靜脈全血放置時間對網(wǎng)織紅細(xì)胞參數(shù)結(jié)果的影響

劉艷紅， 李 艷， 何 穎， 萬 獎

(武漢大學(xué)人民醫(yī)院檢驗科，湖北 武漢 430060)

血液分析儀因其方便、快速、準(zhǔn)確已被廣泛應(yīng)用，靜脈全血樣本的存放時間對血液分析結(jié)果的影響已有較多報道[1-2]，但大多探討的是對血液分析常規(guī)項目結(jié)果的影響，而對網(wǎng)織紅細(xì)胞(RET)測定的影響少有報道。因RET測定項目非部分醫(yī)院每日必查常規(guī)項目，可能會集中幾天的標(biāo)本統(tǒng)一測定。但標(biāo)本放置時間是否會影響RET檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性，且貧血與非貧血患者標(biāo)本是否有存在差異，我們采集了20例門診非貧血患者和30例住院部貧血患者血常規(guī)標(biāo)本于不同時間節(jié)點做了比較實驗。

材料和方法

一、研究對象

隨機(jī)選取武漢大學(xué)人民醫(yī)院2010年5月至7月門診非貧血患者20例及住院貧血患者30例，其中營養(yǎng)性貧血9例，溶血性貧血4例，骨髓增殖性疾病7例，慢性病(高血壓、惡性腫瘤、慢性炎癥等)貧血10例。

二、儀器和試劑

日本Sysmex公司XE-2100全自動血液分析儀;進(jìn)口專用配套試劑、質(zhì)控液及校準(zhǔn)液。

三、方法

1.XE-2100 RET參數(shù)精密度評價 血液分析儀檢測靜脈全血之前進(jìn)行全面保養(yǎng)，并進(jìn)行重新校準(zhǔn)，RET的校正按照廠家維修手冊指定的方法進(jìn)行，再采用配套質(zhì)控品 CHECK分別評價RET參數(shù)的批內(nèi)精密度和天間精密度，結(jié)果均達(dá)到廠家規(guī)定要求。

2.正規(guī)采集門診患者靜脈血2 mL，顛倒5～8次充分混勻。共收集20例標(biāo)本，標(biāo)本中紅細(xì)胞相關(guān)參數(shù)均為正常。立即在XE-2100全自動血液分析儀上進(jìn)行RET測定，并分別于采血后2、4、8、24、48及72 h再重復(fù)進(jìn)行 RET檢測，并記錄RET各參數(shù)及白細(xì)胞計數(shù)的結(jié)果。

3.收集住院貧血患者標(biāo)本30例，于采血后2 h檢測RET，然后分別于采血后8、24、48及72 h再重復(fù)進(jìn)行RET檢測，并記錄 RET各參數(shù)及WBC計數(shù)的結(jié)果。

4.門診及住院貧血患者標(biāo)本均于每次檢測后存放于4℃冰箱保存，每次檢測前從冰箱中取出標(biāo)本在室溫下放置15 min，恢復(fù)至室溫后再進(jìn)行檢測。

四、統(tǒng)計學(xué)方法

結(jié) 果

將20例門診非貧血患者采血后于即時、2、4、8、24、48及72 h分別進(jìn)行RET檢測，結(jié)果顯示:采血后2、4、8、24、48 及 72 h 分別與即時檢測結(jié)果相比較，RET計數(shù)(RET#)及RET%的結(jié)果差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05);其他參數(shù)未成熟RET比率(IRF%)、高熒光強度RET(HFR%)、中熒光強度RET(MFR%)及低熒光強度RET(LFR%)的結(jié)果在48 h及以前各時間點亦差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)，而在72 h時檢測結(jié)果出現(xiàn)明顯變化，具體表現(xiàn)為HFR%、MFR%和IRF%呈極明顯增高(P＜0.01)，而 LFR%呈極明顯降低(P ＜0.01)，見表1。

將30例住院貧血患者采血后于2、8、24、48及72 h分別進(jìn)行RET檢測，結(jié)果顯示:采血后8、24及48 h分別與2 h時檢測結(jié)果進(jìn)行比較，RET#及RET%的檢測結(jié)果差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)，僅在72 h時出現(xiàn)明顯降低(P ＜0.05);其他參數(shù)IRF%、HFR%、MFR%及LFR%的結(jié)果從24 h開始即出現(xiàn)明顯變化，具體表現(xiàn)為IRF%和MFR%呈極明顯增高(P＜0.01)，HFR%呈明顯增高(P＜0.05)，而LFR%呈極明顯降低(P＜0.01)，見表2。

比較20例門診非貧血患者采血后于72 h與即時的白細(xì)胞計數(shù)差異，另將30例住院貧血患者采血后于24 h及72 h分別與2 h進(jìn)行白細(xì)胞計數(shù)差異的比較，結(jié)果顯示:2組之間差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P ＞0.05)，見表3。

表1 20例非貧血患者靜脈全血不同檢測時間下RET相關(guān)參數(shù)的比較

表2 30例貧血患者靜脈全血不同檢測時間下RET相關(guān)參數(shù)的比較

表3 貧血及非貧血患者靜脈全血不同檢測時間下白細(xì)胞計數(shù)的比較

討 論

高端血液分析儀檢測速度快、精密度高，且可進(jìn)行RET多項參數(shù)的檢測。RET是晚幼紅細(xì)胞脫核后發(fā)育為成熟RBC過程中胞漿中含有殘留RNA的RBC，Sysmex XE-2100全自動血液分析儀根據(jù)RET RNA含量的不同用熒光染料使其著色，用流式細(xì)胞術(shù)將 RET分成 HFR、MFR和LFR，熒光強度越高，RET越幼稚。IRF是指含高RNA的RET與總RET的比值，是評價紅系增生活躍有用的指標(biāo)，各參數(shù)間的關(guān)系是:IRF%=HFR%+MFR%。然而由于RET測定非常規(guī)項目，標(biāo)本量較少，有些醫(yī)院可能會集中幾天的標(biāo)本一起進(jìn)行測定。為明確標(biāo)本放置時間過長進(jìn)行RET檢測是否會影響結(jié)果的準(zhǔn)確性，本實驗比較了貧血及非貧血患者采血后不同時間點RET檢測結(jié)果的差異。

我們認(rèn)為，采血后立即進(jìn)行檢測(如床邊檢測)結(jié)果應(yīng)為準(zhǔn)確值，此時血液成分尚來不及與抗凝劑發(fā)生充分作用，產(chǎn)生形態(tài)變化及假性凝集等情況從而影響檢測結(jié)果。本組研究結(jié)果顯示，非貧血患者采血后即刻直至72 h為止，RET#及RET%檢測結(jié)果均無明顯改變(P＞0.05);而IRF%、HFR%、MFR%及LFR%的結(jié)果至72 h時檢測結(jié)果才出現(xiàn)明顯變化(詳見表1)。與此結(jié)果略有不同的是，貧血患者RET#及RET%至72 h時檢測結(jié)果開始出現(xiàn)明顯降低(P＜0.05);而IRF%、HFR%、MFR%及LFR%的結(jié)果從24 h開始即出現(xiàn)明顯變化(詳見表2)。該結(jié)果與國內(nèi)張春平等[3]報道的“RET、IRF、LFR 在 3d的保存時間內(nèi)雖有輕微的變化趨勢，但與初次檢測值比較均未發(fā)生明顯改變”的結(jié)論并不完全一致，這可能是由于所選病例組成不同的原因。

雖然貧血與非貧血患者RET各指標(biāo)發(fā)生變化出現(xiàn)的時間有所不同，但變化的趨勢是一致的，均表現(xiàn)為IRF%、HFR%和MFR%呈明顯增高(P＜0.05)，LFR%呈明顯降低(P ＜0.05)。推測此現(xiàn)象產(chǎn)生的原因可能是由于RET離體后會在體外繼續(xù)發(fā)育成熟，首先表現(xiàn)為較成熟的網(wǎng)織紅細(xì)胞(LFR)先轉(zhuǎn)變?yōu)槌墒霷BC，LFR的減少導(dǎo)致HFR和MFR的相對比例增加，而RET總量會逐漸減少[4]。貧血患者標(biāo)本各指標(biāo)出現(xiàn)明顯變化較非貧血患者早，可能是由于貧血患者RET體外發(fā)育所需時間較正常人短所致。當(dāng)然，貧血的嚴(yán)重程度不同時由于RET含量不同也可能對標(biāo)本放置時間的反應(yīng)有不同影響，還有待進(jìn)一步探討。另外，通過比較2組患者在不同時間點白細(xì)胞計數(shù)的差異，結(jié)果顯示差異無統(tǒng)計學(xué)意義(見表3)，因此，可以排除WBC降解碎片混入RET檢測區(qū)域致使核酸含量增高所帶來的干擾影響。

一般來說，臨床上有檢測RET相關(guān)參數(shù)需求的患者多數(shù)為RBC系統(tǒng)生成障礙患者，即貧血患者。因此，原則上對于凡是需要進(jìn)行RET檢測患者的標(biāo)本，應(yīng)最好在24 h以內(nèi)檢測方能較好地反映結(jié)果的準(zhǔn)確性。

[1]史占林，劉新記，付紅芹.標(biāo)本放置時間對血細(xì)胞分析儀檢測結(jié)果的影響[J].職業(yè)與健康，2010，26(5):509-510.

[2]劉華森.保存標(biāo)本的時間和溫度對血細(xì)胞參數(shù)的影響[J].現(xiàn)代臨床醫(yī)學(xué)生物工程學(xué)雜志，2006，12(2):191-192.

[3]張春平，唐小平，鐘亞玲，等.全血標(biāo)本不同保存溫度和時間對Sysmex XE-2100測定血細(xì)胞參數(shù)的影響[J].西部醫(yī)學(xué)，2010，22(7):1312-1314.

[4]李雪光，梁月桂，王 薇，等.采血后體外放置時間對網(wǎng)織紅細(xì)胞計數(shù)的影響[J].中華檢驗醫(yī)學(xué)雜志，1996，19(6):32.