板栗總苞多酚提取工藝優(yōu)化及其抗氧化性研究

石恩慧 郭凱軍 李 紅 谷明燦 魯 琳＊＊ 賈昌喜＊＊

(1.北京農(nóng)學(xué)院食品科學(xué)與工程學(xué)院，北京 102206;2.農(nóng)產(chǎn)品有害微生物及農(nóng)殘安全檢測(cè)與控制北京市重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，北京 102206;3.北京農(nóng)學(xué)院動(dòng)物科學(xué)與技術(shù)學(xué)院，北京 102206)

近年來(lái)，氧化應(yīng)激給動(dòng)物細(xì)胞和組織帶來(lái)的危害成為人們關(guān)注的熱點(diǎn)，其機(jī)制是氧分子失去了外圍電子形成的自由基會(huì)奪取其他細(xì)胞分子的外圍電子，使自身保持穩(wěn)定，造成一種連鎖反應(yīng)，使機(jī)體組織細(xì)胞分子受到損害。因此，研究天然抗氧化物，從根本上預(yù)防自由基氧化損傷迫在眉睫。

植物多酚作為新型飼料添加劑成為國(guó)內(nèi)外動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)學(xué)界的一個(gè)研究熱點(diǎn)。植物多酚是廣泛存在于植物體內(nèi)的天然產(chǎn)物，是植物的次生代謝產(chǎn)物，具有獨(dú)特的生理活性和藥用價(jià)值［1］，多酚具有較強(qiáng)的清除自由基、抗氧化活性、抗衰老等生物活性功能［2－6］。研究表明，板栗果仁、花、葉子和果實(shí)中提取物具有很強(qiáng)的抗氧化能力［7］。主要成份為植物多酚的歐洲屬栗樹(shù)提取物可以顯著增加過(guò)瘤胃蛋白質(zhì)的比例，減少奶牛瘤胃中氨氣的產(chǎn)生，同時(shí)也減少了飼料中非蛋白氮(NPN)和干物質(zhì)的損失［8］。在肉仔雞飼糧中加入栗樹(shù)提取物可以明顯提高肉仔雞的日增重和日采食量，同時(shí)糞便中氮的排放減少了 25% 以上［9］。Zoccarato 等［10］報(bào)道，用栗樹(shù)提取物替代抗生素可以顯著降低肉兔的死亡率。Liu等［11］報(bào)道，添加栗樹(shù)提取物能夠提高肉兔生長(zhǎng)性能，增強(qiáng)機(jī)體抗氧化能力，但不影響兔肉品質(zhì)。

我國(guó)對(duì)于板栗產(chǎn)業(yè)副產(chǎn)品的開(kāi)發(fā)集中于板栗殼和板栗總苞，焦啟揚(yáng)等［12］和張琳等［13］發(fā)現(xiàn)，板栗殼和板栗總苞的主要成分是以沒(méi)食子酸、鞣花酸為主的植物多酚。李金鳳等［14］和魯曉翔等［15］報(bào)道了板栗殼多酚的體外抗氧化能力;焦啟揚(yáng)等［12］研究表明，板栗總苞提取物對(duì)大腸桿菌、金黃色葡萄球菌及藤黃微球菌均有不同程度的抑制活性;黃宏妙等［16］研究表明，板栗總苞水提液可降低自由基代謝造成的機(jī)體損傷，表現(xiàn)出較強(qiáng)的抗氧化能力。但關(guān)于將板栗總苞或板栗殼用作飼料添加劑的報(bào)道較少［17］。本研究以最大化的板栗總苞多酚提取得率為目標(biāo)，確定水浴溶劑法提取板栗總苞多酚的最優(yōu)提取工藝條件;并通過(guò)檢測(cè)板栗總苞多酚對(duì)二苯代苦味?；杂苫?DPPH·)和2，2’－連氮－雙 －(3－乙基苯并噻唑啉 －6－磺酸)自由基(ABTS+·)清除率以及豬油過(guò)氧化值(POV)的影響，研究板栗總苞多酚的體外抗氧化能力，為板栗總苞多酚作為抗氧化飼料添加劑的應(yīng)用提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料與主要試劑

板栗總苞(采自北京市懷柔區(qū)板栗實(shí)驗(yàn)站):用粉碎機(jī)將板栗殼粉碎并過(guò)80目篩，－18℃避光保存?zhèn)溆谩?/p>

主要試劑:福林－酚(FC)試劑、沒(méi)食子酸標(biāo)準(zhǔn)品(含量 ＞98%)和 DPPH購(gòu)于 Sigma公司;ABTS購(gòu)于東京化成工業(yè)株式會(huì)社;維生素C和維生素E購(gòu)于北京奧博星生物技術(shù)有限責(zé)任公司。

1.2 板栗總苞多酚提取工藝流程

干燥板栗總苞→粉碎→溶劑與物料混合→不同條件下水浴提取(每個(gè)樣提取2次)→混合2次提取液→離心→濃縮→板栗總苞多酚提取液→冷凍干燥→提取物粉末。

1.3 板栗總苞多酚提取條件的研究

1.3.1 單因素試驗(yàn)設(shè)計(jì)

稱(chēng)取10 g板栗總苞，用乙醇濃度為60%，液料比為20∶1(mL∶g)，提取溫度為60 ℃，提取時(shí)間為120 min作為進(jìn)行單因素篩選試驗(yàn)的基礎(chǔ)條件。當(dāng)研究某一因素時(shí)，其他條件保持不變。乙醇濃度分別選用20%、30%、40%、50%、60%和70%;液料比(mL∶g)分別選用 15∶1、20∶1、25∶1、30∶1 和35∶1;提 取 時(shí) 間 分 別 選 用 40、80、120、160 和200 min;提取溫度分別選用 50、60、70、80 和90℃，按上述設(shè)計(jì)分別進(jìn)行單因素不同水平的選擇試驗(yàn)，得到的提取物按照標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)處理方法，測(cè)定在765 nm波長(zhǎng)處的吸光度，并計(jì)算轉(zhuǎn)換為板栗總苞多酚提取得率，以此比較提取效果。

1.3.2 正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)

為了綜合考慮各因素對(duì)板栗總苞多酚提取得率的影響，根據(jù)1.3.1中單因素試驗(yàn)結(jié)果，選取乙醇濃度、液料比、提取時(shí)間和提取溫度為4個(gè)考察因素，利用 SPSS 16.0設(shè)計(jì)四因素四水平［L16(44)］正交試驗(yàn)，試驗(yàn)因素水平見(jiàn)表1。

表1 試驗(yàn)因素水平Table 1 Factors and levels of this experiment

1.3.3 板栗總苞多酚的測(cè)定

1.3.3.1 沒(méi)食子酸標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)的制作

準(zhǔn)確稱(chēng)取5 mg沒(méi)食子酸標(biāo)準(zhǔn)品于50 mL容量瓶中，定容至刻度，配成0.1 mg/mL的標(biāo)準(zhǔn)液，分別吸取 0.5、1.0、1.5、2.0 和 2.5 mL 沒(méi)食子酸標(biāo)準(zhǔn)液(0.1 mg/mL)并定容至10 mL，配制成質(zhì)量濃度為 0.005、0.010、0.015、0.020、0.025 mg/mL的標(biāo)準(zhǔn)溶液。精確吸取上述標(biāo)準(zhǔn)溶液0.4 mL于10 mL離心管中，加入0.2 mol/L FC試劑1 mL、15%Na2CO3溶液2 mL，蒸餾水定容至 8 mL，25℃反應(yīng)2 h。另精確吸取蒸餾水0.4 mL，同法操作作為空白對(duì)照。在765 nm波長(zhǎng)處測(cè)量其吸光度。繪制吸光度與濃度的標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)(圖1)，并擬合線(xiàn)性回歸方程。

圖1 沒(méi)食子酸標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)Fig.1 Standard curve of gallic acid

所得標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)的線(xiàn)性回歸方程為:

式中:Y為吸光度;X為沒(méi)食子酸標(biāo)準(zhǔn)品濃度(mg/mL)。標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)表明，沒(méi)食子酸在濃度為0.005～0.030 mg/mL區(qū)間有良好的線(xiàn)性關(guān)系。1.3.3.2 板栗總苞多酚提取得率、多酚含量計(jì)算

按照以下公式計(jì)算板栗總苞多酚提取得率、多酚含量:

提取得率(%)=提取物質(zhì)量/原材料質(zhì)量×100;

多酚含量(%)=提取多酚質(zhì)量/提取物質(zhì)量×100。

1.4 板栗總苞多酚體外抗氧化試驗(yàn)

1.4.1 樣品處理

板栗總苞多酚和維生素C母液的配制:分別精確稱(chēng)取0.5 g板栗總苞多酚和維生素C粉末放于燒杯中，加蒸餾水溶解，將此溶液轉(zhuǎn)移到500 mL的容量瓶中，用蒸餾水定容至刻度，配成終濃度為1 mg/mL的母液;維生素E母液的配制:精確稱(chēng)取0.5 g維生素E粉末于燒杯中，加體積比為10%的乙醇水溶液20 mL，振蕩使之溶解，轉(zhuǎn)移到500 mL容量瓶中，加蒸餾水定容至刻度，配成終濃度為1 mg/mL的母液。

1.4.2 DPPH·清除率測(cè)定

參考Luo等［18］的方法，同時(shí)作適當(dāng)修改。取板栗總苞多酚、維生素C和維生素E母液，分別稀釋成 不 同 濃 度 (0.025、0.050、0.075、0.100、0.125、0.150、0.175 和 0.200 mg/mL) 的溶液。吸取不同濃度的板栗總苞多酚、維生素C和維生素 E 溶液 2.0 mL，加入 2.0 mL DPPH·溶液(0.2 mmol/L)，搖勻，避光放置 30 min。以無(wú)水乙醇調(diào)零，測(cè)定517 nm波長(zhǎng)處的吸光度(A樣);分別測(cè)定2.0 mL不同濃度的板栗總苞多酚、維生素C和維生素E溶液與2.0 mL無(wú)水乙醇混合液的吸光度作為對(duì)照(A對(duì)照);測(cè)定2.0 mL DPPH·溶液與2.0 mL無(wú)水乙醇混合液的吸光度作為空白(A空白)。DPPH·清除率按以下公式計(jì)算:

1.4.3 ABTS+·清除率測(cè)定

參考Re等［19］的方法，同時(shí)作適當(dāng)修改。取板栗總苞多酚、維生素C和維生素E母液，分別稀釋成不同濃度(0.050、0.100、0.150、0.250、0.300、0.400、0.450 和 0.500mg/mL) 的 溶 液。ABTS+·儲(chǔ)備液配制:配制2.45 mmol/L過(guò)硫酸鉀，用過(guò)硫酸鉀溶解ABTS粉末，配成7 mmol/L ABTS+·儲(chǔ)備液，避光、4℃冰箱中保存?zhèn)溆谩BTS+·測(cè)定液配制:將ABTS+·儲(chǔ)備液以磷酸鹽緩沖液(10 mmol/L，pH 7.4)稀釋?zhuān)蛊湮舛仍?34 nm波長(zhǎng)處達(dá)到(0.700±0.020)。測(cè)定方法:取4 mL ABTS+·測(cè)定液，加入40 μL不同濃度的板栗總苞多酚、維生素C和維生素E溶液，振蕩30 s，反應(yīng)10 min，在734 nm波長(zhǎng)處測(cè)定吸光度(A樣)。ABTS+·清除率按以下公式計(jì)算:

1.4.4 豬油 POV 測(cè)定

取板栗總苞多酚母液，分別稀釋成濃度為0(對(duì)照組)、50、100、150 和 200 μg/mL 的板栗總苞多酚溶液，各取4 mL，分別添加到盛有4 g豬油的燒杯中，混勻，放于60℃烘箱里［20］，每個(gè)濃度做3個(gè)平行試驗(yàn)，分別在 0、4、8、12、16 和 20d 時(shí)，參考GB/T 5538—2005方法測(cè)定豬油中POV。從結(jié)果中選取板栗總苞多酚最佳濃度，然后，以同樣的方法和測(cè)定時(shí)間，測(cè)定板栗總苞多酚和維生素C、維生素E在此濃度下對(duì)豬油中POV的影響。

1.5 統(tǒng)計(jì)分析

正交試驗(yàn)L16(44)由SPSS 16.0軟件生成，采用GLM程序?qū)φ辉囼?yàn)結(jié)果進(jìn)行方差分析，并確定提取工藝條件最優(yōu)化組合。采用ANOVA程序?qū)Π謇蹩偘喾优c維生素C、維生素E抗氧化性進(jìn)行分析并用Turkey進(jìn)行多重比較。

2 結(jié)果與分析

2.1 單因素試驗(yàn)結(jié)果與分析

由表2可知，隨著乙醇濃度增大，板栗總苞多酚提取得率呈現(xiàn)先增加后降低趨勢(shì)，當(dāng)乙醇濃度達(dá)到40%時(shí)，提取得率達(dá)到最大，此后隨乙醇濃度的增大，提取得率逐漸減小，由此，初步選定的乙醇濃度為30%;隨著液料比增加，板栗總苞多酚提取得率呈現(xiàn)先增加后趨于水平，液料比在30∶1(mL∶g)以后，提取得率趨于水平，考慮材料的節(jié)省，初步選用液料比為20∶1(mL∶g);隨著提取溫度的上升，板栗總苞多酚提取得率呈現(xiàn)先上升后降低的趨勢(shì)，到80℃時(shí)，提取得率達(dá)到最大，因此，初步選用的溫度為80℃;隨著提取時(shí)間的延長(zhǎng)，板栗總苞多酚提取得率先增加后趨于穩(wěn)定，考慮到實(shí)際生產(chǎn)中操作時(shí)間過(guò)長(zhǎng)也會(huì)提高成本，浪費(fèi)能源，因此，初步選用的提取時(shí)間為160 min。

表2 單因素試驗(yàn)結(jié)果Table 2 The results of single factor test

2.2 正交試驗(yàn)結(jié)果與分析

2.2.1 正交試驗(yàn)結(jié)果及其方差分析和最優(yōu)條件分析

表3給出正交試驗(yàn)的結(jié)果，并對(duì)結(jié)果進(jìn)行了方差分析，由表4可知，校正模型達(dá)到極顯著水平(P＜0.01)，說(shuō)明模型擬合程度良好，誤差小，模型是合適的;校正模型的相關(guān)系數(shù)R2=0.992，校正決定系數(shù)R2

adj=0.960，說(shuō)明試驗(yàn)方法可靠，能較好地描述試驗(yàn)結(jié)果，對(duì)真實(shí)試驗(yàn)點(diǎn)的分析是可行的。根據(jù)四因素P值的大小可知，提取溫度(D)、乙醇濃度(A)和液料比(B)對(duì)板栗總苞多酚提取得率有顯著或極顯著影響(P＜0.05或 P＜0.01)，提取時(shí)間(C)無(wú)顯著影響(P＞0.05)，因此，影響因素主次順序?yàn)?D＞A＞B＞C。

表5顯示了各因素不同水平的板栗總苞多酚提取得率，從結(jié)果直觀分析，各因素水平對(duì)板栗總苞多酚提取得率影響的強(qiáng)弱順序是:A30＞A40＞A50＞ A20，B18∶1＞ B21∶1＞ B24∶1＞ B15∶1，C140＞ C110＞C170＞C80，D80＞D60＞D70＞D90，因此確定板栗總苞多酚最優(yōu)提取工藝為:A30B18∶1C140D80，即乙醇濃度 30%，液料比 18∶1(mL∶g)，提取時(shí)間 140 min，提取溫度80℃。

2.2.2 板栗總苞多酚提取得率和多酚含量

取10 g板栗總苞粉末，按上述正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)得出的最佳工藝條件提取2次，濃縮、冷凍干燥得到板栗總苞多酚粉末。稱(chēng)取部分板栗總苞多酚粉末，用蒸餾水溶解，定容、檢測(cè)吸光度，并換算得到板栗總苞多酚提取得率和多酚含量。計(jì)算出本試驗(yàn)條件下板栗總苞多酚提取得率為22.61%，其中多酚含量為51.23%

2.3 板栗總苞多酚體外抗氧化性

2.3.1 板栗總苞多酚對(duì)DPPH·清除能力的影響

由圖 2可知，在 0.003～0.025 mg/mL 范圍內(nèi)，隨著板栗總苞多酚和維生素C溶液濃度的增加，DPPH·清除率增加，并具有一定線(xiàn)性關(guān)系，線(xiàn)性方程分別為 Y=3 279.3X+10.5(R2=0.987 0)和 Y=3 214X+18.262(R2=0.938 8)，當(dāng)濃度達(dá)到0.025 mg/mL后，DPPH·清除率趨于穩(wěn)定;隨著維生素E溶液濃度增加，DPPH·清除率不斷增加并具有一定線(xiàn)性關(guān)系，線(xiàn)性方程為Y=107.99X+8.908 3(R2=0.952 3)。DPPH·清除能力的大小常用半清除率(EC50)表示，EC50是當(dāng)清除率達(dá)到50%時(shí)所需要的抗氧化劑濃度，因此，本試驗(yàn)中板栗總苞多酚、維生素C和維生素E的EC50分別為 0.012 0、0.009 7 和 0.381 0 mg/mL，EC50越小，清除DPPH·的能力越大，則其抗氧化能力就越強(qiáng)，由此得出，板栗總苞多酚的抗氧化能力與維生素C相當(dāng)，且兩者的抗氧化能力均優(yōu)于維生素E，所以板栗總苞多酚有較強(qiáng)的抗氧化能力。

表3 正交試驗(yàn)［L16(44)］結(jié)果Table 3 The results of orthogonal test［L16(44)］

表4 正交試驗(yàn)結(jié)果的方差分析Table 4 Analysis of variance for results of orthogonal test

2.3.2 板栗總苞多酚對(duì) ABTS+·清除能力的影響

ABTS經(jīng)過(guò)氧化生成穩(wěn)定的藍(lán)綠色的ABTS+·，當(dāng)有抗氧化物后，其與ABTS+·反應(yīng)使反應(yīng)體系褪色。由圖3可知，板栗總苞多酚、維生素C和維生素E對(duì)ABTS+·的清除能力隨板栗總苞多酚、維生素C和維生素E溶液濃度的增大而增大，維生素 E很快達(dá)到平衡，在0～0.200 mg/mL之間它們的清除自由基的能力都具有一定的線(xiàn)性關(guān)系，線(xiàn)性方程分別為Y=349.41X+9.520 4(R2=0.995 2)，Y=336.39X+3.837 9(R2=0.977 5) 和 Y=61.048X+8.688 8(R2=0.983 8)，它們的 EC50分別為 0.116 0、0.137 0和0.676 7 mg/mL，所以，板栗總苞多酚對(duì)ABTS+·的清除能力優(yōu)于維生素C和維生素E。由此可知，板栗總苞多酚對(duì)ABTS+·有很好的清除能力。

表5 最優(yōu)條件分析Table 5 Analysis of optimal conditions

圖2 清除DPPH·效果Fig.2 Scavenging effects on DPPH·

2.3.3 板栗總苞多酚對(duì)豬油POV的影響

由圖4可知，經(jīng)過(guò)20d的60℃加熱強(qiáng)化氧化作用，對(duì)照組(0 μg/mg)豬油的POV迅速增大，而添加板栗總苞多酚組的POV顯著小于對(duì)照組(P＜0.05)，由此說(shuō)明板栗總苞多酚對(duì)豬油有良好的抗氧化效果，且抗氧化作用與板栗總苞多酚溶液濃度有關(guān)，隨著濃度的增加，板栗總苞多酚的抗氧化性能逐漸升高，濃度在0～100 μg/mg之間板栗總苞多酚的抗氧化性能變化顯著(P＜0.05)，而濃度在100～200 μg/mg之間，抗氧化性能變化不顯著(P ＞0.05)，所以，選 100 μg/mg 作為板栗總苞多酚對(duì)豬油抗氧化的最佳濃度，此濃度下板栗總苞多酚的抗氧化效果與同濃度的維生素C相當(dāng)，且二者均優(yōu)于同濃度的維生素E(圖5)。因此，板栗總苞多酚能很好地抑制動(dòng)物油POV的升高。

圖3 清除ABTS+·的效果Fig.3 Scavenging effects on ABTS+·

圖4 不同板栗總苞多酚濃度對(duì)豬油POV的影響Fig.4 Effects ofdifferent cocentrations of polyphenols in Castanea mollissima Blume on POV

圖5 不同抗氧化劑對(duì)豬油POV的影響Fig.5 Effects ofdifferent antioxidants on POV

3 討論

3.1 板栗總苞多酚提取工藝的優(yōu)化

李金鳳等［14］采用水浴法浸提板栗殼多酚，得到的最佳提取條件為:乙醇濃度59.7%，液料比18∶1(mL∶g)，浸提溫度 52.6 ℃，浸提次數(shù) 3 次。在此最優(yōu)工藝條件下板栗殼多酚提取得率7.59%。魯曉翔等［15］采用水浴振蕩法優(yōu)化板栗殼多酚的提取工藝，最終確定最優(yōu)提取條件為:乙醇濃度30%，液料比23∶1(mL∶g)，并在 70℃水浴條件下振蕩提取170 min。在此條件下，板栗殼多酚提取得率7.9%。以上板栗殼多酚提取得率都低于本研究板栗總苞多酚提取得率，出現(xiàn)這樣結(jié)果的原因可能是板栗總苞中多酚含量高于板栗殼中的多酚含量。焦啟揚(yáng)等［12］和張琳等［13］分離并鑒定板栗總苞乙醇提取物的化學(xué)成分，并鑒定化合物結(jié)構(gòu)，發(fā)現(xiàn)板栗總苞提取物有沒(méi)食子酸、鞣花酸、莽草酸、槲皮素、原兒茶素、齊墩果酸、烏索酸等多種多酚成分，并具有抗糖尿病作用。杜運(yùn)平等［21］采用醇水溶液為提取劑提取板栗苞多酚，優(yōu)化工藝為:40%的乙醇濃度，液料比為 20∶1(mL∶g)，在80℃提取條件下提取120 min，在此條件下，多酚含量為49.83%，與本研究提取方法［乙醇濃度為30%，液料比為18∶1(mL∶g)，提取時(shí)間為140 min，提取溫度為80℃］相似，但其提取物中的多酚含量低于本研究所獲得的多酚含量(51.23%)。試驗(yàn)結(jié)果表明，本試驗(yàn)提取工藝可行，同時(shí)節(jié)省了原材料，降低了提取物中乙醇的殘留量，提高了多酚提取得率。

3.2 板栗總苞多酚體外抗氧化性研究

板栗總苞多酚研究的最多是其抗氧化性，本研究發(fā)現(xiàn)其有很強(qiáng)的抗氧化能力，目前還沒(méi)有發(fā)現(xiàn)關(guān)于板栗總苞多酚抗氧化性研究的文獻(xiàn)報(bào)道。但是前人已經(jīng)發(fā)現(xiàn)板栗殼、花、葉和果仁等的多酚具有抗氧化能力。魯曉翔等［15］研究板栗殼與維生素C對(duì)DPPH·溶液清除率的大小，并確定板栗殼多酚抗氧化性的大小，試驗(yàn)結(jié)果為5 mg/mL的多酚提取液對(duì)DPPH·的清除率為91.49%，低于維生素C的清除率(96.18%)。通過(guò)同樣的方法李金鳳等［14］研究發(fā)現(xiàn)，板栗殼提取物的濃度為200 mg/L時(shí)，DPPH·抑制率達(dá)89.7%，均高于同質(zhì)量濃度的2，6－二叔丁基 －4－甲基苯酚(BHT)，但低于同質(zhì)量濃度維生素C。但本研究表明，板栗總苞多酚與維生素C抗氧化能力相當(dāng)，與以上研究板栗殼多酚和維生素C抗氧化能力的比較結(jié)果不同，可能是由于板栗總苞中多酚的含量高于板栗殼所致。Dinis等［22］研究不同生態(tài)環(huán)境下板栗的抗氧化性試驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)，DPPH·的EC50在 7.3 ～33.5 mg/mL 之間，ABTS+·的 EC50在5.2～14.1 mg/mL之間，此結(jié)果與本研究板栗總苞多酚的 DPPH·的 EC50為 0.0120 mg/mL，ABTS+·的EC50為0.116 0 mg/mL的結(jié)果不同，出現(xiàn)這種結(jié)果的原因可能是研究試驗(yàn)中板栗的品種不一樣，提取得率不一致，導(dǎo)致多酚抗氧化性有差別。Barreira等［7］研究發(fā)現(xiàn)，板栗樹(shù)的花、葉子、樹(shù)皮和果實(shí)提取物 DPPH·的 EC50在0.032 7～0.170 0 mg/mL范圍內(nèi)，此結(jié)果與本研究DPPH·的EC50(0.012 0 mg/mL)試驗(yàn)結(jié)果一致。但是，通過(guò)板栗總苞多酚對(duì)動(dòng)物油POV的影響來(lái)研究板栗總苞多酚抗氧化性能，還沒(méi)有發(fā)現(xiàn)相關(guān)的國(guó)內(nèi)外文獻(xiàn)報(bào)道。

4 結(jié)論

①由板栗總苞多酚提取條件的研究可知，各因素對(duì)板栗總苞多酚提取得率的影響次序是:提取溫度＞乙醇濃度＞液料比＞提取時(shí)間。最佳提取工藝為:乙醇濃度30%，提取溫度80℃，提取時(shí)間 140 min，液料比 18∶1(mL∶g)，在以上最優(yōu)條件下板栗總苞多酚提取得率為22.61%，提取物中多酚含量為51.23%。

②由板栗總苞多酚抗氧化性試驗(yàn)結(jié)果可知，板栗總苞多酚對(duì)DPPH·和ABTS+·的清除能力很強(qiáng);板栗總苞多酚對(duì)豬油有良好的抗氧化效果，與板栗總苞多酚的濃度有關(guān)，100 μg/mg為板栗總苞多酚對(duì)豬油抗氧化的最佳濃度。

致謝:

感謝北京農(nóng)學(xué)院動(dòng)物科學(xué)與技術(shù)學(xué)院郭凱軍副教授和食品科學(xué)與工程學(xué)院賈昌喜教授對(duì)文稿所提的寶貴意見(jiàn)。

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