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    抗流感中藥冰香散提取工藝的正交實(shí)驗(yàn)研究

    2013-08-24 05:55:28劉抗倫丁偉向燕徐培平
    環(huán)球中醫(yī)藥 2013年7期
    關(guān)鍵詞:油率揮發(fā)油粒度

    劉抗倫 丁偉 向燕 徐培平

    冰香散是國(guó)家自然科學(xué)基金課題(81072948)中運(yùn)用中藥預(yù)防流感所研制的純中藥制劑。它是由廣藿香、野菊花、小茴香、冰片等中藥提取的揮發(fā)油制劑。廣藿香為唇形科植物廣藿香的干燥地上部分。辛,微溫。具有芳香化濁、和中止嘔、發(fā)表解暑作用。野菊花為菊科植物野菊的干燥頭狀花序???、辛、微寒。具有清熱解毒、瀉火平肝作用。小茴香為傘形科植物茴香的干燥成熟果實(shí)。辛、溫。具有散寒止痛、理氣和胃作用。艾葉為菊科植物艾的干燥葉。辛、苦、溫,具有溫經(jīng)止血、散寒止痛作用。冰片辛、苦、微寒,具有開(kāi)竅醒神、清熱止痛作用[1]。經(jīng)實(shí)驗(yàn)表明,冰香散體外對(duì)甲Ⅰ型流感病毒有預(yù)防作用和直接抑制作用[2]。

    課題組以冰香散揮發(fā)油得率為指標(biāo),采用共水蒸餾法,用L9(34)正交試驗(yàn)優(yōu)選提取條件,選取冰香散的顆粒粒度、加水量、提取時(shí)間、提取次數(shù)4個(gè)因素,每個(gè)因素設(shè)3個(gè)水平,篩選冰香散的最佳提取工藝,為冰香散的藥物制備和質(zhì)量控制提供依據(jù)。

    1 材料和儀器

    1.1 藥材

    冰香散處方為廣藿香15 g、野菊花15 g、艾草10 g、茴香10 g、冰片1 g,購(gòu)自廣州中醫(yī)藥大學(xué)第一附屬醫(yī)院。

    1.2 儀器

    TC-15套式恒溫器(海寧市新華醫(yī)療器械廠);揮發(fā)油測(cè)定器(上海玻璃儀器廠);BS224S型電子分析天平(德國(guó)Sartorius公司);KQ5200E型超聲儀(昆山市超聲儀器有限公司)。

    2 方法與結(jié)果

    2.1 正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)

    根據(jù)預(yù)試驗(yàn)及冰香散中所含有中藥材的揮發(fā)油提取工藝研究文獻(xiàn)[3-5],綜合考慮影響揮發(fā)油的提取因素,選擇冰香散顆粒粒度(A)、加水倍量(B)、浸泡時(shí)間(C)、蒸餾時(shí)間(D)4項(xiàng)為考察因素,每個(gè)因素設(shè)3個(gè)水平,以揮發(fā)油提取率作為考察指標(biāo),設(shè)計(jì)L9(34)正交試驗(yàn)。采用共水蒸餾法,所得揮發(fā)油收集在揮發(fā)油測(cè)定器中,精確讀取揮發(fā)油得油量。冰香散提取因素水平表見(jiàn)表1。

    表1 冰香散提取工藝因素水平

    2.2 揮發(fā)油提取

    以冰香散處方準(zhǔn)確稱取50 g冰香散藥材,按照中國(guó)藥典2010版標(biāo)準(zhǔn)制成粗粉、中粉、細(xì)粉,放置于2000 ml圓底燒瓶中,采用L9(34)正交表安排實(shí)驗(yàn),按《中國(guó)藥典》2010年版一部附錄XD甲法揮發(fā)油測(cè)定法,提取揮發(fā)油,放置2小時(shí),精確讀取揮發(fā)油量,平行實(shí)驗(yàn)3次,計(jì)算揮發(fā)油得油率。公式為:得油率(%)=(得油量×揮發(fā)油密度/冰香散重量)× 100%[3]。

    正交試驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)表2,各因素組合的極差分別為:顆粒粒度(RA)0.15,加水量(RB)0.18,浸泡時(shí)間(RC)0.12,蒸餾時(shí)間(RD)0.39,它們之間的關(guān)系是RD>RB>RA>RC,極差分析結(jié)果表明,4個(gè)因素的影響大小依次為:蒸餾時(shí)間(D)>加水量(B)>顆粒粒度(A)>浸泡時(shí)間(C),浸泡時(shí)間對(duì)得油率的影響最小,所以將此列作為誤差列進(jìn)行方差分析。

    表2 正交試驗(yàn)結(jié)果

    2.3 方差分析

    為進(jìn)一步確定各因素對(duì)結(jié)果的影響大小,對(duì)試驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行了方差分析。見(jiàn)表3。方差分析結(jié)果表明,顆粒粒度(A)、加水量(B)、浸泡時(shí)間(C)、蒸餾時(shí)間(D)四個(gè)影響因素的P值都大于0.05,即這4個(gè)因素對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果均無(wú)顯著影響。根據(jù)正交試驗(yàn)結(jié)果,得出的最佳提取工藝組合為A2B1C2D3,即將藥材粉碎成中粉,加10倍量水,浸泡1.5小時(shí),提取6小時(shí)。

    表3 方差分析表

    3 結(jié)論與討論

    采用正交試驗(yàn),運(yùn)用方差分析,對(duì)影響共水蒸餾法提取冰香散揮發(fā)油的主要因素進(jìn)行分析,本實(shí)驗(yàn)以得油率為考察指標(biāo),對(duì)冰香散揮發(fā)油的最佳提取工藝進(jìn)行了優(yōu)選。結(jié)果表明,冰香散揮發(fā)油的最佳提取工藝條件為選用冰香散藥材粉碎成中粉,加10倍量水,浸泡1.5小時(shí),提取6小時(shí)。

    本實(shí)驗(yàn)中,由極差RD>RB>RA>RC,由此可知提取時(shí)間是影響揮發(fā)油得率的重要因素,提取時(shí)間越長(zhǎng),得油率越高,表明隨著提取時(shí)間的延長(zhǎng),提取越來(lái)越充分。提示提取冰香散揮發(fā)油時(shí)需要重視提取時(shí)間的選擇。一般認(rèn)為,藥材顆粒粒度與有效成分提取率正相關(guān),但含揮發(fā)油類藥材要在一定的粒度下,才能提取出最多的油量。粉末過(guò)細(xì),在蒸餾提取過(guò)程中容易吸附揮發(fā)油,使揮發(fā)油不能隨水蒸氣蒸出[6]。而且揮發(fā)油提取裝置中所用的圓底燒瓶的容積也影響揮發(fā)油的得率,燒瓶?jī)?nèi)容物超過(guò)其容積的50% 以上,提取時(shí)容易爆沸,從而使藥材粗粉隨水流入收集裝置,這也是試驗(yàn)中需要注意的問(wèn)題[7]。

    [1]國(guó)家藥典委員會(huì).中華人民共和國(guó)藥典(一部)[S].北京:中國(guó)醫(yī)藥科技出版社,2010.

    [2]丁偉,趙昉,許秀妮,等.冰香散揮發(fā)油對(duì)甲Ⅰ型流感病毒體外作用研究[J].中藥材,35(8):1298-1300.

    [3]魯爭(zhēng),魯雨,左杰,等.艾葉揮發(fā)油提取工藝研究[J].時(shí)珍國(guó)醫(yī)國(guó)藥,2011,22(2):389-390.

    [4]陳秋實(shí),吳杰,翁濤,等.野菊花揮發(fā)油的提取工藝研究[J].武漢生物工程學(xué)院學(xué)報(bào),2008,4(3):140-142.

    [5]王允忠,陳妍,烏莉婭·沙依提.正交試驗(yàn)法優(yōu)選小茴香中揮發(fā)油的提取工藝[J].新疆中醫(yī)藥,2008,26(1):12-13.

    [6]崔紅花,趙英日,沈志濱.砂仁中揮發(fā)油成分的多指標(biāo)均勻設(shè)計(jì)提取工藝分析[J].時(shí)珍國(guó)醫(yī)國(guó)藥,2010,21(7):1816.

    [7]魏運(yùn)姣,趙熠.降香揮發(fā)油提取工藝的正交設(shè)計(jì)法優(yōu)選[J].時(shí)珍國(guó)醫(yī)國(guó)藥,2012,23(12):3155-3156.

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