蕎麥和商品苦蕎茶中總黃酮的含量測定

王靜霞，黃艷菲，＋，趙小燕，孫 美，許云章，彭鐮心，劉 圓，*

（1.西南民族大學民族醫(yī)藥研究院，四川成都 610041；2.成都大學生物產業(yè)學院，四川成都 610106）

蕎麥為蓼科（Polygonaceae）雙子葉植物，藥食皆可用，目前主要的栽培品種有兩個：一種是韃靼蕎麥Fagopyrucm tataricum（L.）Gaerth，稱為苦蕎；另一種是普通蕎麥Fagopyrum esculentum Moench，稱為甜蕎[1]。我國的蕎麥分布較廣，但生產相對集中，華北、西北、東北地區(qū)以種植甜蕎為主，西南地區(qū)的四川、云南、貴州等地以種植苦蕎為主[2]。蕎麥不僅營養(yǎng)豐富，還含有多種黃酮類化合物[3-4]。現(xiàn)代藥理研究表明：蕎麥具有抗氧化、降血糖、降血脂等多種藥理活性[5-9]。隨著現(xiàn)代人們保健意識的提高，蕎麥不僅作為一種食物材料進入人們的餐桌，同時各種商品苦蕎茶作為一種具有食療保健功能的食品也進入人們的生活，但是目前蕎麥和商品苦蕎茶的國家、地方或企業(yè)質量標準中，仍然沒有可以執(zhí)行的有效成分含量標準，因此，有必要系統(tǒng)地對蕎麥和商品苦蕎茶中總黃酮的含量進行測定。本實驗以蕎麥中的總黃酮含量作為蕎麥和商品苦蕎茶的評價指標，以期為蕎麥和苦蕎系列商品的質量控制及評價提供數(shù)據(jù)參考。

1 材料與方法

1.1 材料與儀器

蕎麥（種子及植株）均采自成都大學的蕎麥實驗田，清洗干凈后在50℃的電熱恒溫鼓風干燥箱中烘干至質量恒定，粉碎過50目篩；商品苦蕎茶 購于國內的超市和網(wǎng)購；蘆丁標準品 中國藥品生物制品檢定所（批號：100080-200707）；無水乙醇、亞硝酸鈉、硝酸鋁、氫氧化鈉 均為分析純。

UV-8500紫外-可見分光光度計 中國上海天美公司；METTLER AE240電子分析天平 梅特勒-托利多儀器（上海）有限公司；W201B恒溫水浴鍋 上海申順生物科技有限公司。

1.2 實驗方法

1.2.1 標準曲線的制備 以蘆丁為對照品，UV法測定總黃酮含量。準確稱取蘆丁對照品25.05mg，加體積分數(shù)69%的乙醇溶液定容于50mL的容量瓶中，得質量濃度為0.501mg/mL對照品溶液。精密移取標準溶液7份，分別稀釋成0.1503、0.06012、0.03006、0.01503、0.007515、0.003006mg/mL的對照品溶液。分別精密吸取5mL上述對照品溶液置于10mL比色管中，加5%亞硝酸鈉0.5mL，放置6min，加10%硝酸鋁0.5mL，放置6min，再加4%氫氧化鈉4mL，搖勻，放置15min后于510nm處測定吸收度A。以濃度C（mg/mL）為橫坐標，吸光度A為縱坐標繪制標準曲線，得回歸方程為：y=4.9848x-0.0006，R2=0.9999，表明在0.003006～0.1503mg/mL濃度范圍內，蘆丁濃度C（mg/mL）與吸光度A之間具有良好的線性關系。

1.2.2 供試品溶液的制備 按課題組前期考察的蕎麥總黃酮提取的最佳工藝條件提取樣品。稱取樣品粉末0.5g，加入體積分數(shù)69%的乙醇21mL，回流提取90min，提取2次，過濾，回收溶劑，用體積分數(shù)69%的乙醇定容至25mL。吸取一定量樣品溶液于比色管中，加入體積分數(shù)69%的乙醇補足至5mL，按1.2.1顯色方法顯色，離心后取上清液備用。

2 結果與討論

2.1 精密度實驗

以濃度為0.06012mg/mL的對照品溶液，重復測定吸光度6次，記錄吸光度，吸光度RSD為1.51%，結果表明精密度良好。

2.2 重復性實驗

取米蕎1號粉末6份，按1.2.2供試品溶液制備方法制備，測定吸光度，吸光度RSD為1.44%，結果表明重復性良好。

2.3 穩(wěn)定性實驗

取供試品溶液，每隔0.5h測定吸光度值，連續(xù)測定4h，吸光度RSD為2.43%，結果表明，4h內樣品穩(wěn)定性良好。

2.4 加樣回收率實驗

稱取已知含量的米蕎1號樣品6份，分別精密加入質量分數(shù)為已知含量樣品中蘆丁含量的120%、100%、80%蘆丁對照品，按供試品溶液制備方法制備，測定吸光度，計算回收率。計算得總黃酮平均回收率為97.9%，RSD為1.95%。

2.5 樣品含量測定結果

表1數(shù)據(jù)表明，比較各個栽培品種的蕎麥種子總黃酮含量，米蕎1號中總黃酮含量最高，黑豐1號、云南旱苦、苦刺蕎、晉蕎4號次之，川渝3號中總黃酮含量最低；苦蕎的總黃酮含量在13.67～21.56mg/g之間，甜蕎總黃酮含量在5.79～7.23mg/g之間，苦蕎總黃酮含量總體高于甜蕎。

表1 不同栽培種蕎麥種子總黃酮含量Table 1 Concentration of total flavonoids in different cultivated species of buckwheat

表2 不同植物部位蕎麥總黃酮含量Table 2 Concentration of total flavonoids in different parts of buckwheat

從表2可以看出，比較各個栽培品種蕎麥的根、莖、葉、種子4個植物部位中總黃酮的含量，除西蕎2號外，每種蕎麥中葉的總黃酮含量均遠高于根、莖和種子；比較這6個品種中葉的總黃酮含量，野苦6號葉中含量最高，西蕎2號葉中含量最低。

表3 商品苦蕎茶的總黃酮含量Table 3 Concentration of total flavonoids in commodities of buckwheat tea

從表3可以看出商品苦蕎茶中總黃酮的含量，在彝鄉(xiāng)人苦蕎茶的4種商品中，彝鄉(xiāng)人高寒苦蕎茶中含量最高，彝鄉(xiāng)人黑苦蕎全皮茶中含量最低；三匠苦蕎茶的4種商品中，三匠黑苦蕎全株茶的含量最高，三匠黑苦蕎全胚芽茶中含量最低；17種商品苦蕎茶中，幾木朵苦蕎茶中含量最高，藝福堂苦蕎茶中含量最低。

3 結論

各栽培品種的蕎麥均采收于成都大學的蕎麥實驗田，所處的生長環(huán)境相同，但總黃酮含量有較大差距；如果這些蕎麥品種能直接采收于原生長地，對之進行總黃酮含量的測定，將會為蕎麥的研究利用提供更多的科學依據(jù)。本實驗結果表明，葉提取的總黃酮含量最高，但是與目前人們仍然認為在商品茶中苦蕎果實質優(yōu)的觀點不一致，本實驗為綜合和高效地利用蕎麥植物資源提供了一定的科學依據(jù)。不同商品苦蕎茶的總黃酮含量測定為課題組的系列研究提供了科學的實驗數(shù)據(jù)，更為該類商品的質量評價提供了數(shù)據(jù)參考。

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