氣質(zhì)聯(lián)用法同時(shí)測(cè)定果蔬中多種有機(jī)磷農(nóng)藥殘留

王海鳳 王俊斌 劉海學(xué) 何新益 胡 毅

（1.天津農(nóng)學(xué)院農(nóng)業(yè)分析測(cè)試中心，天津 300384；2.天津農(nóng)學(xué)院基礎(chǔ)科學(xué)系，天津 300384；3.天津農(nóng)學(xué)院食品科學(xué)系，天津 300384）

目前，農(nóng)藥殘留檢測(cè)方法主要有氣相色譜法［1］、氣相色譜－質(zhì)譜法［2］、高效液相色譜法［3］、液相色譜－質(zhì)譜法［4］等。氣質(zhì)聯(lián)用技術(shù)利用色譜柱的高效分離特性將樣品組分分離，進(jìn)行定量分析；再導(dǎo)入質(zhì)譜儀，將樣品進(jìn)一步離子化，進(jìn)行定性鑒別。它是一種高靈敏度的通用型檢測(cè)器，可同時(shí)對(duì)多種化合物進(jìn)行測(cè)量而不受基質(zhì)干擾，定量精度較高。因而，在食品農(nóng)藥殘留檢測(cè)中得到越來越廣泛的應(yīng)用，能更好的保障公眾的飲食安全。近年來利用氣質(zhì)聯(lián)用法檢測(cè)果蔬中有機(jī)磷農(nóng)藥殘留也有相關(guān)文獻(xiàn)報(bào)道［5］，但因其操作相對(duì)復(fù)雜，溶劑用量大，所需時(shí)間長(zhǎng)，有的還需要特殊的前處理儀器，推廣性不強(qiáng)。本試驗(yàn)建立一種用氣相色譜－質(zhì)譜選擇離子監(jiān)測(cè)模式同時(shí)檢測(cè)果蔬中多種有機(jī)磷農(nóng)藥殘留的方法。

1 材料與方法

1.1 儀器、試劑與材料

1.1.1 儀器

氣相色譜－質(zhì)譜聯(lián)用儀：Agilent 7890A／5975C型，美國(guó)安捷倫科技有限公司；

自動(dòng)進(jìn)樣器：7693型，美國(guó)安捷倫科技有限公司；

氮吹儀：MTN－2800W 型，天津奧特賽恩斯儀器有限公司；

漩渦混合器：QL－901型，海門市其林貝爾儀器制造有限公司。

1.1.2 試劑

丙酮：色譜純，天津市化學(xué)試劑三廠；

乙腈：色譜純，美國(guó)Tegia公司；

氯化鈉：分析純，上?；瘜W(xué)試劑有限公司；

農(nóng)藥混合標(biāo)準(zhǔn)溶液：農(nóng)業(yè)部環(huán)境保護(hù)科研檢測(cè)所。

1.1.3 材料

油麥菜和梨：購(gòu)于天津市菜市場(chǎng)。

1.2 樣品處理

新鮮蔬菜、水果樣品去掉非可食部分，切碎后用食物調(diào)理機(jī)打碎，準(zhǔn)確稱取10.0g碎樣放入勻漿機(jī)中，加入20mL乙腈，在勻漿機(jī)中高速勻漿2min后用濾紙過濾到裝有5～7g氯化鈉的具塞試管中，收集濾液15～20mL，蓋上塞子劇烈震蕩1min，在室溫下靜置30min，使乙腈相和水相分層。吸取5mL乙腈溶液至10mL的離心管中，放在氮吹儀上吹至近干，準(zhǔn)確加入2mL丙酮，在旋渦混合器上充分混勻，再過0.22μm的有機(jī)濾膜至2mL的樣品瓶中，供GC／MS測(cè)定多種有機(jī)磷農(nóng)藥殘留，此方法依據(jù) NY／T 761——2008［6］稍有改動(dòng)。

1.3 GC－MS測(cè)定條件

1.3.1 色譜條件 色譜柱：HP－5MS（30m×0.25mm，0.25μm）；載氣：He（99.999%）；進(jìn)樣量：1μL；進(jìn)樣口溫度：220℃；進(jìn)樣方式：不分流；流速：1.0mL／min；柱溫：程序升溫，120℃／min，保持1min；以8℃／min升溫至160℃，保持3min；再 以20 ℃／min升 溫 至200 ℃，保 持3min；以20℃／min升溫至220℃保持5min。

1.3.2 質(zhì)譜條件 電子轟擊離子源：EI源；電子能量：70eV；離子源溫度：230℃；四極桿溫度150℃；接口溫度280℃；EM 電壓：1 510V；采集方式：選擇離子監(jiān)測(cè)（SIM）模式；溶劑延遲：4.5min；調(diào)諧方式：自動(dòng)調(diào)諧；譜庫(kù)檢索：NIST08譜庫(kù)。

2 結(jié)果與討論

2.1 色譜條件的優(yōu)化

2.1.1 進(jìn)樣口溫度 據(jù)已有的有機(jī)磷多殘留分析文獻(xiàn)［7－9］，進(jìn)樣口常用溫度在200～300℃，一般要接近樣品中沸點(diǎn)最高組分的沸點(diǎn)，但要低于易分解組分的分解溫度。本試驗(yàn)對(duì)200，220，250，270℃等進(jìn)樣口溫度進(jìn)行試驗(yàn)，結(jié)果顯示220℃時(shí)樣品分離效果最好。

2.1.2 柱溫 色譜柱溫度的確定主要由樣品的復(fù)雜程度和汽化溫度決定，原則是既要保證待測(cè)物的完全分離，又要保證所有組分能流出色譜柱，且分析時(shí)間越短越好。根據(jù)這一原則本試驗(yàn)進(jìn)行多次分離試驗(yàn)后，確定色譜柱溫度為120℃／min，保持1min；以8℃／min升溫至160℃，保持3min；再 以20 ℃／min升 溫 至200 ℃，保 持3min；以20℃／min升溫至220℃保持5min。在該柱溫11種有機(jī)磷農(nóng)藥分離良好，且分析時(shí)間在20min內(nèi)。

2.1.3 載氣流量 分別對(duì)0.8，1.0，1.2mL／min的載氣流量進(jìn)行試驗(yàn)，結(jié)果表明，載氣流速為1.2，0.8mL／min時(shí)，被測(cè)組分不能完全分離；當(dāng)流速為1mL／min時(shí)，分離效果最好，在以上色譜操作參數(shù)下，采用不分流進(jìn)樣方式，進(jìn)樣量1μL，進(jìn)行分析試驗(yàn)，結(jié)果11種有機(jī)磷農(nóng)藥分離良好（見圖1）。

2.2 質(zhì)譜條件選擇

圖1 農(nóng)藥混合標(biāo)準(zhǔn)品全掃描TIC圖（10μg／mL）Figure 1 Total ion current chromatogram of mixed pesticide standard（10μg／mL）

為提高靈敏度，降低干擾，采用SIM模式對(duì)有機(jī)磷農(nóng)藥進(jìn)行定性和定量，每種農(nóng)藥選擇3～4個(gè)特征離子，其中一個(gè)離子用于定量。根據(jù)農(nóng)藥出峰順序采用分時(shí)間段監(jiān)測(cè)模式，在某一時(shí)間段監(jiān)測(cè)一個(gè)或幾個(gè)待測(cè)物質(zhì)，使得特征離子在單位時(shí)間內(nèi)被掃描的次數(shù)增多，從而降低背景干擾，提高信噪比，檢測(cè)的組分分段完成。本試驗(yàn)共設(shè)計(jì)11個(gè)離子通道，各離子通道中特征離子及定量離子見表1。農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)品選擇離子TIC圖見圖2。

2.3 標(biāo)準(zhǔn)曲線及線性范圍

將濃度為100μg／mL的有機(jī)磷農(nóng)藥混合標(biāo)準(zhǔn)品1mL，用丙酮定容至10mL，得到濃度為10.0μg／mL的標(biāo)準(zhǔn)貯備液，用10.0μg／mL的貯備液配制成0.05，0.10，0.20，0.40，0.60，1.00μg／mL的標(biāo)準(zhǔn)工作液，按選定的色譜、質(zhì)譜條件，用選擇離子掃描方式，以峰面積為縱坐標(biāo)，濃度為橫坐標(biāo)，得到11種農(nóng)藥的線性方程和相關(guān)系數(shù)，見表2。

表1 11種有機(jī)磷農(nóng)藥的保留時(shí)間及特征離子Table 1 Retention time and characteristic ions of 11organophosphorus pesticides

圖2 農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)品選擇離子TIC圖（0.4μg／mL）Figure 2 Selected ion monitoring chromatogram of pesticide standard（0.4μg／mL）

表2 11種有機(jī)磷農(nóng)藥的線性方程和相關(guān)系數(shù)Table 2 Linear equation and correlation coefficient of 11organophosphoru pesticides

2.4 回收率試驗(yàn)與精密度

稱取空白樣品10g，分別加入0.08，0.40，0.80mg／kg 3個(gè)不同質(zhì)量水平的標(biāo)準(zhǔn)溶液，按1.2處理方法進(jìn)行樣品制備?；厥章始熬芏仍囼?yàn)結(jié)果見表3。由表3可知，加標(biāo)回收率范圍在72.6%～94.0%，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差在1.3%～8.8%，均滿足有機(jī)磷農(nóng)藥殘留分析要求。

2.5 樣品檢測(cè)

根據(jù)本試驗(yàn)建立的試驗(yàn)條件，對(duì)市場(chǎng)上隨機(jī)購(gòu)買的油麥菜和梨進(jìn)行檢測(cè)。結(jié)果在油麥菜中檢出0.136mg／kg甲拌磷，0.072mg／kg氧化樂果，其它被監(jiān)測(cè)農(nóng)藥未被檢出，梨中檢出0.096mg／kg甲拌磷，0.048mg／kg馬拉硫磷，其它被監(jiān)測(cè)農(nóng)藥未被檢出。

表3 11種有機(jī)磷農(nóng)藥的加標(biāo)回收率及精密度Table 3 The recovery and precision of 11 organophosphorus pesticides ／%

3 結(jié)論

本試驗(yàn)通過對(duì)色譜、質(zhì)譜條件的優(yōu)化，降低了基質(zhì)干擾，建立了良好的蔬菜、水果中多種有機(jī)磷農(nóng)藥殘留的GC／MS定性定量分析方法。此法準(zhǔn)確、可靠，對(duì)于果蔬中多種有機(jī)磷農(nóng)藥的分離效果好，回收率及重現(xiàn)性均符合農(nóng)藥殘留測(cè)定要求，且樣品前處理操作簡(jiǎn)單，所用試劑用量少，測(cè)定成本低，檢測(cè)時(shí)間控制在20min內(nèi)，可作為快速測(cè)定果蔬中多種有機(jī)磷農(nóng)藥殘留的方法。

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