夏枯草香附水煎劑對行為絕望抑郁模型小鼠抗抑郁作用研究

胡靜娜 浙江省寧波市鄞州第二醫(yī)院藥劑科 寧波 315100

（浙江中醫(yī)藥大學在職研究生）

夏枯草香附水煎劑對行為絕望抑郁模型小鼠抗抑郁作用研究

胡靜娜 浙江省寧波市鄞州第二醫(yī)院藥劑科 寧波 315100

（浙江中醫(yī)藥大學在職研究生）

目的：觀察夏枯草香附水煎劑（SP-CR-W）的抗抑郁作用。方法：清潔級ICR小鼠50只，隨機分空白對照組、鹽酸氯米帕明組、夏枯草香附水煎劑高、中、低劑量（1.288、0.644、0.322g/kg）組，每組10只，分別予相應藥物灌胃，10天。通過小鼠自主活動、小鼠懸尾實驗（TST）、小鼠強迫游泳實驗（FST）和利血平拮抗實驗，評價夏枯草香附水煎劑的抗抑郁效果。結果：夏枯草香附水煎劑高、中劑量（1.288、0.644g/kg）均能顯著縮短小鼠在 TST及 FST的不動時間（P＜0.05或 P＜0.01)，對小鼠自主活動均無顯著影響（P＞0.05）。夏枯草香附水煎劑各劑量組均能拮抗利血平注射后1h所致的小鼠降溫作用，減少小鼠眼瞼下垂數(shù)及呆在圈內的動物數(shù)。結論：夏枯草香附水煎劑可以改善小鼠抑郁行為，具有抗抑郁作用，且無中樞興奮性作用。

小鼠 行為絕望抑郁模型 夏枯草香附水煎劑 懸尾實驗 強迫游泳實驗 利血平拮抗實驗

抑郁癥是一種臨床綜合征，屬于中醫(yī)“郁證”范疇。根據(jù)《中醫(yī)內科學》對郁證證候的分類，肝郁是其常見證型[1]。文獻記載夏枯草和香附組成的補肝散具有行氣瀉火、清肝明目的功效，主治肝郁火盛證候[2]。本實驗通過小鼠自主活動、小鼠懸尾實驗（tail suspension test，TST）、小鼠強迫游泳實驗（forced swimming test，F(xiàn)ST）和利血平拮抗實驗觀察夏枯草香附水煎劑抗抑郁作用，現(xiàn)報道如下。

1 實驗材料

1.1 實驗動物 清潔級ICR小鼠50只，雌雄各半，體質量18～22g，浙江中醫(yī)藥大學實驗動物中心提供，合格證號：SYXK（浙）2003-003。給小鼠自然晝夜節(jié)律光照，自由飲水、攝食，適應性喂養(yǎng)5天后進行實驗。

1.2 主要儀器 YLS-1A多功能小鼠自主活動記錄儀，山東醫(yī)學科學院設備供應維修站產品；懸尾實驗箱，自制，40cm×40cm×50cm；游泳塑料桶，高 50cm，直徑30cm。

1.3 實驗藥物 夏枯草、香附藥材購于浙江省寧波市鄞州第二醫(yī)院中藥房，按1:2煎煮并濃縮成質量濃度分別為1.288、0.644、0.322g/mL的水煎劑；鹽酸氯米帕明片（陽性藥），北京諾華制藥有限公司產品，批號X0045。

2 實驗方法

2.1 分組及給藥 將50只ICR小鼠隨機分成空白對照組、鹽酸氯米帕明組、夏枯草香附水煎劑（SPCR-W）高、中、低劑量組，每組10只。分別予生理鹽水10mL/kg、鹽酸氯米帕明20mg/kg和夏枯草香附水煎劑 1.288g/kg、0.644g/kg、0.322g/kg灌胃，1 天 1 次，連續(xù)10天。

2.2 小鼠自主活動實驗[3]小鼠第9天灌胃給藥后1h，將小鼠放入自主活動記錄儀中，適應2min后，記錄5min內小鼠活動次數(shù)。

2.3 小鼠懸尾實驗（TST）[3]小鼠末次灌胃給藥后1h，用黏膏條將小鼠尾端1cm處固定于水平金屬棒上，使小鼠呈倒掛狀態(tài)，離底部15cm，適應2min后，記錄4min內小鼠的不動時間。

2.4 強迫小鼠游泳實驗（FST）[3]小鼠第9天灌胃給藥后1h，將小鼠輕放入高50cm、直徑30cm的桶中，桶中水深 16cm，水溫（25±1）℃，適應 2min后，測小鼠5min內不動狀態(tài)(即小鼠在水中停止掙扎，或小鼠呈漂浮狀態(tài)，僅有細小的肢體運動以保持頭部浮在水面)的時間。

2.5 利血平拮抗實驗[4]第10天灌胃給藥后1h后，測定小鼠基礎體溫。每組小鼠均腹腔注射利血平2.5mg/kg，觀察：①分別在1h、3h后，將溫度計探頭放置在肛門內2cm處，測定小鼠肛溫。②給藥后1h，將動物放置在支架上觀察15s，比較給藥組和利血平對照組（原空白對照組）中眼瞼關閉1/2以上的動物數(shù)。③將動物放置在7.5cm直徑的圓形內，觀察15s后呆在圈內的動物數(shù)。

2.6 統(tǒng)計學方法 應用SPSS13.0統(tǒng)計軟件，數(shù)據(jù)以均數(shù)±標準差（±s）表示，組間比較采用單因素方差分析。

3 實驗結果

3.1 對小鼠自主活動的影響 夏枯草香附水煎劑高、中、低劑量和鹽酸氯米帕明對小鼠自主活動無明顯影響，與空白對照組比較，差異無統(tǒng)計意義（P＞0.05），見表 1。

3.2 對小鼠懸尾不動時間的影響 與空白對照組比較，夏枯草香附水煎劑高、中劑量和鹽酸氯米帕明能顯著縮短小鼠懸尾不動時間（P＜0.05或 P＜0.01），見表1。

3.3 對小鼠強迫游泳不動時間的影響 與空白對照組比較，夏枯草香附水煎劑高、中劑量組和鹽酸氯米帕明均能顯著縮短小鼠游泳不動時間（P＜0.05或P＜0.01），見表 1。

表1 夏枯草香附水煎劑對小鼠自主活動、懸尾及強迫游泳的影響（±s）

表1 夏枯草香附水煎劑對小鼠自主活動、懸尾及強迫游泳的影響（±s）

注：與空白對照組比較，*P＜0.05，**P＜0.01

組 別空白對照組鹽酸氯米帕明組夏枯草香附水煎劑高劑量組夏枯草香附水煎劑中劑量組夏枯草香附水煎劑低劑量組n/只10 10 10 10 10劑量/（g/kg）-0.02 1.288 0.644 0.322自主活動次數(shù)/s 119.10±20.77 128.00±17.02 127.40±17.24 123.60±12.38 130.00±19.96懸尾不動時間/s 135.50±31.54 87.80±29.68**96.6±28.40**101.4±32.11*119.2±45.96游泳不動時間/s 153.10±60.60 54.44±8.80**64.70±33.95**86.3±68.04*126.90±67.96

3.4 對利血平拮抗實驗小鼠體溫、眼瞼下垂、運動不能的影響 與利血平對照組比較，夏枯草香附水煎劑高、中、低劑量和鹽酸氯米帕明能顯著拮抗利血平所致小鼠體溫下降，也能減少小鼠眼瞼下垂率，增加出圈率（P＜0.05 或 P＜0.01）。見表 2～3。

表2 夏枯草香附水煎劑對利血平實驗小鼠體溫的影響（±s）

表2 夏枯草香附水煎劑對利血平實驗小鼠體溫的影響（±s）

注：與利血平對照組比較，△P＜0.05，△△P＜0.01

組 別利血平對照組鹽酸氯米帕明組夏枯草香附水煎劑高劑量組夏枯草香附水煎劑中劑量組夏枯草香附水煎劑低劑量組n/只10 10 10 10 10劑量/（g/kg）-0.02 1.288 0.644 0.322基礎體溫/℃36.95±0.31 37.01±0.246 37.10±0.34 36.90±0.27 37.26±0.57 1h 體溫/℃34.84±0.59 36.29±0.62△△35.55±0.44△35.43±0.37△35.64±0.65△3h 體溫/℃32.25±1.31 34.43±0.69△△33.79±0.94△△34.17±1.20△△33.16±0.75△

表3 夏枯草香附水煎劑對利血平實驗小鼠眼瞼下垂率、出圈率的影響（±s）

表3 夏枯草香附水煎劑對利血平實驗小鼠眼瞼下垂率、出圈率的影響（±s）

注：與利血平對照組比較，△P＜0.05，△△P＜0.01

組 別利血平對照組鹽酸氯米帕明組夏枯草香附水煎劑高劑量組夏枯草香附水煎劑中劑量組夏枯草香附水煎劑低劑量組n/只10 10 10劑量/（g/kg）-0.02 1.288眼瞼下垂率/%100 20△△50△出圈率/%0 80△30△100.64450△40△100.3228020

4 討論

《肘后備急方·卷六·治目赤痛暗昧刺痛諸病方第四十三》中記載：“《簡要濟眾》，治肝虛，目睛疼，冷淚不止，筋脈痛，及眼羞明怕日，補肝散。夏枯草半兩，香附一兩，共為末，每服一錢，臘茶，調下無時?！眲⒓因懢幹摹端帉Α分杏涊d，夏枯草和香附組成的補肝散具有行氣瀉火、清肝明目的功效，主治肝郁火盛證候[2]。

小鼠懸尾實驗（TST）和強迫游泳實驗（FST0作為行為絕望抑郁模型是經(jīng)典的抗抑郁藥篩選、評價模型，具有簡單、快捷、敏感等特點[5]。本組結果顯示，夏枯草-香附水煎劑高、中劑量均能顯著縮短小鼠在TST及 FST的不動時間（P＜0.05或 P＜0.01)。小鼠自主活動實驗可初步排除藥物對中樞神經(jīng)系統(tǒng)的興奮作用而造成的假陽性結果的可能[6]，確定該藥抗抑郁作用的可靠性。本組結果顯示，夏枯草香附水煎劑高、中、低劑量對小鼠自主活動均無明顯影響。利血平拮抗實驗反映了藥物對單胺能神經(jīng)系統(tǒng)的興奮作用[7]，本實驗顯示，夏枯草香附水煎劑高、中劑量、低劑量均能拮抗利血平所致體溫下降、眼瞼下垂、運動不能等現(xiàn)象，但是夏枯草香附水煎劑中劑量作用優(yōu)于高劑量，其原因有待進一步考證。

本實驗研究表明，《肘后備急方》中由夏枯草和香附兩位藥組成的補肝散，具有明顯的抗抑郁作用，且無中樞興奮作用，為本方進一步擴展在中醫(yī)臨床中的應用提供了實驗依據(jù)，但其抗抑郁機制有待進一步研究。

［1］周仲瑛.中醫(yī)內科學［M］.第2版.北京：人民衛(wèi)生出版社，2010：373-378.

［2］劉家驊.藥對［M］.北京：人民衛(wèi)生出版社，2009：347.

［3］李儀奎.中藥藥理實驗方法學［M］.第2版.上海：上?？茖W技術出版社，2006：219.

［4］暢洪昇，梁吉春，石任兵，等.枳術寬中膠囊對抑郁動物模型的抗抑郁作用研究［J］.北京中醫(yī)藥大學學報，2009，32（10）：690-694.

［5］張崇燕，唐永鑫，曾南，等.逍遙散及其組方對行為絕望抑郁模型小鼠的影響［J］.成都中醫(yī)藥大學學報，2009，32（2）：51-53.

［6］陳忠新，李強，閆麗莉，等.刺五加浸膏抗抑郁作用的實驗研究［J］.黑龍江科技論壇，2011，（13）：48.

［7］Askew BM.A simple screening producer for imipram inelike antidepressant drugs［J］.Life Sci，1963，2：725-730.

Antidepressant Effect of the Water Extract Isolated from Spica Prunella and Cyperus Rotundus L.on Depression in Mice

HU Jingna.Ningbo Yinzhou No.2 Hospital，Ningbo(315100)，China

Objective：To study the antidepressant effect of Spica prunellae and Cyperus rotundus L.-water mixture（SP-CR-W） on depression mice.Methods：Fifty ICR mice were randomly divided into 5 groups as follows:blank control group，positive control group，and SP-CR-W groups（1.288，0.644，0.322 g·kg-1）.All groups were administered intragastrically for 7 days.The tests of spontaneous motion，tail suspension（TST），forced swimming（FST） and antagonism of reserpine in mice were carried out to observe the antidepressant effect of SP-CR-W.ResultsSP-CR-W（1.288 and 0.644 g·kg-1）significantly shortened the dead time of tail suspension and forced swimming in mice （P<0.05 orP<0.01）while it had no effect on spontaneous motion.SP-CR-W in different doses resisted the descent of body temperature and reduced the numbers of the drooping eyelids and staying inside the circle induced by the injection of reserpine after 1 hour.ConclusionSP-CR-W has antidepressant effect and can relieve the depressant behaviors of mice.

mice animal model of depression Spica prunellae and Cyperus rotundus-water mixture tail suspension forced swimming testantagonism of reserpine

2013-06-03

2013-06-26