問題，臨床多采用自體骨移植、同種異體骨移植和異種骨移植來補充植骨區(qū)的骨量不足〔8，9〕。但不論是自體骨移植還是異體骨移植均有一定缺陷，如自體骨移植來源有限、異體骨移植會存在骨缺損區(qū)排斥反應(yīng)等。因此，目前誘導(dǎo)成骨成為口腔臨床醫(yī)學(xué)研究的熱點〔10〕，在新骨形成的同時，誘導(dǎo)材料逐漸被生新骨取代，與宿主相容。

大量研究表明，Bio-Oss骨粉的多孔狀結(jié)構(gòu)能為新骨生長提供良好的空間支架，對維持間隙起重要作用。Bio-Oss骨粉是凍干的小牛骨通過脫有機質(zhì)制成，具有良好的生物相容性，已成為公認的良好的骨替代材料以及組織工程支架材料〔11〕。而Bio-Gide骨膜是一種膠原可吸收膜，在骨缺損部位具有引導(dǎo)組織再生功能及骨修復(fù)和膜屏障的雙重作用，對重建的組織起支持作用，引導(dǎo)骨再生〔12〕。本實驗選擇 Bio-Oss骨粉結(jié)合 Bio-Gide骨膜，修復(fù)骨缺損，誘導(dǎo)骨再生，正是利用了Bio-0ss骨粉作為骨移植材料填充拔牙窩及骨缺損區(qū)，利用Bio-Gide膜可吸收性并誘導(dǎo)新骨形成的兩大優(yōu)勢，很好地解決了牙槽骨的缺損和修復(fù)。目前，也有一些實驗將一些生長因子與Bio-Oss/Bio-Gide或骨形成蛋白+Ⅰ型膠原+天然珊瑚等混合后對牙槽組織進行修復(fù)，利用復(fù)合材料的協(xié)同性可能更利于新骨的成長。

總之，Bio-oss/Bio-Gide復(fù)合材料修復(fù)牙槽骨的損傷，具有良好的生物組織相容性，并具有刺激骨再生、誘導(dǎo)成骨的效果，為口腔臨床種植牙缺損提供了良好前景，但骨種植區(qū)的感染或相關(guān)不良反應(yīng)還有待于進一步長時間的觀察。

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